1、流式細(xì)胞術(shù) 細(xì)胞染色，制備單細(xì)胞懸液 上機(jī)獲取數(shù)據(jù) 數(shù)據(jù)分析PMTPMTPMTPMT 4DichroicFiltersBandpassFilters流式細(xì)胞檢測原理流式細(xì)胞檢測原理Laser 1234Flow cell流式數(shù)據(jù)表現(xiàn)形式流式數(shù)據(jù)表現(xiàn)形式FS:細(xì)胞大小SS:胞內(nèi)顆粒性流式血液腫瘤數(shù)據(jù)分析步驟 1 、尋找異常細(xì)胞 2、 定義異常細(xì)胞 -異常細(xì)胞是什么細(xì)胞？ -異常細(xì)胞的量有多少？ 3、結(jié)論如何尋找異常細(xì)胞?正常細(xì)胞群的分布正常細(xì)胞群的分布粒細(xì)胞粒細(xì)胞單核細(xì)胞單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞CD45:白細(xì)胞共同抗原，表達(dá)于所有白細(xì)胞異常細(xì)胞群異常細(xì)胞群異常細(xì)胞群異常細(xì)胞群異常細(xì)胞的量如何計(jì)算?

2、 流式如何定義細(xì)胞? -以白血病細(xì)胞表達(dá)的抗原標(biāo)志作為依據(jù)粒細(xì)胞成熟過程粒細(xì)胞成熟過程階段表達(dá)不表達(dá)I原粒CD45+CD34+CD117+DR+CD13+CD33+CD15,CD11b,CD16, CD10II早幼粒CD45+CD117+CD13+CD33+CD15+CD34, HLA-DR, CD11b,CD16 III中幼粒CD45+CD13+CD33+CD15+CD11b+CD34, CD117, DR, CD16IV晚幼粒CD45+CD13+CD33+CD15+CD11b+CD16+CD34, CD117, DR, CD10V成熟粒CD45+CD13+CD33+CD15+CD11b+C

3、D16+CD10+CD34, CD117,DR不同階段粒細(xì)胞不同階段粒細(xì)胞CDCD分子的表達(dá)情況分子的表達(dá)情況單核細(xì)胞的成熟過程單核細(xì)胞的成熟過程不同階段單核細(xì)胞不同階段單核細(xì)胞CD分子的表達(dá)情況分子的表達(dá)情況階段表達(dá) 不表達(dá)I原單CD45+CD34+CD117+DR+CD13+CD33+CD11b, CD14,CD15II幼單CD45+DR+CD34+/CD117+/-CD13+CD33+CD11b+CD15+CD34, CD117, CD14III成熟單CD45+ DR+CD13+CD33+CD11b+CD15+CD14+CD34,CD117紅系的成熟過程紅系的成熟過程階段表達(dá)不表達(dá)I原紅

4、CD45+CD71+CD117+Glycophorin A (CD235a)II有核紅CD71+Glycophorin+CD45III成熟紅Glycophorin+CD45, CD71B B淋巴細(xì)胞成熟過程淋巴細(xì)胞成熟過程T T淋巴細(xì)胞的成熟過程淋巴細(xì)胞的成熟過程 其他血液系統(tǒng)腫瘤的特異性標(biāo)志其他血液系統(tǒng)腫瘤的特異性標(biāo)志 毛細(xì)胞性白血病：毛細(xì)胞性白血病：CD19+CD19+，CD103+CD103+， CD11c/CD22CD11c/CD22雙陽性高表達(dá)雙陽性高表達(dá) CLLCLL：CD19+/CD5+CD19+/CD5+ CMMLCMML：CD14+/CD68+/CD13+CD33+/CD14

5、+/CD68+/CD13+CD33+/高高SSCSSC MMMM：CD19+CD19+，CD38+CD38+ 流式報(bào)告單的結(jié)論如何得出?病例分析病例一異常細(xì)胞異常細(xì)胞髓系？淋系？髓系？淋系？流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果表明骨髓細(xì)胞中髓系母細(xì)胞（流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果表明骨髓細(xì)胞中髓系母細(xì)胞（CD34+CD34+或或/ /和和CD117+CD117+）約）約占骨髓細(xì)胞總數(shù)占骨髓細(xì)胞總數(shù)32%32%；同時(shí)伴有單核細(xì)胞系列分化傾向的細(xì)胞約占骨髓細(xì)胞；同時(shí)伴有單核細(xì)胞系列分化傾向的細(xì)胞約占骨髓細(xì)胞總數(shù)約總數(shù)約70%70%。結(jié)果符合急性髓性白血病伴單核細(xì)胞系列分化（。結(jié)果符合急性髓性白血病伴單核細(xì)胞系列分化（AML-

6、M5AML-M5）。）。因?yàn)樵紗魏思?xì)胞幼稚單核細(xì)胞大于等于因?yàn)樵紗魏思?xì)胞幼稚單核細(xì)胞大于等于8080為為M5a,xM5a,x小于小于8080為為M5bM5b，在分界線上，所以不區(qū)分，在分界線上，所以不區(qū)分a,b.a,b.治療方法類似。治療方法類似。淋巴細(xì)胞-4.2 T細(xì)胞占淋巴細(xì)胞44.9%，CD4:CD8=0.66，未見明顯異常；NK細(xì)胞占淋巴細(xì)胞3.9%，未見明顯異常；成熟B細(xì)胞占淋巴細(xì)胞40.7%，為多克隆B細(xì)胞,未見明顯異常。粒細(xì)胞-22.7 相對比例未見明顯減少。免疫表型提示粒細(xì)胞發(fā)育成熟標(biāo)記物表達(dá)紊亂。單核細(xì)胞-37.7 相對比例明顯增多，其中約70%為成熟單核細(xì)胞，免疫表型為

7、CD14+,CD64+,CD11b+, CD13+,CD33+,HLA-DR+和CD4+。CD45 Dim-33.0 相對比例明顯增多，為髓性原始/幼稚細(xì)胞,免疫表型為CD34+，CD117+，CD13+,CD33+和HLA-DR+。非白細(xì)胞-0.2 未見明顯異常。病例二淋巴細(xì)胞-41.5 T細(xì)胞占淋巴細(xì)胞70.9%，CD4:CD8=1.42，未見明顯異常；NK細(xì)胞占淋巴細(xì)胞4.7%，未見明顯異常；成熟B細(xì)胞占淋巴細(xì)胞17.6%，為多克隆B細(xì)胞,未見明顯異常。粒細(xì)胞-10.9 其相對比例明顯減低，免疫表型未見明顯異常。單核細(xì)胞-4.9 未見明顯異常。CD45 Dim-36.1 主要為原始/幼稚B淋巴細(xì)胞，其免疫表型為CD34-、CD117-、CD19+、HLA-DR+和CD10+。非白細(xì)胞-6.1 主要為細(xì)胞碎片。流式細(xì)胞術(shù)檢測表明結(jié)果原始流式細(xì)胞術(shù)檢測表明結(jié)果原始/ /幼稚幼稚B B淋巴細(xì)胞約占骨髓細(xì)胞白細(xì)胞總數(shù)淋巴細(xì)胞約占骨髓細(xì)胞白細(xì)胞總數(shù)30%30%， 其免疫表型為其免疫表型為CD34-CD34-、