1、    紫外系數倍率法測定雷尼替丁血藥濃度        要目的:建立測定雷尼替丁血藥濃度的方法。方法:采用系數倍率法。結果:能不經分離直接消除血漿的背景干擾。平均回收率為99.08%，在0.110 g.ml-1濃度范圍內線性良好(r=0.999 9)。結論:方法簡便、快速、經濟、重復性好。適用于臨床、特別是基層醫療單位的血藥濃度檢測和藥動學研究。關鍵詞系數倍率法，雷尼替丁，血藥濃度 Study on the determination of ranitidine in pl

2、asma by K-ratio spectrophotometry methodXia Shuhui,Tan Hengshan,Tang Wei and Ge Weihong (General Hospital of Nanjing Command,PLA Nanjing 210002)ABSTRACTOBJECTIVE:A K-ratio spectrophotometry method was developed for the determination of Ranitidine in plasma.METHODS:The results showed that this method

3、 could eliminate the interference of plasma itself.RESULTS:The average recovery was 99.08%.The linear range was 0.110 g.ml-1 r=0.999 9,and detection limit was 0.1 g.ml-1.CONCLUSIONS:The method is simple,rapid and accurate.KEY WORDSK-ratio spectrophotometry method,ranitidine,plasma drug concentration

4、雷尼替丁為H2-受體阻斷劑，能抑制胃酸分泌，在防治胃及十二指腸潰瘍方面具有獨特的療效。隨著藥理研究的深入和臨床新用途的開發，其應用范圍不斷擴大，但不良反應的報道亦漸增多1.2，因此有必要建立雷尼替丁血藥濃度的檢測方法，為研究其體內過程及指導臨床合理用藥提供重要依據。目前國外研究比較深入，國內報道文獻較少，多為HPLC法35。本文探討用紫外系數倍率法測定雷尼替丁的血藥濃度，取得了較為滿意的結果。1儀器與試藥UV-260型紫外分光光度計(日本島津)；7541型紫外分光光度計(上海分析儀器廠)；鹽酸雷尼替丁對照品(杭州民生藥廠，純度為99.51%，批號950507)；所用試劑均為分析純。2方法與結果

5、2.1標準溶液的配制精密稱取鹽酸雷尼替丁對照品10 mg,置10 ml量瓶中，用甲醇溶解稀釋至刻度，即為1mg.ml-1標準儲備液。2.2血樣的預處理取空白人血漿1 ml于10 ml具塞離心管中，加5 mol.L-1氫氧化鈉0.1 ml，混勻后加二氯甲烷7 ml，搖勻，離心15 min(3 000 r.min-1)，取下層有機相6 ml于另一試管中，40 以下氮氣流下吹干，用2.5 ml甲醇溶解即為血樣提取液。置分光光度計中測定其吸收度。2.3紫外吸收光譜的測定分別將鹽酸雷尼替丁甲醇液、鹽酸雷尼替丁血樣提取液及空白血漿提取液置分光光度計中，在200400 nm范圍內，以甲醇為對照液進行光譜掃描

6、。結果見1。1雷尼替丁紫外吸收光譜雷尼替丁血樣提取液空白血漿提取液雷尼替丁甲醇液2.4最佳測定波長對選擇及K值的確定由1可見，雷尼替丁血藥濃度的最大吸收波長為324 nm，而空白血漿在此處也有吸收，對測定有影響，故采用系數倍率法以消除干擾。根據波長對選擇原則，為獲取較大的定量信息A和合適的k值，選定測定波長對為1=324 nm，2=358 nm。另取10名正常人血漿各1 ml，按血樣預處理項下操作，提取液在324 nm和358 nm波長處分別測定吸收度，以k=A324/A358計算，得k值平均數為1.636，RSD=1.97%。A=A324-1.636 A3582.5工作曲線的繪制取空白血漿1

