1、實驗六酵母菌死活細胞鑒別實驗六實驗六 酵母菌細胞酵母菌細胞的形態觀察、死活細胞的形態觀察、死活細胞的鑒別的鑒別實驗六酵母菌死活細胞鑒別一、目的和要求一、目的和要求 n1 1觀察酵母菌的出芽繁殖方式，學習區觀察酵母菌的出芽繁殖方式，學習區分酵母菌死活細胞的實驗方法。分酵母菌死活細胞的實驗方法。n2 2掌握酵母菌的一般形態特征及其與細掌握酵母菌的一般形態特征及其與細菌的區別。菌的區別。 實驗六酵母菌死活細胞鑒別二、基本原理二、基本原理 n1 1形態觀察：形態觀察：酵母菌是不運動的單細胞真酵母菌是不運動的單細胞真核微生物，通常比常見細胞大幾倍甚至十核微生物，通常比常見細胞大幾倍甚至十幾倍。大多數酵母

2、菌以出芽方式進行無性幾倍。大多數酵母菌以出芽方式進行無性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通過接繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通過接合產生子囊孢子。合產生子囊孢子。實驗六酵母菌死活細胞鑒別n2 2死活鑒定：死活鑒定：美藍是一種無毒性的染料，美藍是一種無毒性的染料，它的氧化型呈藍色，還原型呈無色。用美它的氧化型呈藍色，還原型呈無色。用美藍對酵母的活細胞進行染色時，藍對酵母的活細胞進行染色時，由于細胞由于細胞的新陳代謝作用，細胞內具有較強的還原的新陳代謝作用，細胞內具有較強的還原能力，能使美藍由藍色的氧化型變為無色能力，能使美藍由藍色的氧化型變為無色的還原型。的還原型。因此，具有還原能力的酵母活因此，

3、具有還原能力的酵母活細胞是無色的，而死細胞或代謝作用微弱細胞是無色的，而死細胞或代謝作用微弱的衰老細胞則成藍色或淡藍色。的衰老細胞則成藍色或淡藍色。實驗六酵母菌死活細胞鑒別啤酒酵母實驗六酵母菌死活細胞鑒別酵母出芽酵母出芽實驗六酵母菌死活細胞鑒別實驗六酵母菌死活細胞鑒別實驗六酵母菌死活細胞鑒別酵母菌出芽繁殖及芽體實驗六酵母菌死活細胞鑒別三、器材三、器材 n1 1、染液：、染液：呂氏堿性美藍染液呂氏堿性美藍染液n2 2、菌種：、菌種：釀酒酵母的斜面培養物釀酒酵母的斜面培養物n3 3、儀器和其他用具：、儀器和其他用具： 顯微鏡、載玻片、顯微鏡、載玻片、蓋玻片等蓋玻片等實驗六酵母菌死活細胞鑒別四、操作

4、步驟四、操作步驟 n1 1、美藍浸片的觀察：、美藍浸片的觀察： 1 1）在載玻片中央加一滴）在載玻片中央加一滴0.1%0.1%呂氏堿性美藍呂氏堿性美藍染色液，然后按無菌操作用接種環挑取少染色液，然后按無菌操作用接種環挑取少量少量酵母菌苔放在染液中，混合均勻。量少量酵母菌苔放在染液中，混合均勻。染液不宜過多或過少，否則在蓋上蓋玻片染液不宜過多或過少，否則在蓋上蓋玻片時菌液會溢出或出現大量氣泡而影響觀察。時菌液會溢出或出現大量氣泡而影響觀察。 2 2）用鑷子取一塊蓋玻片，先將一邊與菌液）用鑷子取一塊蓋玻片，先將一邊與菌液接觸，然后慢慢將蓋玻片放下使其蓋在菌接觸，然后慢慢將蓋玻片放下使其蓋在菌液上。

5、液上。蓋玻片不宜平放著放下，以免產生蓋玻片不宜平放著放下，以免產生氣泡影響觀察。氣泡影響觀察。實驗六酵母菌死活細胞鑒別3 3）將制片放置約）將制片放置約3min3min后鏡檢，先用低倍鏡然后鏡檢，先用低倍鏡然后用高倍鏡觀察酵母的形態和出芽情況，并后用高倍鏡觀察酵母的形態和出芽情況，并據顏色來區別死活細胞。據顏色來區別死活細胞。4 4）染色約）染色約0.5h0.5h后再次進行觀察，注意死活細后再次進行觀察，注意死活細胞數量是否增加。胞數量是否增加。5 5）用）用0.05%0.05%呂氏堿性美藍染液重復上述操作。呂氏堿性美藍染液重復上述操作。實驗六酵母菌死活細胞鑒別n2 2、水、水- -碘液浸片的觀察碘液浸片的觀察 在載玻片中央加一小滴革蘭氏染色用碘液，在載玻片中央加一小滴革蘭氏染色用碘液，然后在其上加三滴水，取少量酵母菌苔放然后在其上加三滴水，取少量酵母菌苔放在水在水- -碘液中混勻，蓋上蓋玻片鏡檢。碘液中混勻，蓋上蓋玻片鏡檢。實驗六酵母菌死活細胞鑒別五、實驗報告五、實驗報告 n1 1、繪圖說明所觀察的酵母菌的形態特征。、繪圖說明所觀察的酵母菌的形態特征。n 實驗六酵母菌死活細胞鑒別酵母死活細胞的對比酵母死活細胞的對比實驗六酵母菌死活細胞鑒別六、思考題n（1 1）呂氏堿性美藍染液濃度和作用時間的）呂氏堿性美藍染液濃度和作用時間的不同，對酵母菌死細胞數量