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文檔簡介

1、實驗九、飼料中粗纖維的測定一、實驗目的使學生掌握用飼料中粗纖維的測定方法，了解粗纖維測定方法中存在問題及解決的方案。二、實驗原理用固定量的酸和堿，在特定條件下消煮樣品，再用乙醚、乙醇除去醚溶物，經高溫灼燒扣除礦物質的量，所余量稱為粗纖維。它不是一個確切的化學實體，只是在公認強制規定的條件下，測出的概略養分。其中以纖維素為主，還有少量半纖維素和木質素。三、實驗設備1、實驗室用樣品粉碎機或研缽；2、分樣篩：孔徑0.45mm（40目）；3、分析天平：感量0.0001g；4、電熱恒溫箱：可控制溫度在130；5、高溫爐：電加熱，可控制溫度在550600；6、古氏坩堝：30ml，預先加入30ml酸洗石棉懸

2、浮液。再抽干，以石棉厚度均勻，不透光為宜；7、消煮器：由冷凝球的高型燒杯（50ml）或有冷凝管的錐形瓶；8、鍋濾裝置：抽真空裝置，吸濾瓶及漏斗；9、濾器：200目不銹鋼網和尼龍網，或G2號玻璃濾器；10、干燥器：用氯化鈣(干燥試劑)或變色硅膠作干燥劑。四、實驗內容1、稱樣：稱取12g試樣，準確至0.0002g，如果脂肪<1%可不脫脂，110%可不必脫脂，但建議脫脂，脂肪>10%必須脫脂，或用測脂肪后殘渣。2、酸煮：加入0.255±0.005mol/L煮沸的硫酸200ml和1滴正辛醇，使其在2min沸騰，且連續微沸30±1min。注意保持硫酸濃度不變，樣品不可損失

3、。3、過濾：用沸蒸餾水洗至不含酸。4、堿煮：將酸洗不溶物放入原容器中，加濃度準確為0.313±0.005mol/L且已沸的氫氧化鈉溶液200ml，同樣微沸30min。5、過濾：先用25ml0.255mol/L硫酸洗滌，再用沸蒸餾水洗至中性，用乙醇15ml洗殘渣。6、烘干灰化：取下坩堝，130烘干至恒重。550±25灼燒30min，冷卻稱重至恒重。7、計算結果：1976年Van Soet提出了中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸性洗滌木質素作為評價飼草纖維類物質的指標。NDF：木質素、纖維素、二氧化硅、半纖維素、細胞壁的成分如鑲嵌微量的蛋白質ADF：木質素、纖維素、二氧化硅ADF-

4、NDF=半纖維素ADF-ADL=纖維素該法可以分別測出纖維素，半纖維素、木質素和硅酸鹽，這量一大進步，但該法提取出的纖維物質中殘留含氮尚有2050%（有可能不消化），在NDF還有淀粉殘留，使準確性下降，該法不適于纖維量低的精料（蛋白質或淀粉多的試樣），因此也叫飼草分析方案。Fonnesback（馮列士貝克）于19701974年提出馮氏法。（1）先用蛋白酶將飼料進行消化（pH=3.5），然后用酸性洗滌劑煮沸1h，使原飼料中95%以上的蛋白質被消化。（2）將上步分離出的細胞壁用40%硫酸煮1h，使半纖維素水解，過濾殘渣為纖維素和木質素，酸不溶灰分，1步-2步=半纖維素含量。（3）將上步所得的殘渣用72%硫酸處理3h

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