1、主要內容主要內容一產前診斷的目的二產前診斷的概念簡介三產前診斷的適用情況四產前診斷技術與方法 五無創產前DNA檢測六產前診斷倫理學問題產前診斷的目的產前診斷的目的出生缺陷出生缺陷臨床上尚缺乏針對這些出生缺陷的有效治療措施臨床上尚缺乏針對這些出生缺陷的有效治療措施 至少至少20%20%的缺陷兒的缺陷兒自然流產自然流產 20% 20%出生后很快死亡出生后很快死亡 存活下來的人群中存活下來的人群中2%2%左右會發生左右會發生重要缺陷重要缺陷給家庭和社會帶來巨大的精神和經濟壓力給家庭和社會帶來巨大的精神和經濟壓力, ,影響了全民素影響了全民素質的提高。質的提高。 遺傳因素遺傳因素發生原因發生原因 環境

2、因素環境因素 兩者共同作用兩者共同作用 遺傳咨詢遺傳咨詢目前可以通過目前可以通過 產前診斷產前診斷 選擇性終止妊娠選擇性終止妊娠等方法等方法減少缺陷兒出生率減少缺陷兒出生率。 出生缺陷 影響人的一生 影響一個家庭 影響一個社會唐氏綜合征患兒唐氏綜合征患兒 三體型21-三體(FISH)der(21;21)唐氏綜合征核型圖譜無腦兒無腦兒脊柱裂脊柱裂腦積水腦積水開放性神經管缺陷開放性神經管缺陷(NTD)產前診斷產前診斷 產前診斷又稱產前診斷又稱宮內診斷宮內診斷或或出生前診斷出生前診斷, , 是指在胎兒出是指在胎兒出生前用各種方法診斷胎兒是生前用各種方法診斷胎兒是否患有某種否患有某種遺傳病遺傳病或先天

3、性或先天性疾病的一種手段疾病的一種手段, , 是人類細是人類細胞遺傳學、分子遺傳學、生胞遺傳學、分子遺傳學、生物化學和臨床醫學實踐緊密物化學和臨床醫學實踐緊密結合的一門學科結合的一門學科 。篩查與診斷篩查與診斷胎兒健康狀況的檢查分為胎兒健康狀況的檢查分為 篩查篩查 兩類。兩類。 診斷診斷 篩查篩查：是針對胎兒是否有發生某種遺傳病：是針對胎兒是否有發生某種遺傳病 高風險進行的；篩查的高風險進行的；篩查的方法簡單方法簡單, , 結果結果快速快速, , 成本低廉成本低廉, , 可分析大批量標本可分析大批量標本, , 但其但其敏感性和特異性均較差敏感性和特異性均較差。不能不能作為作為對所疑問的疾病作對

4、所疑問的疾病作最后最后診斷的診斷的依據依據。篩。篩查的結果分為查的結果分為陽性陽性和和陰性陰性, , 陽性只能說陽性只能說明病人有明病人有可能可能患病患病, , 而陰性結果也而陰性結果也不能不能徹底排除徹底排除患病的可能性?；疾〉目赡苄浴：Y查與診斷篩查與診斷診斷診斷：診斷性檢測必須建立在先癥者：診斷性檢測必須建立在先癥者確診基礎上確診基礎上, , 是有是有目的性目的性的。的。敏感敏感性和特異性較高性和特異性較高, , 結果準確結果準確可靠可靠, , 但但成本高成本高, , 時間長時間長。對篩查結果。對篩查結果陽陽性性者應提供診斷性的檢查者應提供診斷性的檢查, ,以達到以達到對所疑問的疾病進行最

5、終診斷的目對所疑問的疾病進行最終診斷的目的。產前診斷中應遵從：的。產前診斷中應遵從：篩查在先篩查在先, , 診斷在后診斷在后的原則。的原則。產前篩查對表型正常的人群進行產前篩查。產前篩查篩查出較高可能孕育異常胎兒的高風險人群。產前診斷高風險人群最后通過診斷性措施，如絨毛、羊水或臍帶血穿刺等方法確診異常胎兒。產前診斷適應征 唐氏篩查高風險唐氏篩查高風險孕婦孕婦 高齡孕婦（高齡孕婦（分娩年齡分娩年齡35歲歲） 曾生育過染色體異?；純赫咴^染色體異常患兒者 夫婦之一為某種單基因病患者或攜帶者夫婦之一為某種單基因病患者或攜帶者（耳聾等）（耳聾等） 孕婦有環境致畸因素接觸史，尤其是孕婦活動性孕婦有環

