1、文件編號(hào)制定日期文件版次正文頁(yè)數(shù)附件份數(shù)第一版5D-D-二聚體測(cè)定作業(yè)指導(dǎo)書(shū)|修訂記錄修訂日期版次頁(yè)次修訂內(nèi)容第一版全部發(fā)行章批準(zhǔn)審核編制制定部門(mén)檢驗(yàn)科文件持后部門(mén)：檢驗(yàn)科臨檢室D-二聚體測(cè)定（分析儀器法）實(shí)驗(yàn)原理：免疫比濁法當(dāng)混合標(biāo)本中含有 D-二聚體時(shí)，聚苯乙烯顆粒包被到單克隆抗體（DD5,與交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物（D-二聚體）的交聯(lián)區(qū)域結(jié)合。交聯(lián)區(qū)域呈立體結(jié)構(gòu)，有兩個(gè)單克隆抗體表位。總之，一個(gè)單克隆抗體就能觸發(fā)凝集反應(yīng)，隨后檢測(cè)濁度的增加。儀器在 575nm 處通過(guò)對(duì)濁度改變的監(jiān)測(cè)，將吸光度轉(zhuǎn)換成濃度值，由此獲得樣本中 D-二聚體的量。標(biāo)本采集早晨空腹采血（空腹 12 小時(shí)左右）,靜脈采血

2、。3.8%（w/v）枸椽酸鈉 0.2ml+靜脈血 1.8ml,混勻。標(biāo)本存放1 小時(shí)內(nèi)（3000r/minx15min）分離血漿，室溫放置不超過(guò) 2 小時(shí),28c 保存不超過(guò) 4 小時(shí)，長(zhǎng)時(shí)間保存需在冰凍條件下，（-70C 不超過(guò) 6 個(gè)月），只能凍融 1 次，在 37c 迅速解凍，以減低凝血因子的消耗，解凍后立即測(cè)試。標(biāo)本運(yùn)輸：低溫條件下運(yùn)輸。標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)：抗凝劑不符合，采血量不準(zhǔn)確，凝固，溶血，脂血標(biāo)本不能作測(cè)定。實(shí)驗(yàn)材料：德國(guó) DadeBehringMarburg 公司 D-DimerPLUS 乳膠試劑，用 4mlD-二聚體 PLUS 復(fù)溶液溶解一瓶 D 二聚體 PLUS試齊 1J,室

3、溫（15C25C）放置約 5 分鐘，并不時(shí)混勻。將試劑放于儀器相應(yīng)的試劑位置上。未開(kāi)封試劑 28c貯存到說(shuō)明書(shū)上有效期，復(fù)溶試劑 28c 保存不超過(guò) 2 天，室溫保存不超過(guò) 5 天。D-DimerPLUS 加速劑：用 5ml 蒸儲(chǔ)水溶解，室溫（15C25C）放置約 15 分鐘，并不時(shí)混勻。將試劑放于儀器相應(yīng)的試劑位置上。使用前，輕輕振蕩試劑。未開(kāi)封試劑 28c 貯存到說(shuō)明書(shū)上有效期，復(fù)溶試劑 28c 保存不超過(guò) 5 天。D-DimerPLUS 復(fù)溶液：液體。用于溶解 D-二聚體 PLUS 乳膠試劑。未開(kāi)封試劑 28c 貯存到說(shuō)明書(shū)上有效期，開(kāi)瓶后試劑 28c 保存不超過(guò) 12 周。DadeD-

4、二聚體質(zhì)控血漿 I/II.用蒸鐳水 1ml 溶解后放置 30 分鐘，才能使用或分裝。復(fù)溶后，室溫保存 2 小時(shí),28c4 小時(shí)。儀器設(shè)備：儀器名稱：SysmexCA-1500 全自動(dòng)血液凝固分析儀儀器廠家：日本 Sysmex 公司1 12 22.12.23 34 456.6.6.16.26.36.47.7.7.17.21.31.3儀器型號(hào)：SysmexCA-15001.41.4 儀器技術(shù)參數(shù)：1.4.1速度：最快檢測(cè)速度 180 測(cè)試/小時(shí)，組合檢測(cè)約 140 測(cè)試/小時(shí)1.4.2試齊 J 位：36 個(gè)，具冷藏功能。1.4.3樣本位:50 個(gè)，可自動(dòng)連續(xù)添加。1.51.5 儀器校準(zhǔn)程序：1.5

