1、附件 12白酒中甲醇的快速檢測（ KJ201912）1 范圍本方法規定了白酒中甲醇的快速檢測方法。本方法第一法適用于白酒 （酒精度 18% vol 68% vol ）中甲醇的快速檢測， 第二法適用于白酒（酒精度 34% vol 68% vol ）中甲醇的快速檢測。第一法變色酸法2 原理樣品中的甲醇在磷酸溶液中，被高錳酸鉀氧化為甲醛，用偏重亞硫酸鈉除去過量的高錳酸鉀。甲醛在硫酸條件下與變色酸反應生成藍紫色化合物。 通過與甲醇對照液比較， 對樣品中甲醇含量進行判定。3 試劑和材料方法中所用試劑，除另有規定外，均為分析純，水為GB /T 6682 規定的三級水。3.1 試劑高錳酸鉀（ KMnO 4）

2、。磷酸（ H3PO4）。偏重亞硫酸鈉（Na2S2O5）。硫酸（ H2SO4）。變色酸鈉（ C10H 6Na2O8S2）。乙醇（ C2H 6O）。乙醇（體積分數）：吸取乙醇5 mL ，置于 100 mL 容量瓶，加水稀釋至刻度。高錳酸鉀 -磷酸溶液（ 30 g/L ）：稱取 3.0 g 高錳酸鉀，溶于100 mL 磷酸 -水（ 15+85 ）溶液。偏重亞硫酸鈉溶液（100 g/L ）：稱取10.0 g 偏重亞硫酸鈉，溶于100 mL 水。變色酸顯色劑： 稱取 0.1 g 變色酸鈉溶于 25 mL 水中，緩慢加入 75 mL 硫酸，并用玻璃棒不斷攪拌，放冷至室溫。13.2 參考物質甲醇參考物質中文

3、名稱、英文名稱、 CAS 登錄號、分子式、相對分子質量見表1，純度 99%。表 1 甲醇中文名稱、英文名稱、CAS 登錄號、分子式、相對分子質量中文名稱英文名稱CAS 登錄號分子式相對分子質量甲醇Methanol67-56-1CH 3OH32.043.3 標準溶液的配制甲醇標準溶液（ 1 g/L ）：稱取 0.1 g（精確至 0.001 g）甲醇參考物質于 100 mL 容量瓶中，用 5%乙醇稀釋至刻度，混勻。3.4 材料甲醇快速檢測試劑盒：適用基質為白酒（酒精度18 68% vol ），需在陰涼、干燥、避光條件下保存。4 儀器和設備4.1電子天平：感量 0.001 g。4.2量筒： 50 m

4、L ， 100 mL 。4.3移液器： 1 mL ， 5 mL 。4.4酒精計：分度值為 1% vol 。4.5渦旋振蕩器。4.6水浴鍋。4.7環境溫度： 10 30 。5分析步驟5.1待測液制備5.1.1 酒精度的測定：取潔凈、干燥的100 mL 量筒，注入 100 mL 樣品，靜置數分鐘，待酒中氣泡消失后，放入潔凈、擦干的酒精計，輕輕按一下，不應接觸量筒，平衡約5 min ，水平觀測，讀取與彎月面相切處的刻度示值。5.1.2 樣品稀釋：根據酒精計示值吸取對應體積的樣品，置于10 mL 比色管中，補水至10 mL（參見表 2），混勻。表 2不同酒精度樣品吸取體積表酒精計示值 (% vol)樣

5、品吸取體積 (mL)補水體積 (mL)18 222.57.523 272.08.028 321.78.333 361.58.5237 411.38.742 451.28.846 531.09.054 600.99.161 680.89.2顯色：吸取稀釋后的樣品溶液（） 1.0 mL ，置于 10 mL 比色管中，加入高錳酸鉀 -磷酸溶液 0.5 mL ，混勻，密塞，靜置 15 min 。加入 0.3 mL 偏重亞硫酸鈉溶液，混勻，使試液完全褪色。沿比色管壁緩慢加入 5 mL 變色酸顯色劑，密塞，混勻，置于 70水浴中，顯色 20 min 后取出，迅速冷卻至室溫，即得待測液。每批測試應吸取1 m