6、境致畸因素接觸史，尤其是孕婦活動性TORCH感染史的孕婦感染史的孕婦妊娠期產前診斷妊娠期產前診斷一一. . 產前診斷的技術手段目前主要有產前診斷的技術手段目前主要有：影像學影像學生化遺傳檢測生化遺傳檢測染色體核型分析染色體核型分析基因檢測基因檢測等方法等方法妊娠期產前診斷妊娠期產前診斷二二. . 產前診斷取材途徑產前診斷取材途徑： 產前診斷取材方法包括兩大類產前診斷取材方法包括兩大類 侵入性侵入性（創傷性）（創傷性） 非侵入性非侵入性（非創傷性）（非創傷性） 創傷性取材方法創傷性取材方法包括：包括： 羊膜腔穿刺、羊膜腔穿刺、 絨毛活檢、絨毛活檢、 臍靜脈穿刺、臍靜脈穿刺、 胎兒鏡和胚胎活組織檢

7、查胎兒鏡和胚胎活組織檢查等等 。 其中羊膜腔穿刺和絨毛取樣目前最常用其中羊膜腔穿刺和絨毛取樣目前最常用 妊娠期產前診斷妊娠期產前診斷二二. . 產前診斷取材途徑產前診斷取材途徑： l 非創傷性取材方法非創傷性取材方法包括包括 植入前診斷、植入前診斷、 孕婦外周血分離胎兒細胞、孕婦外周血分離胎兒細胞、 宮頸黏液沖洗、宮頸黏液沖洗、 孕婦血清篩查、孕婦血清篩查、 超聲診斷超聲診斷等。等。母體母體常見產前篩查與診斷技術方法方法關鍵數據描述關鍵數據描述孕周孕周檢測周期檢測周期血清學篩查血清學篩查5%假陽性率假陽性率60%80%檢出率檢出率1113+6（孕早期）（孕早期）1420+6 （孕中期）（孕中期

8、）一周內一周內胎兒頸后透明帶檢查胎兒頸后透明帶檢查（NT）5%假陽性率假陽性率60%80%檢出率檢出率1113當日當日絨毛膜穿刺絨毛膜穿刺0.2%0.5%流產率流產率檢出率檢出率99%101445周周羊水穿刺羊水穿刺0.1%0.2%流產率流產率檢出率檢出率99%18303周周臍帶血穿刺臍帶血穿刺0.5%1%流產率流產率檢出率檢出率99%18323周周無創產前基因檢測無創產前基因檢測（NIPT）無流產風險無流產風險檢出率檢出率99%82412周周血清標志物產前篩查主要手段 母血清標志物的檢測來發現懷有先天缺陷母血清標志物的檢測來發現懷有先天缺陷胎兒的高危孕婦胎兒的高危孕婦 產前篩查中最常用的血清

9、標志物是產前篩查中最常用的血清標志物是AFPAFP、游離游離-HCG-HCG、游離雌三醇（、游離雌三醇（uEuE3 3）和妊娠相）和妊娠相關血漿蛋白（關血漿蛋白（PAPP-APAPP-A）等。）等。AFP是NTD及先天愚型的標記物母體血清中升高的母體血清中升高的AFPAFP全部來自胎兒全部來自胎兒 唐氏綜合征胎兒唐氏綜合征胎兒 母體血清母體血清AFPAFP水平比正常妊娠水平比正常妊娠低低 NTDNTD胎兒胎兒 孕婦血清及羊水中的孕婦血清及羊水中的AFPAFP水平比正常妊娠水平比正常妊娠高高v早孕期唐氏篩查早孕期唐氏篩查（在（在11-13+6周采血）周采血） PAPP-A+-HCG 結合檢出率更

10、高結合檢出率更高v中孕期唐氏篩查中孕期唐氏篩查（在（在14-20+6周采血）周采血） AFP+游離游離-HCG+uE3 21-三體、三體、18-三體、神經管缺陷三體、神經管缺陷v早、中孕期聯合篩查早、中孕期聯合篩查唐氏綜合征產前篩查早孕期超聲篩查v NT是獨立的早孕期篩查指標（是獨立的早孕期篩查指標（）羊膜腔穿刺最常用的有創性產前診斷技術最常用的有創性產前診斷技術方法：方法：孕孕1830周周抽取抽取20ml羊羊水，進行細胞培養或其他檢測。水，進行細胞培養或其他檢測。用途：用途：胎兒染色體病和單基因胎兒染色體病和單基因遺傳病的產前診斷遺傳病的產前診斷安全：安全：與之相關的流產率與之相關的流產率絨

