1、生物安全試題一、填空題(每空0.5分，共40分)1、我國一直以來高度重視實驗室生物安全工作，國家陸續頒布了一系列法律、法規和標準，包括笑。各種菌(毒)株所需實驗室的生物安全級別參見衛生部2、盡管生物安全實驗室內存在各種潛在感染的風險，但是隨著人們認識的深入及實驗室設備設施條件的改善，防范感染事件發生的能力不斷得到提高。通過開展確定 I1 制定和;I等措施，將會減少或避免實驗室感染事件的發生。3、二級實驗室適用于進行我國危害程度分類為 ?口的病原微生物檢測實驗活動。4、二級實驗室在一級實驗室的基礎上，增加了 等安全設備。y ! J i I I5、依據現行國家標準，三級實驗室由 :?口 三部分組成

2、。整個平面布局為二二VV6、液體進行壓力蒸汽滅菌時，液體體積不得超過 應該、保證蒸汽能夠進入。J 7、BSL-2實驗室操作規范：人員進入二級實驗室，需經過一并經同意,方可進入；(2)進入實驗室后，應做好、一等記錄:(3)實驗室工作人員根據工作內容，在實驗室生物風險評估的基礎上，選擇并穿戴好一 通常情況下，應穿上鞋套，穿防護服或反穿式隔離服，戴好帽子、口罩、手套，必要時根據操作內容可戴上防護眼鏡；戴帽子時，不應 (4)二級實驗室內，各種可能產生的操作.應在生物安全柜內或其他物理保護裝置中進行；將實驗所需物品放入生物安全柜，按照實驗步驟進行操作；如果是兩個人進行操作，相互應配合，但不能影響(6)實

3、驗產生的廢物，應該放在生物安全柜內的廢物盒里；實驗結束后，首先撤出主要實驗材料，隨后再撤出剩余實驗用品，實驗廢物應放在廢物處理桶中并在二級實驗室內進行滅菌；(8)撤離結束后，對安全柜內所用的物品進行消毒處理，實驗廢物放在廢物桶中，還要對生物安全柜進行消毒處理；(9)實驗產生的廢物放在中進行滅菌；(10)整個實驗結束后，在實驗室出口處脫去個人防護裝備，脫去手套，脫去防護服，脫下防護眼鏡、 口罩，摘掉帽子，最后脫去鞋套；并仔細 ;(11)在離開二級實驗室之前，需要做好 8、感染性物質的公路運輸，需要申請單位 直接送往目的地。注意應防止運輸過程中感染性物質泄漏，以便緊急處理。9、消毒和滅菌方法分為物

4、理和化學兩種方法。常用的物理滅菌方法有、等；化學法主要以化學消毒劑為主， 根據消毒劑對微生物的殺滅種類和效果， 可分為高效、中效和低效消毒劑，高效消毒劑包括含氯消毒劑(如次氯酸鈉)、?2戊二醛，中效消毒劑包括?,I I I低效消毒劑有氯己定。使用消毒劑時，注意 注意配制的期限；必要時需要定期更換、 交替使用，避免微生物出現10、國家根據病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，將病原微生物分為四類：第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發現或者已經宣布消滅的微生物。第二類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物 比較容易直接或者間接在人與 人、動物與

5、人、動物與動物間傳播的微生物。I I第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環境不構成一一 傳播風險=、實驗室感染后很少引起并且具備有效治療和預防措施的微生物。第四類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。 病原微生物統稱為高致病性病原微生物。11、請填寫以下微生物的危害程度分類及各種實驗活動所需生物安全實驗室級別種類中文名危害程度分類實驗活動所需生物安全實驗室級別病毒培養或大量活菌操作未經培養的感染材 料的操作或樣本檢 測滅活材料 的操作無感染性材料的操作種類中文名危害程度分 類實驗活動所需生物安全實驗室級別病毒培養或大量活菌操作未經培

