1、 第六章第六章 微生物生長繁殖與遺傳變異微生物生長繁殖與遺傳變異 重點內容提示重點內容提示： 細菌等單細胞微生物的生長繁殖規律，在廢水細菌等單細胞微生物的生長繁殖規律，在廢水處理等實際應用中的指導意義。處理等實際應用中的指導意義。 細菌等微生物遺傳變異的原理，利用微生物的細菌等微生物遺傳變異的原理，利用微生物的變異性改變微生物菌種性能的途徑與方法。變異性改變微生物菌種性能的途徑與方法。1 幾個概念幾個概念 生長：個體增大，生長：個體增大，細胞組分與結構在量方面細胞組分與結構在量方面 的增加的增加 ； 繁殖：個體數量增多。繁殖：個體數量增多。 單細胞生物與多細胞生物生長與繁殖的差異？單細胞生物與

2、多細胞生物生長與繁殖的差異？ 單細胞單細胞由于細胞分裂引起個體數目的增加；由于細胞分裂引起個體數目的增加； 多細胞多細胞通過無性或有性孢子使個體數目增加的過程。通過無性或有性孢子使個體數目增加的過程。 幼齡菌：指代謝速度快，生長繁殖旺盛的菌體。幼齡菌：指代謝速度快，生長繁殖旺盛的菌體。 （對數生長期）（對數生長期）老齡菌：指代謝緩慢，生長繁殖能力低下的菌體。老齡菌：指代謝緩慢，生長繁殖能力低下的菌體。 （衰老期）（衰老期） 顯微鏡直接計數顯微鏡直接計數計數器計數計數器計數比例計數法比例計數法 間接法間接法 平板菌落計數法（活菌計數法）平板菌落計數法（活菌計數法） 液體計數法（統計學原理）液體計

3、數法（統計學原理） 重量法重量法細胞重量法：濕重與干重細胞重量法：濕重與干重細胞含氮量細胞含氮量 dna含量含量 試比較各方法優缺點，適用范圍？試比較各方法優缺點，適用范圍？ 微生物生長繁殖的測定方法微生物生長繁殖的測定方法比濁法比濁法(懸浮細胞濃度懸浮細胞濃度)比例計數法比例計數法 已知已知霉菌孢子霉菌孢子密度為密度為8108個個/ml，根據顯微鏡視野中比例根據顯微鏡視野中比例細菌細菌密度為密度為1108個個/ml 優點：測定過程快速；優點：測定過程快速； 缺點：不能區分微生物的死活，且缺點：不能區分微生物的死活，且不太精確。不太精確。 不適用于絲狀菌體不適用于絲狀菌體在計數區滴加菌液，蓋上

4、特制蓋玻片，利用毛細作用讓菌液充滿計數區細菌計數區面積為1mm2，劃分為25個大方格，每個大方格又分為16個小格，計數區的深度為0.02mm。則每個大方格的體積是1/1250000ml，（1/25mm20.02mm）。計數時使用油鏡，一般數5個大方格的菌數后計算每個大方格的平均菌數。如圖所示，大方格中有14個細菌用每個大方格的平均菌數1250000，即為每ml菌液含菌數。peteroff-hausserpeteroff-hausser計菌器計數法計菌器計數法優點：直觀、快速、操作簡單；優點：直觀、快速、操作簡單；缺點：不能區分微生物的死活，不能計數運動強的活菌。缺點：不能區分微生物的死活，不能

5、計數運動強的活菌。不適用于絲狀菌體。不適用于絲狀菌體。 。 菌落形成單位（colony-forming unit， cfu）平平板板菌菌落落計計數數法法 優點：活菌計數，不含死的微生物細胞；優點：活菌計數，不含死的微生物細胞；缺點：測定所需時間長，操作繁瑣，要求技術熟練。缺點：測定所需時間長，操作繁瑣，要求技術熟練。不適用于嚴格厭氧菌的培養。不適用于嚴格厭氧菌的培養。快速計數濾紙片快速計數濾紙片ttcttc（氯化三苯基四氮唑，無色）（氯化三苯基四氮唑，無色）tftf（三苯基甲臜，紅色）（三苯基甲臜，紅色）濾膜法濾膜法優點：活菌計數，不含死的微生物細胞；優點：活菌計數，不含死的微生物細胞；缺點：