6、L 5%乙醇同“加入高錳酸鉀-磷酸溶液 0.5mL”起操作，隨行全試劑空白試驗。5.2甲醇對照液制備根據待測樣品的分類 （糧谷類或其他類） ，吸取對應體積 （參見表 3）的甲醇標準溶液 （3.3），置于 10 mL 比色管中，補 5%乙醇至 10 mL ，混勻。吸取上述溶液 1.0 mL ，置于 10 mL 比色管中，同“加入高錳酸鉀 -磷酸溶液 0.5 mL ”起操作，制得甲醇對照液。表 3 標準溶液吸取體積表待測樣品分類標準溶液吸取體積(mL)糧谷類0.3其他類1.05.3 判讀將待測液（ 5.1）與甲醇對照液（ 5.2）進行目視比色， 10 min 內判讀結果。應進行平行試驗，且兩次判讀

7、結果應一致。6 結果判定要求觀察待測液顏色， 與甲醇對照液比較判讀樣品中甲醇的含量。 顏色深于對照液者為陽性， 淺于對照液者為陰性。為盡量避免出現假陰性結果，判讀時遵循就高不就低的原則。7 性能指標7.1 檢測限0.4 g/L （以 100%酒精度計）。7.2 判定限糧谷類： 0.6 g/L （以 100%酒精度計）；其他類：2.0 g/L （以 100% 酒精度計）。7.3 靈敏度 95%。37.4 特異性 85%。7.5 假陰性率 5%。7.6 假陽性率 15%。注：性能指標計算方法見附錄A 。8其他本方法所述試劑及操作步驟等是為給方法使用者提供方便，在使用本方法時不作限定。方法使用者在使

8、用替代試劑或操作步驟前，須對其進行考察，應滿足本方法規定的各項性能指標。本方法的參比方法為GB 5009.266 食品安全國家標準食品中甲醇的測定。為減少乙醇量對顯色的干擾，本方法中待測液和對照液的乙醇量為5%。本方法中采用的高錳酸鉀 -磷酸溶液（）、變色酸顯色劑（）久置會變色失效，建議方法使用者考察穩定性或臨用新配。采用本方法，酒精度為非整數的樣品，為避免出現假陰性結果，建議參照表2吸取酒精度整數部分對應體積。當目視不能判定顏色深淺時，可采用分光光度計測定待測液與甲醇對照液570 nm 處的吸光度進行比較判定。第二法乙酰丙酮法9 原理樣品中的甲醇在磷酸溶液中，被高錳酸鉀氧化為甲醛，用草酸除去

9、過量的高錳酸鉀。甲醛在過量銨鹽條件下與乙酰丙酮反應生成黃色化合物。 通過與甲醇對照液比較， 對樣品中甲醇含量進行判定。10 試劑和材料方法中所用試劑，除另有規定外，均為分析純，水為GB /T 6682規定的三級水。10.1 試劑10.1.1高錳酸鉀 -磷酸溶液：同 3.1.8。10.1.2草酸：無水草酸（ H2C2O4）或含 2 分子結晶水的草酸（ H 2C2O4·2H2O）。10.1.3乙酰丙酮（ C5H8O2）。10.1.4乙酸銨（ C2H 7O2N）。4冰乙酸（ C2H 4O2）。乙醇（體積分數）： 量取乙醇 （）50 mL ，置于 100 mL 容量瓶， 加水稀釋至刻度。10

10、.1.7草酸溶液（ 50 g/L ）：稱取5.0 g 無水草酸或 7.0 g 含 2 分子結晶水的草酸，溶于100 mL水。10.1.8乙酰丙酮溶液： 稱取乙酸銨25.0 g，加水 70 mL 使溶解，加冰乙酸 3 mL 及乙酰丙酮0.25 mL ，加水稀釋至100 mL ，用力搖勻。臨用現配。10.2 參考物質同3.2。10.3 標準溶液配制甲醇標準溶液（ 1 g/L ）：稱取 0.1 g（精確至 0.001g）甲醇標準物質于 100 mL 容量瓶中，用50%乙醇稀釋至刻度，混勻。10.4 材料甲醇快速檢測試劑盒：適用基質為白酒（酒精度34% vol 68% vol ），需在陰涼、干燥、避光

