1、實驗一實驗一 顯微鏡的使用及顯微鏡的使用及微生物形態觀察微生物形態觀察u目的要求目的要求u顯微鏡使用的原理顯微鏡使用的原理u實驗材料實驗材料u實驗程序實驗程序目目 的的 要要 求求u掌握顯微鏡的結構、原理，學習顯微鏡掌握顯微鏡的結構、原理，學習顯微鏡的操作方法和保養的操作方法和保養u觀察微生物的個體形態，學會生物圖的觀察微生物的個體形態，學會生物圖的繪制繪制顯微鏡的結構顯微鏡的結構u顯微鏡的構造顯微鏡的構造 1.機械部分機械部分: :鏡座、鏡鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉換器、臂、鏡筒、物鏡轉換器、載物臺、載物臺移動器、載物臺、載物臺移動器、調節器等部件調節器等部件. .它起著支持、它起著支持、 調

2、節、固定等作用調節、固定等作用. . 2.光學部分光學部分: :目鏡目鏡 、 物物鏡鏡 、 照明裝置照明裝置(聚光鏡、聚光鏡、 光圈、光圈、 反光鏡等反光鏡等). . 它使它使檢視物放大檢視物放大, ,造成物象造成物象. . 顯微鏡的光學原理顯微鏡的光學原理u顯微鏡的放大倍數和分辨率顯微鏡的放大倍數和分辨率 1. 放大倍數放大倍數=物鏡放大倍數物鏡放大倍數目目鏡放大倍數鏡放大倍數 2. 顯微鏡的分辨率顯微鏡的分辨率 是表示顯微是表示顯微鏡辨析物體（兩端）兩點之間距鏡辨析物體（兩端）兩點之間距離的能力，可用公式表示為：離的能力，可用公式表示為： =0.61/ n sin(/2) 式中式中 ：物鏡

3、分辨出物體兩點間物鏡分辨出物體兩點間的最短距離。的最短距離。 ：可見光的波長（平均可見光的波長（平均0.550.55 m) m) n:n: 物鏡和被檢標本間介質的折物鏡和被檢標本間介質的折射率。射率。 ：鏡口角。鏡口角。顯微鏡的光學原理顯微鏡的光學原理u油鏡使用的原理油鏡使用的原理 油鏡，即油浸物鏡。當光線油鏡，即油浸物鏡。當光線由反光鏡通過玻片與鏡頭之由反光鏡通過玻片與鏡頭之間的空氣時，由于空氣與玻間的空氣時，由于空氣與玻片的密度不同，使光線受到片的密度不同，使光線受到曲折，發生散射，降低了視曲折，發生散射，降低了視野的照明度。若中間的介質野的照明度。若中間的介質是一層油（是一層油（其折射率

4、與玻片其折射率與玻片的相近的相近），則幾乎不發生折），則幾乎不發生折射，增加了視野的進光量，射，增加了視野的進光量，從而使物象更加清晰。從而使物象更加清晰。顯微鏡的操作方法顯微鏡的操作方法u低倍鏡的操作低倍鏡的操作1. 1. 置顯微鏡于固定的桌上。置顯微鏡于固定的桌上。2. 2. 旋動轉換器，將低倍鏡移到鏡筒下方與之對直。旋動轉換器，將低倍鏡移到鏡筒下方與之對直。3. 3. 轉動反光鏡向著光源處，同時用眼對準目鏡，仔細觀轉動反光鏡向著光源處，同時用眼對準目鏡，仔細觀察，視野亮度均勻。察，視野亮度均勻。4. 4. 將標本放在載物臺上，使觀察的目的物置于圓孔的正將標本放在載物臺上，使觀察的目的物置

5、于圓孔的正中央。中央。5. 5. 將粗調節器向下旋轉，將粗調節器向下旋轉，眼睛注視物鏡眼睛注視物鏡，以防物鏡和載，以防物鏡和載玻片相碰，當物鏡的尖端距載玻片約玻片相碰，當物鏡的尖端距載玻片約0.5cm0.5cm處時停止處時停止旋轉。旋轉。6. 6. 左眼向目鏡觀察，調節粗、細調節器直至目的物清晰左眼向目鏡觀察，調節粗、細調節器直至目的物清晰為止。為止。顯微鏡的操作方法顯微鏡的操作方法u高倍鏡的操作高倍鏡的操作1. 1. 使用高倍鏡之前，先用低倍鏡觀察，將目的物使用高倍鏡之前，先用低倍鏡觀察，將目的物移至視野正中央。移至視野正中央。2. 2. 旋動轉換器換成高倍鏡，調節細調節器直至目旋動轉換器換

