1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上藥理學(xué)綜合設(shè)計性實驗實驗一 氯丙嗪的降溫作用（設(shè)計性實驗，4學(xué)時）實驗簡介：本實驗使學(xué)生掌握實驗設(shè)計的基礎(chǔ)理論和方法（包括動物選擇、實驗分組、對照原則、處理因素的標(biāo)準(zhǔn)化等多方面知識），并通過觀察氯丙嗪的降溫作用，掌握其降溫特點，聯(lián)系臨床應(yīng)用。實驗輔導(dǎo)：至少雙人輔導(dǎo)【實驗?zāi)康摹空莆諏嶒炘O(shè)計的基礎(chǔ)理論，通過觀察氯丙嗪的降溫作用，掌握其降溫特點，聯(lián)系臨床應(yīng)用。【實驗器材】小鼠、注射器、體溫計、冰箱、氯丙嗪等。【實驗過程】一、首先介紹實驗設(shè)計的基礎(chǔ)理論（一）實驗設(shè)計是科學(xué)研究計劃中關(guān)于研究方法與步驟的一項內(nèi)容，是實驗研究所涉及的各項基本問題的合理安排。嚴(yán)密合理的實驗設(shè)計是順利

2、進(jìn)行研究工作的保證，同時也能最大限度地減少實驗誤差以獲得精確可靠的實驗結(jié)論，甚至可以使研究工作事半功倍。藥理學(xué)實驗設(shè)計的三大要素，即處理因素、實驗對象與實驗效應(yīng)。1.處理因素(1)處理因素 實驗中根據(jù)研究目的確定的由實驗者人為施加給受試對象的因素稱為處理因素，如藥物、某種手術(shù)等。一次實驗涉及的因素不宜過多，否則會使分組增多，受試對象的例數(shù)增多，在實際工作中難以控制。但處理因素過少，又難以提高實驗的廣度和深度。(2)明確非處理因素：非處理因素雖然不是我們的研究因素，但其中有些因素可能會影響實驗結(jié)果，產(chǎn)生混雜效應(yīng)，所以這些非處理因素又稱混雜因素。設(shè)計時明確了這些非處理因素，才能設(shè)法消除它們的干擾作

3、用。(3)處理因素的標(biāo)準(zhǔn)化：處理因素在整個實驗過程中應(yīng)做到標(biāo)準(zhǔn)化，即保持不變，否則會影響實驗結(jié)果的評價。如實驗設(shè)計中處理因素是藥物時，則藥物的劑型、給藥途徑、質(zhì)量(成分、出廠批號等)必須保持不變。2.實驗對象實驗對象的選擇十分重要，對實驗結(jié)果有著極為重要的影響。藥理學(xué)實驗主要實驗對象包括整體動物(正常動物、麻醉動物和病理模型)、離體器官、組織及細(xì)胞等。3.實驗效應(yīng)實驗效應(yīng)是指受試對象在處理因素作用后呈現(xiàn)的反應(yīng)或受到的影響，其具體表現(xiàn)形式是指標(biāo)。這些指標(biāo)包括計數(shù)指標(biāo)(或定性指標(biāo))和計量指標(biāo)(或定量指標(biāo))等。指標(biāo)的選定需符合特異性、客觀性、重復(fù)性、靈敏性、精確性、可行性等原則。 (二)藥理學(xué)實驗設(shè)

4、計的基本原則為了提高研究效率，控制誤差和偏倚，藥理學(xué)實驗設(shè)計同其它科學(xué)研究一樣必須遵循三大基本原則，即對照、隨機(jī)和重復(fù)原則。1.對照原則對照是比較的前提。在生物學(xué)實驗中存在許多影響因素，為消除無關(guān)因素對實驗結(jié)果的影響，實驗中必須設(shè)立對照組。對照應(yīng)符合齊同可比的原則，除處理因素不同外，其他非處理因素盡量保持相同，從而使實驗誤差盡可能縮小。如實驗動物要求種屬、性別、年齡相同，體重相近；實驗的季節(jié)、時間和實驗室的溫度、濕度也要一致；操作的手法前后要相同等。根據(jù)實驗研究的目的和要求不同，可選用不同的對照形式，常用的對照形式有：空白對照(正常對照)、實驗對照(陰性對照)、標(biāo)準(zhǔn)對照(陽性對照)、自身對照、