11、毛活檢（CVS）方法：孕方法：孕10周周-14周周抽取胎盤位置的絨毛組織20-40ml，進行細胞培養或生化檢查。用途：用途：胎兒染色體病和單基因胎兒染色體病和單基因遺傳病的產前診斷遺傳病的產前診斷安全：安全：與之相關的流產率與之相關的流產率 臍靜脈穿刺方法：孕方法：孕18-32周周方法與羊水穿刺相似，取樣部位不同。 （進入胎兒循環）（進入胎兒循環）用途：羊水或絨毛檢查失敗補救用途：羊水或絨毛檢查失敗補救 快速胎兒核型分析快速胎兒核型分析 胎兒宮內感染的診斷胎兒宮內感染的診斷 胎兒血液系統疾病產前診斷胎兒血液系統疾病產前診斷安全：安全：流產率流產率1孕婦外周血分離胎兒細胞孕婦外周血分離胎兒細胞

12、屬屬非侵入性非侵入性（非創傷性）產前診斷技術。孕婦（非創傷性）產前診斷技術。孕婦外周血外周血中存在胎兒細胞中存在胎兒細胞( (滋養細胞、淋巴細胞、顆滋養細胞、淋巴細胞、顆粒細胞及有核紅細胞粒細胞及有核紅細胞) )，通過分離、富集這些細胞，通過分離、富集這些細胞可用于產前診斷，時間一般為孕可用于產前診斷，時間一般為孕7-257-25周周，以，以1515周周為最佳，為最佳，有核紅細胞有核紅細胞是用于產前診斷的是用于產前診斷的最理想最理想的的細胞，但孕婦外周血中胎兒細胞的細胞，但孕婦外周血中胎兒細胞的數目極少數目極少，技，技術要求很高，需要孕婦血量較多，故現已較少用。術要求很高，需要孕婦血量較多，故

13、現已較少用。 定義：定義：抽取孕婦外周血采用高通量測序技術進行抽取孕婦外周血采用高通量測序技術進行 胎兒胎兒21-三體、三體、18-三體、三體、13-三體綜合征三體綜合征檢測檢測 不具有非羊膜腔或絨毛膜穿刺損傷性不具有非羊膜腔或絨毛膜穿刺損傷性 準確性：準確性： 99.2% （21-三體和三體和18-三體）三體） 高風險孕婦：高風險孕婦：需要產前診斷驗證需要產前診斷驗證無創DNA產前檢測-高級篩查28理論基礎含量動態長度代謝孕婦血液中，胎兒游離DNA是細胞DNA的970倍，占母子全部游離DNA含量的3-6妊娠第5周開始可檢出胎兒游離DNA，隨孕周增加而增加，但存在個體差異妊娠后血漿母親游離DN

14、A長度明顯增加，胎兒游離DNA分子片斷化，平均長162bp分娩后2h就無法檢出，平均半衰期為（4-30min）胎兒自身DNA可進入母體的外周血（1997年香港人 Luo Dennis 在牛津大學發現）29異常：母體+胎兒共115條檢測原理總體數量差異正常：母體+胎兒共110條胎兒染色體非整倍體導致母血漿中游離胎兒染色體非整倍體導致母血漿中游離DNADNA劑量變化劑量變化無創性胎兒非整倍體(NTPT)檢測 大量臨床測試表明，大量臨床測試表明，NIPT技術對于技術對于21和和18三體檢測的靈敏度和特異性均接近三體檢測的靈敏度和特異性均接近100%，13三體的檢測準確度也在提高，性染色體三體的檢測準

15、確度也在提高，性染色體的準確性需要提高的準確性需要提高 假陽性和假陰性不能避免假陽性和假陰性不能避免NIPT假陽性 假陽性：假陽性：誤診，實際無病，但根據篩檢誤診，實際無病，但根據篩檢 被判為有病被判為有病 假陽性原因：假陽性原因： 1.局限性胎盤嵌合型局限性胎盤嵌合型 21三體假陽性三體假陽性 2.單親二體單親二體 21三體假陽性三體假陽性 3.母親為非整倍體母親為非整倍體 X三體假陽性三體假陽性 4.母親為實質性腫瘤母親為實質性腫瘤 13三體假陽性三體假陽性NIPT假陰性 假陰性：假陰性：漏診，實際有病，但根據篩檢漏診，實際有病，但根據篩檢 被判為無病被判為無病 假陰性原因：假陰性原因： 1.孕周過早孕周過早 2.多胎多胎 3.雙胎消失雙胎消失 3.胎盤嵌合胎盤嵌合 5.標本處理不當標本處理不當33 99%的準確率 假陽性率極低 只需5-10ml孕婦靜脈血 無需空腹采血 無宮內感染和流產風險 孕12周即可檢測 10工作日內出報告 60-80%的準確性 假陽性率為5% 需空腹采血 結合B超 只能檢測21和18-三體，不能檢測13-三體 侵入性取樣方式，孕婦心理壓力大 有宮內感染和流產風險 存在標本被污染或細胞培養失敗的風險 不適宜病毒攜帶者、胎位特殊者、Rh陰性血者等特殊情況普通唐篩產前