6、成高倍鏡，調節細調節器直至目的物清晰；如果高倍鏡觸及載玻片應立即停止旋的物清晰；如果高倍鏡觸及載玻片應立即停止旋動，說明原來低倍鏡沒有調準焦距，應重調低倍動，說明原來低倍鏡沒有調準焦距，應重調低倍鏡，找到目的物。鏡，找到目的物。顯微鏡的操作方法顯微鏡的操作方法u油鏡的操作油鏡的操作1. 1. 如果用高倍鏡未能看清目的物，則可用油鏡。應先用低如果用高倍鏡未能看清目的物，則可用油鏡。應先用低倍鏡和高倍鏡檢查標本片，將目的物移到視野正中。倍鏡和高倍鏡檢查標本片，將目的物移到視野正中。2. 2. 在載玻片上滴一滴香柏油在載玻片上滴一滴香柏油( (或液體石蠟或液體石蠟) )，將油鏡移至正，將油鏡移至正中

7、央，使油鏡頭浸沒在油中，剛好貼近載玻片。用中央，使油鏡頭浸沒在油中，剛好貼近載玻片。用細調細調節器節器微微向上調。微微向上調。3. 3. 油鏡觀察完畢，用擦鏡紙將鏡頭上的油擦凈，另用蘸少油鏡觀察完畢，用擦鏡紙將鏡頭上的油擦凈，另用蘸少許二甲苯的擦鏡紙擦鏡頭，最后再用擦鏡紙擦干凈。許二甲苯的擦鏡紙擦鏡頭，最后再用擦鏡紙擦干凈。實實 驗驗 材材 料料u顯微鏡、擦鏡紙、香柏油、二甲苯顯微鏡、擦鏡紙、香柏油、二甲苯u各種形態細菌、細菌鞭毛、莢膜、放線各種形態細菌、細菌鞭毛、莢膜、放線菌和藻類的示范片。菌和藻類的示范片。實驗程序實驗程序（顯微鏡的使用）（顯微鏡的使用）u主要是油鏡的使用主要是油鏡的使用

8、1.用前檢查：零件是否齊全，鏡頭是否清潔。用前檢查：零件是否齊全，鏡頭是否清潔。 2.調節光亮度調節光亮度 3.低倍鏡觀察：粗調、細調低倍鏡觀察：粗調、細調 4.依次再進行中倍、高倍觀察依次再進行中倍、高倍觀察 5.油鏡觀察：高倍鏡下找到清晰的物象后，在標本中油鏡觀察：高倍鏡下找到清晰的物象后，在標本中央滴一滴香柏油，使油鏡鏡頭浸入香柏油中，細調至央滴一滴香柏油，使油鏡鏡頭浸入香柏油中，細調至看清物象為止。看清物象為止。 6.換片：換片：另換新片，必須從第三條開始操作另換新片，必須從第三條開始操作。 7.用后復原：觀察完畢，上懸鏡筒，先用擦鏡紙擦去用后復原：觀察完畢，上懸鏡筒，先用擦鏡紙擦去鏡

9、頭上的油，然后再用擦鏡紙沾取少量二甲苯擦去殘鏡頭上的油，然后再用擦鏡紙沾取少量二甲苯擦去殘留的油，最后用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯，后將鏡體留的油，最后用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯，后將鏡體全部復原。全部復原。實驗程序實驗程序（個體形態觀察）（個體形態觀察）u嚴格按光學顯微鏡的操作方法，依低倍、高倍嚴格按光學顯微鏡的操作方法，依低倍、高倍及油鏡的次序逐個觀察各種形態的細菌示范片，及油鏡的次序逐個觀察各種形態的細菌示范片，并繪出其形態圖。并繪出其形態圖。u同法逐個觀察大腸桿菌的示范片，并繪出其形同法逐個觀察大腸桿菌的示范片，并繪出其形態圖。態圖。u同法逐個觀察金黃色葡萄球菌的示范片，并繪同法逐個觀察金黃

10、色葡萄球菌的示范片，并繪出其形態圖。出其形態圖。實驗程序實驗程序 （顯微鏡的保養）（顯微鏡的保養）u顯微鏡保養和使用中的注意事項：顯微鏡保養和使用中的注意事項： 1.不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件, ,以免損壞。以免損壞。 2.鏡面只能用鏡面只能用擦鏡紙擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度。光潔度。 3.觀察標本時，必須觀察標本時，必須依次用低、中、高倍鏡依次用低、中、高倍鏡，最后用，最后用油鏡。當目視目鏡時，特別在使用油鏡時，油鏡。當目視目鏡時，特別在使用油鏡時，切不可使切不可使用粗調節器用粗調節器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。，以免壓碎玻片或損傷鏡面。實驗程序實驗程序 （顯微鏡的保養）（顯微鏡的保養）u顯微鏡保養和使用中的注意事項：顯微鏡保養和使用中的注意事項： 4.觀察時，兩眼睜開，養成兩眼能夠輪換觀察的習慣，觀察時，兩眼睜開，養成兩眼能夠輪換觀察的習慣，以免眼睛疲勞，并且能夠在左眼觀察時，右眼注視