1、會(huì)計(jì)學(xué)1食品中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定食品中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定第一頁，編輯于星期二：十一點(diǎn) 六分。三、實(shí)驗(yàn)方法三、實(shí)驗(yàn)方法1、檢驗(yàn)程序、檢驗(yàn)程序菌落總數(shù)檢驗(yàn)程序菌落總數(shù)檢驗(yàn)程序：檢樣檢樣做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液選擇選擇2-32-3個(gè)適宜稀釋度個(gè)適宜稀釋度各以各以1ml1ml之量分別入滅菌平皿內(nèi)之量分別入滅菌平皿內(nèi)每皿內(nèi)加入每皿內(nèi)加入46460 0C C適量營養(yǎng)瓊脂適量營養(yǎng)瓊脂菌落數(shù)菌落數(shù)報(bào)告報(bào)告第1頁/共11頁第二頁，編輯于星期二：十一點(diǎn) 六分。2、檢樣稀釋及培養(yǎng)檢樣稀釋及培養(yǎng)（1）以無菌操作，將檢樣）以無菌操作，將檢樣25g（或（或25ml）剪碎以后，放于含有）剪碎以后，放于含有2

2、25ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預(yù)先置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠）或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預(yù)先置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠）或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。的均勻稀釋液。 固體檢樣在加入稀釋液后，最好置滅菌均質(zhì)器中以固體檢樣在加入稀釋液后，最好置滅菌均質(zhì)器中以8000r/min100000r/min的速度處理的速度處理1min，做成，做成1：10的均勻稀釋液。的均勻稀釋液。（2）用）用1ml滅菌吸管吸取滅菌吸管吸取1：10稀釋液稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋的試管內(nèi)（

3、注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液，下同），振搖試管混合均勻，做成滅菌生理鹽水或其他稀釋的試管內(nèi)（注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液，下同），振搖試管混合均勻，做成1：100的稀釋液。的稀釋液。（3）另?。┝砣?ml的滅菌吸管，按上項(xiàng)操作順序作的滅菌吸管，按上項(xiàng)操作順序作10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支支1ml滅菌吸管。滅菌吸管。第2頁/共11頁第三頁，編輯于星期二：十一點(diǎn) 六分。（4）根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì)，選擇）根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì)，選擇23個(gè)適宜稀釋度，分別在作個(gè)適宜稀釋度，分別在作10倍遞增稀釋的

4、同時(shí)，即以吸取該稀釋度的吸管移倍遞增稀釋的同時(shí)，即以吸取該稀釋度的吸管移1ml稀釋液于滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度作兩個(gè)平皿。稀釋液于滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度作兩個(gè)平皿。（5）稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時(shí)將涼至）稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時(shí)將涼至460C營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基可放置在（可放置在（461）0C）水浴鍋內(nèi)保溫）水浴鍋內(nèi)保溫注入平皿注入平皿15ml20mL，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻，同時(shí)將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻，同時(shí)將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1ml稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。 （6）等瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置（）等瓊脂凝固

5、后，翻轉(zhuǎn)平板，置（361）0C恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)（恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)（482）h取出，計(jì)算平板內(nèi)菌落數(shù)目乘以倍數(shù)，即得取出，計(jì)算平板內(nèi)菌落數(shù)目乘以倍數(shù)，即得1g（1mL）樣品所含菌落總數(shù)。）樣品所含菌落總數(shù)。 第3頁/共11頁第四頁，編輯于星期二：十一點(diǎn) 六分。3、菌落計(jì)算方法、菌落計(jì)算方法（1）菌落計(jì)數(shù)方法）菌落計(jì)數(shù)方法 做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀查，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀查，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。（2）菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告）菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告平板菌落數(shù)

6、的選擇平板菌落數(shù)的選擇 選取菌落數(shù)在選取菌落數(shù)在3030300300之間的平板作為菌落總數(shù)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板，應(yīng)采用兩個(gè)平板平均數(shù)，其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘之間的平板作為菌落總數(shù)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板，應(yīng)采用兩個(gè)平板平均數(shù)，其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘2 2以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如

7、有鏈狀菌落生長時(shí)（菌落之間無明顯界線），若僅有一條鏈，可視為一個(gè)菌落數(shù)；如果有不同來源的幾條鏈，則應(yīng)將每條鏈作為一個(gè)菌落計(jì)。以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如有鏈狀菌落生長時(shí)（菌落之間無明顯界線），若僅有一條鏈，可視為一個(gè)菌落數(shù)；如果有不同來源的幾條鏈，則應(yīng)將每條鏈作為一個(gè)菌落計(jì)。 第4頁/共11頁第五頁，編輯于星期二：十一點(diǎn) 六分。稀釋度的選擇稀釋度的選擇 應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在3030300300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。若有兩上稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。若有兩上稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在3030300300之間，則視兩者之比如何來決定。若其

8、比值小于或等于之間，則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2 2，應(yīng)報(bào)告其平均數(shù)；若大于，應(yīng)報(bào)告其平均數(shù)；若大于2 2則報(bào)告其中較小的數(shù)字。則報(bào)告其中較小的數(shù)字。 若所有稀釋度平均菌落數(shù)均大于若所有稀釋度平均菌落數(shù)均大于300300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于3030，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。 若所有稀釋度均無菌落生長，則以小于若所有稀釋度均無菌落生長，則以小于1 1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)

9、告之。乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告之。第5頁/共11頁第六頁，編輯于星期二：十一點(diǎn) 六分。 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在3030300300之間，其中一部分大于之間，其中一部分大于300300或小于或小于3030時(shí)，則以最接近時(shí)，則以最接近3030或或300300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。菌落數(shù)的報(bào)告菌落數(shù)的報(bào)告 菌落數(shù)在菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)，按其實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于以內(nèi)時(shí)，按其實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值，以四舍五入方法計(jì)算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)，也可用時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值，以四舍五入方法計(jì)算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)，也可用10的指數(shù)來表示。的指數(shù)來表示。思考題及