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文檔簡介
1、配制溶液的一般實驗步驟配制溶液步驟因配置的溶液不同而有所不同,現舉兩個例 子:舉例1:配置0. 05mol/L , 400mL NaOH溶液的步驟:要準確配 置氫氧化鈉的濃度,則要用容量瓶定容,實驗室沒有400毫升的 容量瓶,則選用500毫升的容量瓶。1.計算需要氫氧化鈉的質 量:0. 5L*0. 05mol/L*40. 01=1. 000 克2 .稱1.000克氫氧化鈉于燒杯中,加少量水溶解,然后倒入500毫升容量瓶里,分3次洗燒杯,將溶液全部倒入容量瓶里, 最后用水稀釋至刻度線,搖勻,即,得到0.05niol/L的氫氧化鈉 溶液。如果不需要很準確的話,可以直接用量筒量400毫升,稱的時候
2、只要稱0.8克就可以了。舉例2:配置1. 5mol/L的稀硫酸 200mL步驟:第1步:計算:根據C1VFC2V2 ,計算需要濃硫酸的體積;第2步:量取,利用刻度吸管吸取需要濃硫酸的體積;第3步:稀 釋,將濃硫酸轉移到小燒杯中,加少量水稀釋;第4步:轉移, 待溶液溫度降低后,將燒杯中的硫酸轉移到200mL容量瓶中; 第5步:洗滌,洗滌小燒杯,和轉移的時候用到的玻璃棒, 至少三次,將洗滌的水一并轉移到容量瓶中;第6步:定容,加水定容到刻度線,在距離刻度線一厘米左右改 用膠頭滴管定容;第7步:搖勻,將溶液搖勻,如果液面下降也不可再加水定容; 第8步:將配得的溶液轉移至試劑瓶中,貼好標簽;舉例3:配
3、 制500mL , 0. Imol/L碳酸鈉溶液步驟及注意事項所需的儀器: 燒杯、容量瓶、玻璃棒、膠頭滴管、分析天平、藥 匙、量筒步 驟:第一步:計算:所需碳酸鈉的質量二0. 5*0. 1*106=5. 3克; 第二步:稱量:在天平上稱量5.3克碳酸鈉固體,并將它倒入小 燒杯中;第三步:溶解:在盛 有碳酸鈉固體的小燒杯中加入適量 蒸儲水,用玻璃棒攪拌,使其溶解;第四步:移液:將溶液沿玻 璃棒注入500mL容 量瓶中;第五步:洗滌:用蒸儲水洗燒杯2 3次,并倒入容量瓶中;第六步:定容:倒水至刻度線12cm處改用膠 頭滴 管滴到與凹液面平直;第七步:搖勻:蓋好瓶塞,上下顛倒、搖 勻;第八步:裝瓶、
4、貼簽;誤差分析:固體藥品的稱量與液體 藥品的量取是否準確;把溶液向容量瓶中轉移,溶液灑了;未 洗滌燒杯和玻璃棒;用待配液潤洗了容量瓶;定容時水加多了 或加少了;定容時未平視刻度 線。仰視、俯視對溶液濃度有何影 響? 俯視刻度線,實際加水量未到刻度線,使溶液的物質的量 濃度增大;仰視刻度線,實際加水量超過刻度線,使溶液的物質的量濃度 減小。市售鹽酸密度L 19,質量分數36%38%以37%計算:步驟:L計算:假若需要2mol/L的硫酸100mL ,則需37% 濃硫酸16.6mL;計算過程如下:假設鹽酸VmL :(0. lL*2mol/L*36. 5g/mol ) /37%=V/1. 19V=16
5、. 59mL,考慮到 量 筒的精確度0.1mL,故取16. 6mL即可。2量取:16.6mL濃硫酸;3 .溶解:把16.6mL濃硫酸倒入已經加入蒸儲水的小燒杯中,用 玻璃棒不斷攪拌。4.轉移:待溶液冷卻后,將溶液沿玻璃棒倒入 100毫升的容量瓶中。5.洗滌:再用少量蒸餌水洗滌燒杯和玻璃棒2-3次,并將全部洗液移入容量瓶中。6 .定容:向容量瓶內加蒸儲水,當液面接近刻度線2厘米處 時,改用滴管滴加蒸儲水到一面恰好與刻度線相切。7 .搖勻:塞上瓶塞,反復顛倒容量瓶數次,使瓶內的溶液均勻, 此時可以把溶液倒入到試劑瓶中貼標簽保存。完成配制過程容量 瓶的使用六忌:L忌用容量瓶進行溶解(體積不準確)2.