6、養的感染材 料的操作或樣本檢 測滅活材料 的操作無感染性 材料的操 作病毒埃博拉病毒第一類BSL-4BSL-3BSL-2BSL-1SARS冠狀病毒BSL-3BSL-3BSL-2艾滋病毒（I型和II型）口蹄疫病毒高致病性禽流感病毒新城疫病毒人乳頭瘤病毒BSL-2- -; 1 11 1j 1:、一1i甲型肝炎病毒乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒丁型肝炎病毒戊型肝炎病毒細菌結核分枝桿菌BSL-31 1 .鮑曼不動桿菌1- ,1 1 %晨i 11 / 1 j 1.1| 11BSL-2嗜水氣單胞菌空腸彎曲菌肺炎衣原體流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌嗜肺軍團菌單核細胞增生李斯特菌鳥分枝桿菌龜分枝桿菌肺炎支原體銅綠假單胞菌

7、鼠傷寒沙門菌金黃色葡萄球菌肺炎鏈球菌創傷弧菌小腸結腸炎耶爾森菌12、試劑技術部樣品制備實驗室最高只能進行可能含有一微生物的 （此操作需要BSL-3實驗室的SARS冠狀病毒除外）。13、出現下列情況之一，實驗人員進入實驗室工作區需經項目負責人、部門負責人審批：（1） （2）.一- 正在使用免疫抑制劑或免疫耐受；妊娠期。14、外部門或外單位人員進入試劑技術部樣品制備實驗室學習、工作等，該人員需接受相關的 應經過（附件1）（其中規定申請進入的人員須 已閱讀試劑技術部樣品制備實驗室 和試劑技術部樣品制備實驗室,并遵守試劑技術部樣品制備實驗室管理制度。15、實驗人員在第一更衣室進行個人防護，進入實驗室前

8、和實驗操作完畢后需填寫? ?3、二級實驗室適用于進行我國危害程度分類為第三類和少量第二類的病原微生物檢測實驗活動。4、二級實驗室在一級實驗室的基礎上，增加了 生物安全柜、壓力蒸汽滅菌器等安全設備。5、依據現行國家標準，三級實驗室由 清潔區、半污染區和污染區三部分組成。整個平面布局為 遁 潔區一緩沖區I-半污染區-緩沖區II-污染區。6、液體進行壓力蒸汽滅菌時，液體體積不得超過 容器體積的2/3。應該把蓋子旋松，保證蒸汽能 夠進入。7、BSL-2實驗室操作規范：(1)人員進入二級實驗室，需經過 相關生物安全培訓并經實驗室負責人 同意,方可進入；(2)進入實驗室后，應做好 進入時間、姓名等記錄;(

9、3)實驗室工作人員根據工作內容，在實驗室生物風險評估的基礎上，選擇并穿戴好個人防護裝備;通常情況下，應穿上鞋套，穿防護服或反穿式隔離服，戴好帽子、口罩、手套，必要時根據操作內 容可戴上防護眼鏡；戴帽子時，不應 把頭發漏在外面；二級實驗室內，各種可能產生 氣溶膠的操作.應在生物安全柜內或其他物理保護裝置中進行； 將實驗所需物品放入生物安全柜，按照實驗步驟進行操作；如果是兩個人進行操作，相互應配合，但不能影響 生物安全柜內氣流： , I(6)實驗產生的廢物，應該放在生物安全柜內的廢物盒里；實驗結束后，首先撤出主要實驗材料，隨后再撤出剩余實驗用品，實驗廢物應放在廢物處理桶. I中并在二級實驗室內進行