5、.1校準(zhǔn)頻率：當(dāng)方法改變，試劑廠家或試劑批號(hào)改變，儀器維修影響測(cè)定結(jié)果等情況時(shí)，必須進(jìn)行校準(zhǔn)。1.5.2校準(zhǔn)操作：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線分析（由儀器提供商指定工程師執(zhí)行）1.%2. .操作步驟：檢查前準(zhǔn)備：1 1清空廢液瓶，清空反應(yīng)杯拋棄槽。1 1添加足夠反應(yīng)杯（不能超過(guò)警告線）。1 1添加清潔液試劑，清洗用蒸儲(chǔ)水等。開(kāi)機(jī)先開(kāi)打印機(jī)再開(kāi)主機(jī)，開(kāi)機(jī)后儀器自檢，約 15 分鐘，屏幕上方“NotReady”變?yōu)椤癛eady”，表示儀器預(yù)熱完成，進(jìn)入系統(tǒng)準(zhǔn)備工作狀態(tài)，可進(jìn)行測(cè)定。輸入工作清單：從主菜單選 WorkList 卜出現(xiàn)第一架樣本工作清單輸入畫(huà)面，選|IDNoEntry 件俞入第一個(gè)樣本號(hào)-按相應(yīng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)

6、目名稱鍵 DD，并同時(shí)輸入此標(biāo)本白其他測(cè)試項(xiàng)目，若選“凝血四項(xiàng)（PT、APTTFbg、TT）”，可按 profile#1|組合選項(xiàng)選擇，選中項(xiàng)目相應(yīng)位置標(biāo)記為，選完項(xiàng)目后按|ENTE 利認(rèn)，要?jiǎng)h除某項(xiàng)目時(shí)只需按該項(xiàng)目（按鍵如 PT 事為空）即可，一用 TJ 鍵，同樣輸入其他標(biāo)本編號(hào)項(xiàng)目。（快速輸入可用 Repeat|鍵，輸入重復(fù)標(biāo)本數(shù)，復(fù)制同樣項(xiàng)目的輸入。放置樣本按 8.3 所設(shè)好的工作清單順序?qū)㈦x心分離好的樣本放置于樣本架上，并按順序把樣本架排列于Sampler 進(jìn)樣器右邊位置（最多同時(shí)放 5 架共 50 個(gè)樣本）按 StartStart|鍵開(kāi)始測(cè)定. .蓋好遮光蓋，確認(rèn)儀器為準(zhǔn)備狀態(tài)（顯示

7、屏正上方顯示“Ready）按Start|鍵，進(jìn)樣開(kāi)始，一測(cè)定進(jìn)行，儀器顯示為“Analying”（被選擇項(xiàng)目背景變?yōu)椋藭r(shí)可重復(fù) 8.3,8.4,繼續(xù)輸入其他架樣本工作清單,按Rigester,|繼續(xù)確認(rèn)測(cè)試任務(wù)，添加樣本架繼續(xù)測(cè)試，一測(cè)定完成，測(cè)定項(xiàng)目背景變?yōu)椤啊保蛴C(jī)打印出測(cè)定結(jié)果，所有測(cè)定清單完成，系統(tǒng)恢復(fù)“Ready”狀態(tài)。每日維護(hù)：（：（完成每日的測(cè)定后，關(guān)機(jī)前維護(hù)。）1 1沖冼針 RinseProbe1 1清空廢液瓶，和已使用過(guò)的反應(yīng)杯。1 1將試劑架連用試劑放入冰箱。關(guān)機(jī)：先關(guān)主機(jī)，再關(guān)打印機(jī)。2.%2.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析：儀器測(cè)定 D-Dimer 的線性范圍在 40-200

