1、茶葉中茶多酚類物質(zhì)提取與含量測定系別：生物醫(yī)藥工程系班級：食品科學(xué)與工程一、目的要求1、了解茶葉中茶多酚及茶多酚的組成及性狀；2、掌握溶劑提取法提取茶多酚的原理及方法；3、掌握萃取法分離有機溶劑中的茶多酚的操作方法；二、茶多酚總述1、組成：茶多酚是茶葉中酚類及其衍生物的總稱，因此常稱為多酚類。 其主要成分是黃烷醇類、羥基-4- 黃烷醇類、花色甘類、黃酮醇類和黃酮類。這些化合物都具有2- 苯基苯并吡喃的基本結(jié)構(gòu)，故統(tǒng)稱為類黃酮物質(zhì)。茶葉中綠原酸、 雞鈉酸、咖啡酸等酚酸類化合物也是茶多酚的組分之一。在茶多酚各組分之一黃烷醇類為主，黃烷醇類優(yōu)異兒茶素類物質(zhì)為主。2、性狀：茶多酚是介于淡黃色至茶褐色之

2、間的無定型粉末，味澀，略有吸濕性，易溶于水，可溶于乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂，不溶于氯仿及苯等有機溶劑。茶多酚具有較好的耐酸性，在 pH<7時較穩(wěn)定，在 pH>7時則不穩(wěn)定且氧化變色加快，呈紅色。3. 茶多酚的提取方法茶多酚提取工藝效果較好的是有機溶劑萃取法、離子沉淀提取法、樹脂吸附分離法、 超臨界二氧化碳萃取法， 其次是超聲波浸提法、層析法、膜技術(shù)。4. 貯存方法：貯存于陰涼通風(fēng)干燥環(huán)境，并與有毒、有氣味的物品隔離，避免直接與三價鐵離子及堿性物質(zhì)接觸。三、實驗原理有機溶劑萃取法：有機溶劑萃取法是傳統(tǒng)的提取工藝。是利用茶葉中不同化合物在不同溶劑中的溶解度不同進(jìn)行提

3、取分離。在粗茶葉萃取溶液中，除含有茶多酚以外，還含有咖啡堿、酯質(zhì)、色素、植物多糖、有機酸、以及懸浮物，且茶多酚含量僅為25%40% ，所以大多數(shù)工藝用乙酸乙酯、 氯仿等有機溶劑反復(fù)萃取的方法進(jìn)一步除雜、純化、精制。茶水用氯仿萃取可得到水層和有機層，咖啡堿存在于有機層，而茶多酚則存在于水層中， 根據(jù)萃取及過濾原理， 將有機層和水層分別進(jìn)行濃縮、萃取，即可得到相應(yīng)粗產(chǎn)物。溶劑萃取法一般的工藝路線圖所示濾渣溶劑層茶葉乙醇氯仿水層濾液乙酸乙酯水層浸提 3次有機相乙酸乙酯抽濾粗茶多酚濃縮液溶劑萃取法一般的工藝路線本法的優(yōu)點是：穩(wěn)定、可靠；缺點是：有效成分的含量和提取率較低，通過以上工藝獲得的茶多酚含量通

4、常僅能達(dá)到50%65%。四、儀器和藥品儀器：天平；分析天平；鐵架臺；抽濾裝置；超級恒溫水浴槽；長頸漏斗一個；濾紙若干張；分液漏斗一個； 100 毫升的燒杯（三個）；玻璃棒一個；藥品：1. 乙醇水溶液（ 50）；2. 干茶葉原料；3. 氯仿（分析純）；4. Na2So4 溶液餾水，五、實驗步驟1、溫度設(shè)定 :打開超級恒溫水浴電源開關(guān)，使溫度達(dá)到902、稱量：稱取 30 克干茶葉，放在100 毫升小燒杯中。3、溶解：用量筒量取40 毫升 50乙醇水溶液，倒入小燒杯中，用玻璃棒輕輕攪拌，使干茶葉完全浸潤在乙醇溶液中。4、加熱：將干茶葉和乙醇水溶液的混合液置于超級恒溫水浴槽中，加熱20分鐘。5、過濾：

5、將加熱完畢的混合液取出，冷卻到室溫；用長頸漏斗對混合液進(jìn)行過濾，濾除茶葉殘渣。再對殘渣進(jìn)行乙醇萃取 .6、分離萃取：1) 對分液漏斗進(jìn)行試漏，調(diào)整好鐵架臺高度；2) 用量筒量取 20 毫升氯仿 ，置于 100 毫升小燒杯中； 將茶葉濾液倒入分液漏斗中，再將氯仿倒入其中，再倒入少量Na2So4 溶液，輕輕搖勻，使之混合充分，靜置，分層，上層應(yīng)為茶多酚水溶液，呈茶色，下層為氯仿乙醇混合液，為無色。3) 將下層溶液小心放至小燒杯中， 上層溶液從分液漏斗上口倒置 100毫升小燒杯中；7、抽濾濃縮：1) 安裝好減壓抽濾裝置；2) 將布氏漏斗里的濾紙用少量茶多酚水溶液潤濕， 開啟抽氣閥， 一邊緩慢倒入液體

6、，一邊抽濾。3）抽濾完畢，關(guān)閉抽氣閥，干燥得到咖啡堿。8、萃取：1) 水層用乙酸乙酯萃取得有機層。2) 重復(fù)上步 抽濾濃縮步驟，得茶多酚。9、稱量：1) 將布氏漏斗內(nèi)的濾餅用玻璃棒小心刮出，置于潔凈濾紙上；2) 另取一張濾紙將粉末里的水分壓干；3) 用分析天平稱量出茶多酚注：向萃取體系中加入Na2So4 溶液，可增加有機相和水相的極性差別，縮短茶多酚的提取時間。六、數(shù)據(jù)處理以計算茶多酚的含量為例：茶葉中茶多酚的百分含量計算公式為W=(Mc/M)*100式中：Mc 是最后提取出的茶多酚的質(zhì)量，單位為g;M 為最初稱取的茶葉原料的質(zhì)量，單位為g。七、實驗分析及注意事項：1 、萃取時要嚴(yán)格控制下層液的流速，太快有可能使上層液損失，使測得的百分含量偏低；2、最后濃縮抽濾時，抽氣閥不