10、滅菌；(8)撤離結束后，對安全柜內所用的物品進行消毒處理，實驗廢物放在廢物桶中，還要對生物安全 柜進行消毒處理；(9)實驗產生的廢物放在 滅菌器中進行滅菌:(10)整個實驗結束后，在實驗室出口處脫去個人防護裝備，脫去手套，脫去防護服，脫下防護眼鏡、 口罩，摘掉帽子，最后脫去鞋套；并仔細 清洗手部；(11)在離開二級實驗室之前，需要做好 相關實驗室使用的記錄。8、感染性物質的公路運輸，需要申請單位 兩人專人專車 直接送往目的地。注意應 帶上個人防護用 山，防止運輸過程中感染性物質泄漏，以便緊急處理。9、消毒和滅菌方法分為物理和化學兩種方法。 常用的物理滅菌方法有 紫外線消毒、壓力蒸汽滅菌、 高效

11、過濾器(HEPA)過濾除菌等；化學法主要以化學消毒劑為主，根據消毒劑對微生物的殺滅種 類和效果，可分為高效、中效和低效消毒劑，高效消毒劑包括含氯消毒劑(如次氯酸鈉)、甲醛、過氧乙酸、戊二醛,中效消毒劑包括 乙醛、碘氮，低效消毒劑有氯己定。使用消毒劑時，注意 在有效期內使用，注意配制的期限；必要時需要定期更換、交替使用，避免微生物出現抗藥性。10、國家根據病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，將病原微生物分為四類：第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物， 以及我國尚未發現或者已經宣布消滅的微生物。第二類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直

12、接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環境不構成工 重危害,傳播風險有限,實驗室感染后很少引起 嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。第四類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。第一類、第二類病原微生物統稱為高致病性病原微生物。. L . J11、請填寫以下微生物的危害程度分類及各種實驗活動所需生物安全實驗室級別種類中文名危害程度分 類實驗活動所需生物安全實驗室級別病毒培養或大量活菌操作J j 3 / ,. 1未經培養的感染材 料的操作或樣本檢 測滅活材料 的操作無感染性

13、材料的操作病母埃博拉病毒第一類BSL-4BSL-3BSL-2BSL-1SARS冠狀病毒1J1 1 1第二類1BSL-3BSL-3BSL-2BSL-1艾滋病毒（I型和II型）BSL-2BSL-1口蹄疫病毒高致病性禽流感病毒新城疫病毒人乳頭瘤病毒第三類BSL-2BSL-2BSL-1BSL-1甲型肝炎病毒乙型肝炎病毒,1丙型肝炎病毒丁型肝炎病毒戊型肝炎病毒細菌結核分枝桿菌第二類BSL-3BSL-2BSL-1鮑曼不動桿菌第三類BSL-2BSL-2BSL-1嗜水氣單胞菌空腸彎曲菌肺炎衣原體流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌嗜肺軍團菌單核細胞增生李斯特菌鳥分枝桿菌龜分枝桿菌肺炎支原體銅綠假單胞菌鼠傷寒沙門菌金黃色葡

14、萄球菌肺炎鏈球菌創傷弧菌小腸結腸炎耶爾森菌12、試劑技術部樣品制備實驗室最高只能進行可能含有我國微生物危害程度第二類的微生物的未 經培養的樣本的檢測(此操彳需要BSL-3實驗室的SARS冠狀病毒除外)。13、出現下列情況之一，實驗人員進入實驗室工作區需經項目負責人、部門負責人審批：(1)身體出現開放性損傷；(2)患發熱性疾病；(3)呼吸道感染或其它導致抵抗力下降的情況 ；(4)正在使用免 疫抑制劑或免疫耐受；(5)妊娠期。14、外部門或外單位人員進入試劑技術部樣品制備實驗室學習、工作等，該人員需接受相關的 生物安全培訓，應經過審批流程(附件1)(其中規定申請進入的人員須已閱讀試劑技術部樣品制備