6、測定所需時間長，要求樣品中不含有過多的懸浮性固體。缺點：測定所需時間長，要求樣品中不含有過多的懸浮性固體。適用于微生物含量比較低的樣品測定。適用于微生物含量比較低的樣品測定。液體稀釋法（液體稀釋法（mpnmpn法）法）以培養液培以培養液培養，記錄長養，記錄長菌的管數菌的管數總計：總計：5551ml1ml1ml 陽性：531最大可能數量表（最大可能數量表（most probable numbermost probable number， mpn mpn ）主要用于不能在平板培養基上形成菌落的微生物。主要用于不能在平板培養基上形成菌落的微生物。比濁法（比濁法（turbidity measureme

7、ntturbidity measurement）單細胞微生物生長繁殖規律單細胞微生物生長繁殖規律 生長曲線（生長曲線（growth curvegrowth curve）如何獲得？）如何獲得？ 根據測定生物量的方法不同，生長曲線分有：根據測定生物量的方法不同，生長曲線分有： 重量法、數量法、濃度法等。重量法、數量法、濃度法等。生長率生長率上升階段上升階段生長率生長率下降階段下降階段內源呼吸階段內源呼吸階段時間時間細胞重量細胞重量生長率上升階段生長率上升階段：細胞適應環境后快速生長繁殖的階段，細胞適應環境后快速生長繁殖的階段， 增代時間最短。增代時間最短。 細胞重量迅速增加。細胞重量迅速增加。生長

8、率下降階段生長率下降階段：指生長繁殖速率下降（減緩）的階段。：指生長繁殖速率下降（減緩）的階段。內源呼吸階段：內源呼吸階段：利用細胞內物質維持生命，細胞重量減利用細胞內物質維持生命，細胞重量減 少。細胞代謝緩慢，趨向衰老死亡。少。細胞代謝緩慢，趨向衰老死亡。 細胞數量法細胞數量法（緩慢、對數、穩定和衰亡期）（緩慢、對數、穩定和衰亡期）遲緩期衰亡期穩定期對數期總菌數 活菌數 試分析細胞數量法曲線各階段的特點：試分析細胞數量法曲線各階段的特點： 緩慢期（適應期）緩慢期（適應期）: :細胞不繁殖。但酶活躍，細胞不繁殖。但酶活躍，細胞物細胞物質增多，質增多，為繁殖作準備。為繁殖作準備。產生遲緩期的原因

9、，是微生物產生遲緩期的原因，是微生物接種到一個新的環境，暫時缺乏足夠的能量和必需的生接種到一個新的環境，暫時缺乏足夠的能量和必需的生長因子，長因子，“種子種子”老化老化 ( 即處于非對數生長期即處于非對數生長期 ) 或未充或未充分活化，接種時造成的損傷等。分活化，接種時造成的損傷等。 影響因素影響因素:菌種特性菌種特性接種齡接種齡接種量接種量培養基成分培養基成分 對數生長期對數生長期:所有細胞的生長繁殖速率所有細胞的生長繁殖速率以幾何級數以幾何級數（2n）的方式分裂，生長速率最快，）的方式分裂，生長速率最快，世代時間世代時間g或或倍增時間最短，倍增時間最短，細菌內各成分按比例有規律地增加，細菌

10、內各成分按比例有規律地增加，細菌的代謝活性、酶活性高而穩定，生活力強。細菌的代謝活性、酶活性高而穩定，生活力強。 關于關于g （世代時間）：（世代時間）： x2=x12n0120)lg(lg322. 3ttxxttnrnttrg01式中：式中：n為繁殖代數為繁殖代數; r為生長速率常數；為生長速率常數；影響因素：影響因素：菌種特性菌種特性營養成分營養成分營養物濃度營養物濃度培養溫度培養溫度 培養溫度的影響培養溫度的影響穩定期：穩定期：菌體產量達到最高點，菌體產量達到最高點，新增長細胞數與死亡新增長細胞數與死亡細胞量基本相等細胞量基本相等（r=0).r=0).由于營養物質消耗，代謝產物積累和由于

11、營養物質消耗，代謝產物積累和 ph 等環境變化，逐步不適宜于細菌生長，導致生長速率降低直至等環境變化，逐步不適宜于細菌生長，導致生長速率降低直至零零 ，結束對數生長期，進入穩定生長期。，結束對數生長期，進入穩定生長期。 衰亡期：衰亡期：死細胞多于活細胞，死細胞多于活細胞，內源呼吸內源呼吸階段。階段。營養物質耗盡和有毒代謝產物的大量積累，細菌死亡速率逐步增加營養物質耗盡和有毒代謝產物的大量積累，細菌死亡速率逐步增加和活細菌逐步減少和活細菌逐步減少. 曲線在實踐中指導意義曲線在實踐中指導意義 如如菌種保藏（乳酸桿菌、解酚細菌等）菌種保藏（乳酸桿菌、解酚細菌等） 發酵工業菌擴培及發酵接種發酵工業菌擴