5、相互對照(組間對照)等。2.隨機(jī)原則即所研究總體中的每一個研究對象都有同等的機(jī)會被分配到各組中去，隨機(jī)的目的是將樣本的生物差異平均分配到各組。實驗中凡可能影響結(jié)果的一切非研究因素都應(yīng)隨機(jī)化處理，使各組樣本的條件盡量一致，消除或減小組間人為的誤差，從而使處理因素產(chǎn)生的效應(yīng)更加客觀，實驗結(jié)果更為可靠。3.重復(fù)原則重復(fù)是指實驗中受試對象的例數(shù)或?qū)嶒灤螖?shù)要達(dá)到一定的數(shù)量，它包含有兩方面的意思：即重復(fù)性和重現(xiàn)性。若樣本量過少，可能把個別現(xiàn)象誤認(rèn)為普遍現(xiàn)象，把偶然或巧合事件當(dāng)作必然規(guī)律，其結(jié)論的可靠性差。如樣本過多，不僅增加工作難度，而且造成不必要的人力、財力和物力的浪費(fèi)。所以，在進(jìn)行實驗設(shè)計時要對樣本大

6、小作出科學(xué)的估計，以滿足統(tǒng)計處理的要求二、氯丙嗪的降溫作用設(shè)計部分：每臺面4只小鼠，體溫計1只，A、B兩種藥水（分別為氯丙嗪和生理鹽水）由同學(xué)們自己設(shè)計實驗分組、實驗步驟，通過實驗結(jié)果來判斷A、B藥水各對應(yīng)的藥品并總結(jié)實驗所用原理，并掌握氯丙嗪的降溫特點。三、臨床護(hù)理聯(lián)系：氯丙嗪與阿司匹林在解熱方面的異同，聯(lián)系兩藥在臨床上的不同應(yīng)用。【實驗報告要點】編號體重給藥前肛溫藥物劑量低溫30min給藥后肛溫1234實驗二 利尿藥的利尿作用（綜合性實驗，4學(xué)時）實驗簡介：本實驗綜合了藥理學(xué)、外科學(xué)（固定、備皮、消毒、手術(shù)等）、護(hù)理學(xué)（靜脈注射法）及臨床病例分析等多學(xué)科多方面的知識實驗輔導(dǎo)：至少雙人輔導(dǎo)【

7、實驗?zāi)康摹砍醪秸莆胀饪剖中g(shù)和外科結(jié)的操作，觀察呋喃苯胺酸的利尿作用，并通過病例分析，聯(lián)系其臨床應(yīng)用。【實驗器材】白兔、注射器、導(dǎo)尿管、解剖臺、剪刀、呋喃苯胺酸【實驗方法】1 外科基本操作：兔背位固定，耳靜脈麻醉后，備皮，局部消毒后，剪開腹部皮膚和肌肉，找到膀胱，將膀胱剪一小口，插入導(dǎo)尿管，用線將膀胱與導(dǎo)尿管結(jié)扎在一起（外科結(jié)結(jié)扎），將原有尿液棄去后，收集尿液10min，記錄體積。2 經(jīng)兔耳靜脈注射呋喃苯胺酸1ml，連續(xù)收集尿液3次，每次10min，記錄體積，分析結(jié)果。觀察呋喃苯胺酸的利尿效果。3病例分析：a、急性水腫患者的搶救及護(hù)理。 b、高血壓患者或慢性心功能不全患者的搶救、治療與護(hù)理。 C

8、、急性藥物中毒患者的搶救及護(hù)理。【實驗報告要點】給藥前尿液體積給藥后尿液體積10min10min10min10min實驗三 磺胺嘧啶半衰期的測定（綜合性實驗，4學(xué)時）【實驗簡介】本實驗綜合了基礎(chǔ)藥理學(xué)、臨床藥理學(xué)、計算機(jī)、分析化學(xué)、護(hù)理學(xué)等多方面的知識，為學(xué)生今后參與臨床藥物監(jiān)測（TDM）打下基礎(chǔ)。【實驗輔導(dǎo)】至少雙人輔導(dǎo)【實驗?zāi)康摹客ㄟ^磺胺嘧啶鈉(SD-Na)血濃測定實驗，掌握臨床藥理藥物動力學(xué)方面的一些基本操作方法，了解藥物時量關(guān)系曲線的變化及藥品說明書中涉及的一些主要參數(shù)，并為臨床藥物監(jiān)測（TDM）打下基礎(chǔ)。【實驗器材】白兔、注射器、試管、移液管、721分光光度計、肝素、0.5%亞硝酸鈉