15、實 驗室實驗人員個人防護和試劑技術部樣品制備實驗室操作規范人并遵守試劑技術部樣品制備實驗室管理制度。 15、實驗人員在第一更衣室進行個人防護，進入實驗室前和實驗操作完畢后需填寫樣品制備實驗室出入記錄(附件2)(具體包括：日期、姓名、進入時間、離開時間及工作內容),其中“工 作內容” 一項需詳細記錄。二、問答題(共60分)1、二級實驗室的基本結構？ ( 4分，第一句0.5分，后面每條0.5分)答：二級實驗室除滿足一級實驗室的設計要求以外，增加以下內容：(1)實驗室的門上標有國際通用的生物危害警告標志；(2)實驗室的門帶鎖，能自動關閉，有可視窗；(3)一般不需要特殊的通風設備，但可以設置有通風系統

16、；若無，窗戶應該能夠打開，并安裝有紗窗；(4)實驗室內配備有II級生物安全柜，安裝在離門和空調送風口較遠的地方；(5)實驗室配備有壓力蒸汽滅菌器；(6)實驗室有可靠的電力供應和應急照明，可設有紫外燈；(7)在靠近實驗室出口的地方設有洗手池。2、BSL-1、2、3三類實驗室的區別？ ( 3分，每條1分)答：由于三類實驗室操作的微生物危害程度不同，因此三類實驗室在布局和防護屏障、設施、設備 要求上不同。一級實驗室不需要特殊的防護屏障；二級實驗室在一級實驗室的基礎上增加了生物安全柜和壓力蒸汽滅菌器兩個重要的設備；三級實驗室自成隔離區或獨立建筑物，有明確的功能分區，具有獨立的送、排風系統，氣流由清潔區

17、向污染區定向流動等。3、生物安全柜的作用和防護原理？ ( 5分)答：作用：(2分)生物安全柜是一個負壓過濾排風柜，能迅速把產生的氣溶膠過濾除掉，因此在其中操作原代培養物、 菌株、毒株、診斷性標本等感染性物質時，可以保護操作者本人、實驗室環境以及實驗材料，避免 暴露于操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和濺出物。I /2防護原理：(3分)(1)從安全柜排出的空氣經過 HEPA空氣過濾器過濾釋放，保護外部環境；(2)在安全柜內形成的負壓和氣幕，可以防止氣溶膠外泄，保護操作者； I 1 進入安全柜工作區的空氣經過 HEPA空氣過濾器過濾，在安全柜內形成百級潔凈度的環境，保 護操作對象。4、實驗室意外事件

18、處理原則？實驗室地面被污染如何處理？ (6分，原則2分，處理4分)答：實驗室如果發生意外事故，原則是： 立即停止工作；在加強個人防護條件下進行消毒處理，并對當 事人進行醫學觀察；按照程序向負責人報告發生的事件。如果感染性材料灑溢到實驗室地面上， 應立即用布或紙巾覆蓋所有可能污染處， 然后在上面倒上消毒劑，并立即覆蓋周圍區域，同時，及時脫掉防護裝備、離開被污染的實驗室，并在實驗室門口注一 I明警告標志。消毒有效時間后，防護人員換上新的防護裝備進入實驗室， 將消毒后的感染性材料放 在廢物桶中，必要時需要對地面進行多次消毒。5、生物安全柜的操作流程和注意事項？ (10分，每少1條扣1分)(1)使用前

19、，檢查生物安全柜的正常指標，確保風速、氣流量和負壓等指標在正常范圍內；(2)工作時，一定要保證生物安全柜玻璃窗的位置移到安全范圍內；每次使用前，都應該準備好本次實驗工作所需的物品，操作前先將物品放入；生物安全柜內只 擺放本次工作所需要的物品，盡量少放儀器和物品；(4)所有物品應盡量放在工作區兩側或后部靠近工作臺后緣的位置，并給進風隔柵留下距離；物品擺放時根據操作習慣，盡量把物品按照潔凈區、操作區和污染區做好分區擺放； 注意物品應分類擺放，不要遮蓋安全柜進風隔柵，以免干擾氣流的正常流動； (5)工作記錄紙不應放在生物安全柜內；(6)生物安全柜內不應使用明火裝置；使用生物安全柜前應先打開風機 5-