12、培及發酵接種 收獲微生物細胞及發酵產品收獲微生物細胞及發酵產品 廢水處理廢水處理 單細胞微生物在這些應用實踐中宜采用哪單細胞微生物在這些應用實踐中宜采用哪一階段的生理菌？一階段的生理菌？ 生長階段與污水生物處理生長階段與污水生物處理指數期（生長率上升階段）指數期（生長率上升階段） 優點：細菌代謝速度最快，凈化有機物的效率最高。優點：細菌代謝速度最快，凈化有機物的效率最高。 缺點：菌體不易凝聚沉淀；缺點：菌體不易凝聚沉淀； 凈化后有機物濃度不能達到凈化后有機物濃度不能達到 排放標準；排放標準； 微生物污泥量大。微生物污泥量大。 穩定期（生長率下降階段穩定期（生長率下降階段 ） 優點：菌體沉降性能

13、較好，處理有機物較為徹底。優點：菌體沉降性能較好，處理有機物較為徹底。 缺點：污泥量較大。缺點：污泥量較大。 衰亡期（內源呼吸階段）衰亡期（內源呼吸階段） 優點：有機物完全氧化，細胞沉降性能與出水水質好，污優點：有機物完全氧化，細胞沉降性能與出水水質好，污泥量小。缺點；凈化效率慢，有機物質濃度低。泥量小。缺點；凈化效率慢，有機物質濃度低。 連續培養連續培養也稱開放培養（也稱開放培養（open cultureopen culture） 具體操作：細胞培養對數期后，以一定速具體操作：細胞培養對數期后，以一定速率流入新鮮培養基，并利用溢流方式以同樣率流入新鮮培養基，并利用溢流方式以同樣流速流出培養物

14、。流速流出培養物。容器內培養物達到動態平容器內培養物達到動態平衡，微生物生長維持在某一對數生長期的生衡，微生物生長維持在某一對數生長期的生長速率長速率。 恒濁器（培養液流速不穩定）恒濁器（培養液流速不穩定） 恒濁器中菌體密度較穩定，菌體以最高生長速率生長恒濁器中菌體密度較穩定，菌體以最高生長速率生長。應。應用上：獲得大量菌體生長相平衡的代謝產物（如乳酸、乙醇用上：獲得大量菌體生長相平衡的代謝產物（如乳酸、乙醇等）都可以用恒濁器進行連續發酵。等）都可以用恒濁器進行連續發酵。恒化器（培養液流速不變）恒化器（培養液流速不變） 微生物在低于最高生長速率的條件下生長繁殖微生物在低于最高生長速率的條件下生

15、長繁殖， 應用上：主要用于科學研究工作，如限定底物濃度應用上：主要用于科學研究工作，如限定底物濃度研究微生物的生長速率等。研究微生物的生長速率等。 連續培養的優點：連續培養的優點：高效高效節約了大量動力、人力、水和蒸節約了大量動力、人力、水和蒸汽汽自控自控產品質量較穩定產品質量較穩定連續培養的缺點：連續培養的缺點：菌種易于退化菌種易于退化易遭雜菌污染易遭雜菌污染營養物的利用率低營養物的利用率低2. 2. 微生物的遺傳變異微生物的遺傳變異 遺傳變異概念與特性遺傳變異概念與特性 正變正變：優良性狀提高：優良性狀提高. .如生產菌發酵周期縮短，產量如生產菌發酵周期縮短，產量提高；菌種降解物質能力增強

16、等。提高；菌種降解物質能力增強等。 負變負變：應用功能下降應用功能下降. .如生產菌發酵力退化，病原菌如生產菌發酵力退化，病原菌致病性增強，菌種降解物質能力下降。致病性增強，菌種降解物質能力下降。 變異株易發現：變異株易發現：從形態、細胞結構（芽孢、莢膜等）從形態、細胞結構（芽孢、莢膜等）以及生理代謝特性等方面辨別與判斷。以及生理代謝特性等方面辨別與判斷。 微生物遺傳保守程度：其大小由不同菌種決定。微生物遺傳保守程度：其大小由不同菌種決定。 細菌等微生物遺傳的物質基礎細菌等微生物遺傳的物質基礎 遺傳物質確定過程：遺傳物質確定過程：19281928年，英國細菌學家格里年，英國細菌學家格里菲斯（菲