11、條件下保存。11儀器和設備同4。12分析步驟12.1 待測液制備酒精度的測定：同。顯色：根據酒精計示值吸取對應體積的樣品，置于10 mL 比色管中，補乙醇和水至2.0 mL（參見表 4），混勻。加入高錳酸鉀 -磷酸溶液 1.0 mL ，混勻，密塞，靜置 30 min 。加入草酸溶液 1.0 mL ，混勻， 密塞，置沸水浴中使其褪色， 取出冷卻至室溫。 加入乙酰丙酮溶液 2.0 mL ，混勻，密塞，置沸水浴中， 顯色 30 min 后取出，迅速冷卻至室溫， 即得待測液。 每批測試應吸取 2 mL 50% 乙醇同“加入高錳酸鉀 -磷酸溶液 1.0 mL ”起操作，隨行全試劑空白試驗。表 4不同酒精

12、度樣品吸取體積表酒精計示值樣品吸取體積補乙醇體積補水體積(% vol)(mL)(mL)(mL)34351.50.50.036401.30.50.241441.20.50.345521.00.50.553580.90.50.659650.80.50.766680.70.50.8512.2 甲醇對照液制備根據待測樣品的分類 （糧谷類或其他類） ，吸取對應體積 （參見表 5）的甲醇標準溶液 （ 10.3），補 50%乙醇至 2.0 mL ，混勻后同“加入高錳酸鉀 -磷酸溶液 1.0 mL ”起操作， 制得甲醇對照液。表 5 標準溶液吸取體積表待測樣品分類標準溶液吸取體積(mL)糧谷類0.6其他類2.

13、012.3 判讀將待測液（ 12.1）與甲醇對照液（ 12.2）進行目視比色， 10 min 內判讀結果。應進行平行試驗，且兩次判讀結果應一致。13 結果判定要求同6。14 性能指標14.1檢測限0.6 g/L （以 100% 酒精度計）14.2判定限糧谷類： 0.6 g/L （以 100%酒精度計）；其他類：2.0 g/L （以 100% 酒精度計）14.3靈敏度 95%。14.4特異性 85%。14.5假陰性率 5%。14.6假陽性率 15%。注： 性能指標計算方法見附錄A 。15 其他本方法所述試劑及操作步驟等是為給方法使用者提供方便，在使用本方法時不作限定。方法使用者在使用替代試劑或操

14、作步驟前，須對其進行考察，應滿足本方法規定的各項性能指標。6本方法的參比方法為GB 5009.266 食品安全國家標準食品中甲醇的測定。為減少乙醇量對顯色的干擾，本方法中待測液和對照液的乙醇量為50%。采用本方法，酒精度為非整數的樣品，為避免出現假陰性結果，建議參照表4吸取酒精度整數部分對應體積。當目視不能判定顏色深淺時，可采用分光光度計測定待測液與甲醇對照液415 nm 處的吸光度進行比較判定。7附錄 A性能指標計算表樣品情況a陽性陰性總數顯著性差異（2）靈敏度（ p+， %）特異性（ p-， %）假陰性率（ pf-， %）假陽性率（ pf+ ， %）相對準確度，%c注：檢測結果b總數陽性陰性N11N12N1.=N11+N12N21N22N2.=N21+N22N.1=N11+N21N.2=N12+N22N=N1.+N2. 或N.1+N.222），=（ |N12-N21|-1 ） /（ N12+N21自由度（ df） =1p+=N11/N1.p-=N22/N2.pf-=N12/N1.=100- 靈敏度pf+=N21/N2.=100- 特異性（ N11+N22 ） /(N1.+N2.)a 由參比方法檢驗得到的結果或者樣品中實際的公議值結果；b 由待確認方法檢驗得到的結果。靈敏度的計