20、10分鐘，待安全柜內空氣得到凈化并且氣流穩定后，再開始 操作；(8)工作時調整好坐椅的高度，以確保操作者的臉部在工作窗口之上；(9)將雙臂伸入安全柜內短暫停止，待安全柜內氣流穩定后再開始操作；在柜內的所有工作都要在工作臺中央或后部進行，操作者在移動雙臂進出安全柜時需要小心維持前7I 面窗口處氣流的完整性，雙臂應該緩慢地進出安全柜；操作時，手或物品不可擋住進風隔柵；(10)操作時產生的廢棄物應該放置于生物安全柜內的廢物處理容器中；(11)操作結束后，應對在生物安全柜內使用過的物品表面進行消毒，然后對生物安全柜內表面進行 消毒；繼續開啟10-20分鐘后，關閉生物安全柜；帶有紫外燈的安全柜，可用紫外

21、燈消毒半個小時后關閉 I I I生物安全柜。6、進入試劑技術部樣品制備實驗室，穿戴和解除個人防護裝備的流程分別是怎樣的？ (8分=3分+5分，每條0.5分)穿戴個人防護裝備的流程：在第一更衣室內：(1)換上工作用鞋，套上一次性普通鞋套；一- (2)穿上第一層連體隔離衣，佩戴 N95 口罩；一- (3)穿上第二層連體隔離衣，佩戴乳膠手套(雙層)，注意用醫用膠帶固定手套；一 一(4)套上高幫鞋套(可在外面套上一次性普通鞋套防止踩臟)；一- (5)由同伴或對鏡檢查上述衣物 是否穿戴整齊，佩戴合格；一- (6)佩戴護目鏡。解除個人防護裝備的流程：在實驗室內：(1)手部用醫用酒精噴灑；一-在半污染區內：

22、(2)摘掉護目鏡放入泡沫箱中；一- (3)脫掉高幫鞋套、脫掉外面第一層連體隔離衣 放入臟衣物收集桶；一- (4)摘掉外面第一層乳膠手套放入垃圾桶；一- (5)手部用醫用酒精噴灑； 在第二更衣室內：(6)摘掉N95 口罩，放入垃圾桶；一- (7)脫掉第二層連體隔離衣放入臟衣物收集 桶；一- (8)脫掉一次性普通鞋套、摘掉第二層乳膠手套放入垃圾桶；一- (9)用洗手液徹底清洗雙手；一-在第一更衣室內：（10）換鞋。7、皮膚被刺傷如何處理？ （ 5分）若手套被刺破、皮膚被刮傷應被視為極大危險，首先立即停止工作，在安全柜內脫掉手套并立即用 適當的消毒劑進行消毒，然后在出口處的洗手池處進行處理，用清水和

23、肥皂水清洗雙手和受傷部位， 并同時盡可能擠出損傷處的血液；取出急救箱，對污染的皮膚和傷口用碘酒或醫用酒精擦洗多次， 對傷口進行適當的包扎，并及時去醫院就醫進行醫學觀察。8、實驗完畢后的清場和操作？ （ 4分）實驗完畢后，實驗區域清場（廢液缸放置于 2號實驗室水池中，實驗設備關閉、物品擺放整齊）； 關閉2號實驗室的日關燈及實驗室內的送、排風系統。7*I 1 按更衣流程脫去實驗服及防護用品；開啟實驗室半污染區的紫外燈，照射至少60分鐘。填寫樣品制備實驗室出入記錄。9、離心管破裂應如何處理？ （ 5分）產 &使用離心機時，裝有感染性或潛在感染性材料的離心管破裂或可疑破裂， 應關閉離心機并保持機蓋 關閉30分鐘，使氣溶膠沉積。如離心機停止后發生離心管破裂，應立即關閉機蓋，保持 30分鐘 清理時，戴一雙厚膠皮手套，必要時在外面再戴一次性手套，用銀