7、 ml，分別加入不同量的鹽酸雷尼替丁標準溶液，使血漿終濃度為0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，5.0，10.0 g.ml-1，按血樣預處理項下操作，以甲醇為空白對照液，在324，358 nm波長處測定吸收值，由A對濃度C(g.ml-1)作回歸計算，得A=0.014 6 C-0.2×10-4；r=0.9999。血藥濃度在0.110 g.ml-1范圍內線性良好，最低檢測濃度為0.1 g.ml-1。2.6回收率和精密度試驗在空白血漿中加入一定量的標準液，使成高、中、低三種濃度，依法操作，將測得的吸收值代入上述回歸方程求出各自濃度，以實測值比理論值計算回收率。并分別于同日內及不同日間試

8、驗精密度，操作方法同前，結果見表1。表 1回收率和精密度試驗(n=5)濃度g.ml-1回收率%日內差日間差RSD/%RSD/%0.598.280.4977.10.4914.51.099.360.9553.70.9945.65.099.604.9940.74.9800.92.7穩定性試驗測定血樣提取液室溫中不同放置時間內吸收度的變化情況，結果表明穩定性良好，8 h內測定值基本不變。2.8干擾試驗考慮臨床有合并用藥的可能，故對10多種常用藥物進行干擾試驗，結果表明西咪替丁、丙谷胺、鹽酸地爾硫、維拉帕米、對乙酰氨基酚、非拉西丁、多慮平、布洛芬、氨茶堿、頭孢拉定等藥物對測定無干擾。2.9對比試驗為考查

9、本法的可信性，本文參照文獻方法6進行紫外系數倍率法(UV)與HPLC法的對比試驗，結果見表2。 表 2UV法與HPLC法的測定結果比較(±s，n=5)投入濃度g.ml-1測得濃度/g.ml-1UV法HPLC法0.10.12±0.060.13±0.040.50.49±0.030.51±0.041.01.01±0.070.96±0.042.01.95±0.092.07±0.035.05.00±0.135.03±0.03將兩組數據進行相關性比較，r=0.996，UV=0.00816+0.97

10、86 HPLC。結果表明兩組數據線性良好，測定值基本相同。2.10血藥濃度測定取健康家兔禁食12 h后口服鹽酸雷尼替丁膠囊1粒(150 mg)，分別于0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5，4，4.5，5，6，8，10 h抽取耳靜脈血2 ml，分離血漿，精取1 ml，依法操作，測定樣品吸收度，代入回歸方程得出血藥濃度，繪制C-T曲線，見2。從上可見口服雷尼替丁血藥濃度有明顯的雙峰現象，與文獻報道相符。利用本方法進行藥物動力學研究將另文報道。 2雷尼替丁血藥濃度-時間曲線3討論目前血藥濃度的測定普遍采用HPLC法。該法精確、靈敏、專屬性強，但儀器價格昂貴、樣品測定成本高。UV法雖然測定精密度

11、、靈敏度、專屬性方面不及HPLC法，但由于儀器較便宜、試劑價格低廉，若操作細致仍能達到測定要求，因而在基層醫院得到廣泛應用。本文建立了用UV系數倍率法測定雷尼替丁血藥濃度的方法，直接消除吸收干擾，省去了測定時需用空白血漿作對照的繁瑣，方法簡便、快速、經濟，對比試驗表明，其測定準確度同HPLC法。該法若推廣用于測定其它藥物，可能為臨床、特別是基層醫療單位進行血藥濃度檢測和藥動學研究提供一種簡便、快速的檢測手段。作者單位：夏曙輝談恒山(南京軍區南京總醫院南京210002)唐薇(昆明醫學院第一附屬醫院)葛衛紅(南京市鼓樓醫院)參考文獻1王國村.雷尼替丁的臨床進展.中國醫藥情報，1995，1(5)：3012曹國建，鄔紅萍，傅世源.雷尼替丁的不良反應.中國藥事，1994，8(3)：1813趙晶，朱無難，劉厚鈺.正常人中雷尼替丁藥代動力學的研究.中國臨床藥理學雜志，1986，2(2)：974Shim C,Hong J.Inter and intrasubject variations of Ranitidine pharmacokinetics after oral administration to male subjects