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文檔簡介
1、第二章第二章核酸的化學核酸的化學 核酸是一類重要的生物大分子,擔負著生命信息的儲存與傳遞。 核酸是現代生物化學、分子生物學的重要研究領域,是基因工程操作的核心分子。中心法則中心法則 19581958年年crickcrick將生物遺傳信息的傳遞將生物遺傳信息的傳遞方式稱為中心法則。方式稱為中心法則。 一、核酸的分子組成 核酸完全水解產生嘌呤和嘧啶等堿性物質、戊糖(核糖或脫氧核糖)和磷酸的混合物。核酸部分水解則產生核苷和核苷酸。每個核苷分子含一分子堿基和一分子戊糖,一分子核苷酸部分水解后除產生核苷外,還有一分子磷酸。(一)含氮堿(一)含氮堿 嘌呤堿 腺嘌呤 鳥嘌呤nnnnhnnnnhnh2nnnn
2、honh2nnnnhonh2 嘧啶嘧啶 尿嘧啶 胞嘧啶 胸腺嘧啶nn4561 123onhonhnh2onnhonhonhonhonhnh2onnhonhonh(二)、戊糖 組成核酸的戊糖有兩種。dna所含的糖為-d-2-脫氧核糖; rna所含的糖則為-d-核糖。 ) 磷酸是核酸的組成成分之一,在每個核苷酸中含有一個磷酸基。 ohhohhohohhhoch2hoch2ohhohhhohhd-核糖d-2-脫氧核糖 二、核酸的基本單位核苷酸(一)、核苷 核苷 戊糖+堿基 糖與堿基之間的c-n鍵,稱為c-n糖苷鍵(oh)(oh)胞嘧啶核苷尿嘧啶核苷鳥嘌呤核苷腺嘌呤核苷nnohhonnnh2honno
3、hh2nnnnnnnnh2ohhohhohhhoch2hoch2ohhohhohhohhohhohhhoch2ohhohhohhhoch2oh假尿苷()次黃苷(肌苷)i黃嘌呤核苷 x二氫尿嘧啶核苷 d取代核苷的表示方式:7-甲基鳥苷 m5g 四、核苷酸四、核苷酸(nucleotide)核苷酸: 核苷+磷酸 戊糖+堿基+磷酸hhhhhhh hh 三、細胞內的重要游離核苷酸三、細胞內的重要游離核苷酸 (一)多磷酸核苷酸(一)多磷酸核苷酸 o-poo-nnnnnh2ohhohhohhoch2o-poo-o-poo-三磷酸腺苷 (atp)ampadpatp(二)環化核苷酸campcgmp 核酸分子中核
4、苷酸的連接為一個核苷酸戊糖3碳上的羥基與下一個核苷酸戊糖5碳上的磷酸脫水縮合成酯鍵,此鍵稱3,5磷酸二酯鍵。許多核苷酸通過該酯鍵連接成長的多核苷酸鏈,即核酸。任務二任務二 核酸的分子結構核酸的分子結構5533磷酸二酯鍵的形成磷酸二酯鍵的形成 核酸的多核苷酸的結構核酸的多核苷酸的結構 (一)(一)dna的一級結構的一級結構 脫氧核糖核酸的排列順序可以用堿基排列順序表 示。連接鍵:3,5-磷酸二酯鍵,磷酸與戊糖順序相 連形成主鏈骨架,堿基形成側鏈。 dna的堿基順序本身就是遺傳信息存儲的分子形式。生物界物種的多樣性即寓于dna分子中四種核苷酸千變萬化的不同排列組合之中。 基因是一段有功能的dna片
5、段,生物細胞中dna分子的最小功能單位(交換單位) 5-磷酸端(常用5-p表示);3-羥基端(常用3-oh表示),多聚核苷酸鏈具有方向性u53oh t53u dna rna dna rna 5pdapdcpdgpdtoh 3或5acgtgcgt 3acgtgcgtacgtgcgt5papcpgpuoh 35acguaugu 3acguauguacguauguoh oh (二)dna的二級結構 在dna分子中,嘌呤堿基的總數與嘧啶堿基的總數相等1dna的雙螺旋結構特點:如右圖 2雙螺旋穩定的力 氫鍵 堿基堆積力 離子鍵等 3dna二級結構的生物學意義 是dna復制、rna轉錄和方向轉錄的分子基礎
6、,關系到生物遺傳信息的傳遞與表達。 (三)dna的三級結構 dna雙螺旋的進一步扭曲構成三級結構 真核 雙鏈線性dna(dsdna) 三、三、rna的分子結構的分子結構(一)分類(一)分類 1mrna 2trna 3rrna(二)(二)rna堿基組成堿基組成 1a、g、c、u ,稀有堿基較多,穩定性較差,易水解 2多為單鏈結構,少數局部形成螺旋 3分子較小 (三)(三)rna的二級結構的二級結構 生物體內大多數rna分子是單鏈線狀分子,但是單鏈rna分子可以自身回折,使某些含有互補堿基的區段,發生堿基配對形成雙螺旋區;而不能配對的堿基被擠出去,形成突環,即rna的二級結構。 二、二、trnat
7、rnau占占rnarna總量的總量的1515u一種氨基酸對應最少一種一種氨基酸對應最少一種rnarna u分子量分子量2500025000左右,大約由左右,大約由70709090個核苷酸組成,沉降系個核苷酸組成,沉降系數為數為4s4s左右。左右。u分子中含有較多的修飾成分。分子中含有較多的修飾成分。u3-3-末端都具有末端都具有cpcpaohcpcpaoh的結的結構構trna的三級結構的三級結構任務三任務三 核酸的理化性質核酸的理化性質一、一、核酸的一般性質核酸的一般性質兩性解離 ,一般呈酸性(在中性溶液中帶負電荷),微 溶于水,不溶于有機溶劑。u 線性大分子(粘度高。抗剪切力差)u 可用電泳
8、或離子交換(色譜)進行分離u 室溫條件下,dna在堿中變性,但不水解,rna水解二、顏色反應二、顏色反應三、紫外吸收三、紫外吸收 四、核酸的變性、復性和雜交四、核酸的變性、復性和雜交(一)變性(一)變性n變性:穩定核酸雙螺旋次級鍵斷裂,變性:穩定核酸雙螺旋次級鍵斷裂, 空間結構破壞,變成單鏈結構的過程。空間結構破壞,變成單鏈結構的過程。n變性表征:變性表征: 生物活性部分喪失、粘度下降、生物活性部分喪失、粘度下降、 浮力密度升高、紫外吸收增加浮力密度升高、紫外吸收增加 (增色效應)(增色效應)n變性因素:變性因素: phph(11.311.3或或5.05.0) 變性劑(脲、甲酰胺、甲醛)變性劑(脲、甲酰胺、甲醛) 低離子強度、加熱低離子強度、加熱(二)核酸的復性 變性核酸的互補鏈在適當的條件下,重新締合成為雙螺旋結
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