6、忌直接往容量瓶倒液(灑到外面)3.忌加水超過刻度線(濃度偏低)4,忌讀數仰視或俯視(仰視濃度偏低,俯視濃度偏高)5.忌不洗滌玻璃棒和燒杯(濃度偏低)6.忌標準液存放于容量瓶(容量瓶是量器,不是容器)1 mol/L 的氫氧化鈉溶液250mL ,完成下列步驟:用天平稱取氫氧化 鈉固體/克。將稱好的氫氧化鈉固體放入燒杯中加少量蒸儲水 將其溶解,待完全溶解后將溶液沿玻璃棒移入250mL的容量瓶 中。用少量蒸儲水沖洗23次,將沖洗 液移入容量瓶中,在操作過程中不能損失點滴液體,否則會 使溶液的濃度偏低。向容量瓶內加水至刻度線12cm時,改用膠頭滴管小心地加水至溶液凹液面與刻度線相切,若加 水超過刻度線,
7、會造成溶液濃度偏低應該重新配制。 最后蓋 好瓶蓋,搖勻,將配好的溶液移入試劑瓶中貼好標簽。常用貯液 與溶液lmol/L亞精胺(Spermidine ):溶解2. 55g亞精胺于足量的水 中,使終體積為10mL。分裝成小份貯存于-20 Co lmol/L精胺 (Spermine):溶解3. 48g精胺于足量的水中,使終體積 為10mL。 分裝成小份貯存于-20C。10mol/L乙酸胺(ammoniumacetate):將77. 1g乙酸胺溶解于水中,加水定 容至 1L后,用0. 22um孔徑的濾膜過濾除菌。10mg/mL牛 血清蛋白 (BSA):力口 100mg的牛血清蛋白(組分V或分子生 物學
8、試劑級,無 DNA酶)于9. 5mL水中(為減少變性,須將蛋白加入水中,而不是 將水加入蛋白),蓋好蓋后,輕輕 搖動,直至牛血清蛋白完全溶 解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml ,然后分裝成小份貯 存于-20C。lmol/L二硫蘇糖醇(DTT ):在二硫蘇糖醇5g的 原裝瓶中加32. 4mL水,分成小份貯存于-20C,或轉移lOOmg的二 硫蘇糖醇至微量離心管,加0.65mL的水配制成lmol/L二硫蘇 糖醇溶液。8mol/L乙酸鉀(potassiumacetate):溶解78. 5g乙酸 鉀于足量的水中,加水定容到100mL。lmol/L氯化鉀(KC1):溶解 7.46g氯化鉀于足量的水
9、中,加水定容到100mL。3moi/L乙酸鈉(sodiumacetate):溶解40. 8g的三水乙酸鈉于 約90mL水中,用冰乙酸調溶液的pH至5.2,再加水定容到100過。0. 5mol/L EDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液(0. 5mol/L ),混合后形成EDTA的三鈉鹽。或稱取186. 1g的 Na2EDTA 2H20和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。lmol/L HEPES :將 23. 8gHEPES 溶于約 90mL 的水中,用 NaOH 調 pH (6. 8-8. 2),然后用水定容至 100mlo lmol/L HC1 :力口 8. 6ml的濃鹽
10、酸至91.4ml的水中。25mg/ml IPGT :溶解250mg的IPGT (異丙基硫代-3 -D-半乳糖甘)于10ml水 中,分成小份貯存于-20 Co 1皿1/川8加2:溶解20.38 MgCI2 6H20于足量的水中,定容到lOOmLo 100mmol/LPMSF :溶解174mg的PMSF (苯甲基磺酰氟)于足量的異 丙醇中, 定容到10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹或貯存于-20。Co 20mg/mL 蛋白酶 K ( proteinase K):將 200mg 的蛋白酶 L 加 入到9. 5mL水中,輕輕搖動,直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋 混合。加水定容到10ml,然后分裝成
11、小份貯存于-20 Co 1 Omg/mL R-nase (無 D-Nase) ( D-Nase freeR-Nase):溶解 lOmg 的胰蛋白RNA酶于1mL的lOmmol/L的乙酸鈉水溶液中(PH5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min ,使DNA酶失活。用lmol/L的Tris HC1調pH至7.5,于- 20C貯存。(配制過程中要戴手套)51noi/L氯化鈉(NaCl):溶 解29.2g氯化鈉于足量的水中,定容至100mL。10N氫氧化 鈉(NaOH ):溶解400g氫氧化鈉顆粒于約0.9L水的燒杯中(磁力攪拌器攪拌),氫氧化鈉完全溶解后用水定容至1L。10% SDS (十二烷基硫酸鈉):稱取lOOgSDS慢慢轉移到約 含0. 9L的水的燒杯中,用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定 容至IL。2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36. 4g山梨(糖)醇于足量水中使終體積為100mLo100%三氯乙酸CTCA):在裝有500gTCA的試劑瓶中加入100磯水,用 磁力攪 拌器攪拌直至完全溶解。(稀釋液應在臨用前配制)2. 5%X - gal (5-溟4氯-3-口弓|蛛一8
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