8、0ug/L,測(cè)定完成后儀器顯示 D-D 含量等參數(shù)。若不能對(duì)參數(shù)進(jìn)行正確計(jì)算，將出現(xiàn)下列信息：*.*出現(xiàn)錯(cuò)誤，不能得到分析數(shù)據(jù).一不能計(jì)算參數(shù)+.+數(shù)值超出線性范圍.儀器設(shè)定 D-D 參考范圍在 40-2000ug/L,如果得不到一個(gè)正常數(shù)值，在數(shù)據(jù)的左側(cè)將出現(xiàn)下列標(biāo)記：*出現(xiàn)錯(cuò)誤信息數(shù)據(jù)高于可報(bào)告的高限. .質(zhì)量控制：每批樣本同時(shí)測(cè)定兩個(gè)濃度水平（高值和正常值）的質(zhì)控品，以 2s 為警告限，3S 為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則詳見(jiàn)室內(nèi)質(zhì)控作業(yè)指導(dǎo)書(shū)。臨床意義：檢測(cè) D 二聚體交聯(lián)降解產(chǎn)物，即可反映纖溶作用。參考范圍：500ug/LD 二聚體濃度增加見(jiàn)于各種局灶性、彌漫性、年齡性

9、的血栓性疾病。因此，D 二聚體濃度基礎(chǔ)值超出健康人群的范圍，不能排除血栓性疾病。D 二聚體檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合其他實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果和臨床數(shù)據(jù)。D 二聚體升高提示出現(xiàn)凝塊，報(bào)告有深靜脈血栓，肺栓塞和彌漫性血管內(nèi)凝血。若 D 二聚體結(jié)果低于決定水平，可以用陰性預(yù)示值排除血栓可能。1212 變異的潛在來(lái)源1 抗凝劑：草酸鹽、EDTA、肝素不適用于 PT 檢查2 標(biāo)本采集處理不當(dāng)，如血與抗凝劑未充分混勻，出現(xiàn)凝塊，混勻時(shí)過(guò)分用力，使標(biāo)本溶血，造成結(jié)果變異。3 纖溶藥物的影響，如雙香豆素、鏈激酶、尿酶等。4 超劑量使用肝素使凝固時(shí)間延長(zhǎng)。5FDP 增加使凝固時(shí)間延長(zhǎng)。6 某些藥物，如口服避孕藥、雌激素、無(wú)門(mén)冬跣

10、胺酶、鈉絡(luò)酮等影響測(cè)試結(jié)果。. .操作注意事項(xiàng)：（：（干粉試劑及質(zhì)控血漿溶解）確認(rèn)溶劑類型，一般溶解液包括：蒸儲(chǔ)水、生理鹽水、緩沖液、廠家特定溶解液，必須按說(shuō)明書(shū)要求使用。溶解時(shí)，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)容器，保證干粉完全溶解，避免劇烈振蕩。復(fù)溶后，室溫放置 15-30 分鐘方可使用。. .儀器維護(hù)與保養(yǎng)日常維護(hù)（見(jiàn) 8.6）每周維護(hù)液路沖洗：儀器在Ready”狀態(tài)下，從主菜單按 SpecialMenuf 按 Maintainf 按 Rinse&Prepare 一按日 ecute|鍵運(yùn)行此程序一完成后按 Return1 返回。清潔儀器：定期用擦布擦干凈儀器內(nèi)外，包括試劑槽。需要時(shí)維護(hù)：調(diào)整壓力:儀器在Ready”狀態(tài)下， 以主菜單按 SpecialMenuf 按 Maintain 一按 PressureAdjust 鍵， 顯示壓力是否在其調(diào)整范圍內(nèi)？若不在，則打開(kāi)儀器右側(cè)相應(yīng)壓力調(diào)整旋鈕，旋動(dòng)調(diào)整好壓力，再鎖緊旋鈕。更換燈泡：關(guān)機(jī)一從儀器右側(cè)取下燈泡外蓋及內(nèi)蓋一換上好的燈泡一裝上內(nèi)外蓋一從主菜單按 SpecialMenu再按Maintainf 按 Caliblampf 確認(rèn)關(guān)上遮光蓋,按 Execute 運(yùn)行調(diào)整程序。更換保險(xiǎn)管：關(guān)機(jī)一從儀器