9、、20三氯醋酸、0.5%麝香草酚【實驗原理】磺胺嘧啶鈉在酸性環(huán)境下其苯環(huán)上的氨基(NH2)離子化生成銨類化合物(NH3+)，與亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽，該化合物在525 nm波長下比色，其光密度與藥物濃度成正比。 【實驗方法】1、取兔1只，靜脈注射1000 U/ml肝素1 ml/kg，并取空白血0.5 ml。對側(cè)耳緣靜脈注射20SD-Na 2 ml/kg，并準(zhǔn)確計時。分別于給藥后5、10、15、20、30、60和90 min自耳緣靜脈(注射肝素側(cè))取血0.5 ml。耳緣靜脈注射1000 U/ml肝素1 ml/kg，并取空白血0.5 ml。對側(cè)耳靜脈注射20SD-Na 2 ml/kg，并

10、準(zhǔn)確計時。分別于給藥后5、10、15、20、30、60和90 min自耳緣靜脈(注射肝素側(cè))取血0.5 ml。將血0.2 ml與20三氯醋酸2 ml、蒸餾水3.8 ml混勻后，2500轉(zhuǎn)/分離心10 min。取上清3.0 ml，先加0.5%亞硝酸鈉1.0 ml，再加0.5%麝香草酚2.0 ml，混勻，于721分光光度計525 nm波長處測定光密度值(OD525)，將光密度值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算SD-Na血藥濃度(mg/ml)。各樣本OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程求得值為SD-Na含量(mg)，除以血體積0.1 ml，即得SD-Na血藥濃度(mg/ml)。2. 藥時曲線及藥代動力學(xué)參數(shù)的計算：(1)

11、 消除速率常數(shù)：K (min-1)= 2.303 B(2) 血漿半衰期：t1/2 (min) = 0.693/K(3) 初始濃度：C0 (mg/ml) = lg-1A(4) 表觀分布容積：Vd (ml/kg) = D0/C0 (D0為給藥劑量) 3.臨床護(hù)理聯(lián)系：了解決定藥物給藥間隔的主要因素，保證臨床用藥的安全有效。了解藥物時量關(guān)系曲線的變化及藥品說明書中涉及的一些主要參數(shù)。實驗四 普魯卡因的LD50測定（綜合性實驗，4學(xué)時）【實驗簡介】本實驗綜合了實驗設(shè)計、統(tǒng)計學(xué)、計算機(jī)應(yīng)用、藥理學(xué)及毒理學(xué)等多方面的知識，為以后學(xué)生論文寫作和設(shè)計打下基礎(chǔ)。【實驗輔導(dǎo)】至少雙人輔導(dǎo)【實驗?zāi)康摹?通過實驗，學(xué)

12、習(xí)測定藥物L(fēng)D50的方法、步驟和計算方法，了解急性毒性試驗的常規(guī)方法。【實驗器材】 小鼠、注射器、普魯卡因溶液等。【實驗方法】 1、預(yù)試驗 取小鼠810只，以2只為一組分成45組，選擇組距較大的一系列劑量，分別按組腹腔注射普魯卡因溶液，觀察出現(xiàn)的癥狀并記錄死亡數(shù)，找出引起0%死亡率和100死亡率劑量的所在范圍（至少應(yīng)找出引起20%80%死亡率）。（參考劑量：LD100為250mg/kg, LD 0為 164mg/kg）。 2、正式試驗 在預(yù)初驗所獲得的0%和100%致死量的范圍內(nèi)，選用幾個劑量（一般選45個劑量），每組10只小鼠，動物的體重和性別要均勻分配，完成動物分組和劑量計算后按腹腔注射給藥。3、LD50測定中應(yīng)觀察紀(jì)錄的項目 實驗要素：實驗題目，實驗日期，藥物的批號，動物品系，來源，性別，體重，給藥方式及劑量、給藥時間等。 給藥后各種反應(yīng)：潛伏期，中毒現(xiàn)象，開始出現(xiàn)死亡的時間，末只死亡的時間，死前的現(xiàn)象，各組死亡的只數(shù)等。 尸解及病理切片：對死亡的小鼠及時進(jìn)行尸解，觀察內(nèi)臟的變化（心、肝、脾、肺、腎），記錄病變情況。若肉眼可見變化時則需進(jìn)行病理檢查。觀察結(jié)束時對全部存活動物稱體重，尸解，同樣觀察內(nèi)臟病變與中毒死亡鼠比較。當(dāng)發(fā)現(xiàn)有病變時同樣進(jìn)行病理檢查，以比較中毒后病理變化及恢復(fù)情況。【實驗結(jié)果計算】實驗完畢后，清點各組死亡鼠數(shù)