17、斯（griffthgriffth）研究兩種肺炎雙球菌型的毒性）研究兩種肺炎雙球菌型的毒性。 1928年，年，griffith進行了以下幾組實驗：進行了以下幾組實驗：（1）動物實驗）動物實驗對小鼠注射活對小鼠注射活rii菌或死菌或死siii菌菌 小鼠存活小鼠存活對小鼠注射活對小鼠注射活siii菌菌小鼠死亡小鼠死亡對小鼠注射活對小鼠注射活rii菌和熱死菌和熱死siii菌菌 小鼠死亡小鼠死亡抽取心血抽取心血 分離分離活的活的siii菌菌研究對象：研究對象：streptococcus pneumoniae（肺炎雙球菌）（肺炎雙球菌） siii型菌株：有莢膜，菌落表面光滑，有致病性型菌株：有莢膜，菌落表

18、面光滑，有致病性 rii型菌株：無莢膜，菌落表面粗糙，無致病性型菌株：無莢膜，菌落表面粗糙，無致病性（一）經典轉化實驗（transformation）：f.griffithgriffith轉化試驗示意混合培養混合培養rii型活菌型活菌siii型活菌型活菌siii型熱死菌型熱死菌rii型活菌型活菌siii型活菌型活菌健康健康健康健康健康健康健康健康健康健康健康健康健康健康病死病死病死病死病死病死（2）細菌培養實驗（3 3）s s型菌的無細胞抽提液試驗型菌的無細胞抽提液試驗以上實驗說明：加熱殺死的以上實驗說明：加熱殺死的s siiiiii型細菌細胞內可型細菌細胞內可能存在一種轉化物質，它能通過某種

19、方式進入能存在一種轉化物質，它能通過某種方式進入r riiii型型細胞并使細胞并使r riiii型細胞獲得穩定的遺傳性狀，轉變為型細胞獲得穩定的遺傳性狀，轉變為s siiiiii型細胞。型細胞。熱死熱死s siiiiii菌菌不生長不生長活活 r rii ii 菌菌長出長出r riiii菌菌熱死熱死s siiiiii菌菌長出大量長出大量r riiii菌和菌和1010-6-6s siiiiii菌菌活活r r菌菌+s+s菌無細胞抽提液菌無細胞抽提液長出大量長出大量r r菌和菌和少量少量s s菌菌+活活rii菌菌平皿培養平皿培養 19441944年，年，o.t.avery(o.t.avery(埃弗里埃

20、弗里) )等從熱死的等從熱死的s s型肺炎雙球菌中提純了各種成分（型肺炎雙球菌中提純了各種成分（dna,dna,蛋白蛋白質，莢膜多糖等），并在離體條件下分別實驗。質，莢膜多糖等），并在離體條件下分別實驗。 結果發現結果發現s s型肺炎雙球菌的型肺炎雙球菌的dnadna具有使具有使r r型型細胞產生毒性、小白鼠死亡的能力。細胞產生毒性、小白鼠死亡的能力。 dna dna組成與構成組成與構成 胸腺嘧啶胸腺嘧啶thyminenhnhoo 核酸成分：核酸成分：堿基堿基 ( (嘧啶、嘌呤），戊糖，磷酸。嘧啶、嘌呤），戊糖，磷酸。 胞嘧啶胞嘧啶cytosinennhnh2o 尿嘧啶尿嘧啶uracil（存在

21、于（存在于rna中）中）nhnhoo鳥嘌呤鳥嘌呤guaninennnhnnh2nhnnhnonh2nnnhnnh2 腺嘌呤腺嘌呤adeninennnhnnh2 兩種戊糖兩種戊糖: dna: dna所含的糖為所含的糖為-d-2-d-2-脫氧核糖；脫氧核糖；rnarna所含的糖為所含的糖為-d-d-核糖。核糖。ohhohhohohhhoch2hoch2ohhohhhohhd-核糖d-2-脫氧核糖糖與堿基之間的糖與堿基之間的c-nc-n鍵，稱為鍵，稱為c-nc-n糖苷鍵糖苷鍵。胞嘧啶核苷尿嘧啶核苷鳥嘌呤核苷腺嘌呤核苷nnohhonnnh2honnohh2nnnnnnnnh2ohhohhohhhoch

22、2hoch2ohhohhohhohhohhohhhoch2ohhohhohhhoch2 核苷酸是核苷的磷酸酯。作為核苷酸是核苷的磷酸酯。作為dnadna或或rnarna結構單元結構單元的核苷酸分別是的核苷酸分別是5-5-磷酸磷酸- -脫氧核糖核苷和脫氧核糖核苷和5-5-磷酸磷酸- -核糖核苷。核糖核苷。obohohoh2cpohhoob=腺嘌呤，鳥嘌呤，胞嘧啶，尿嘧啶或胸腺密啶核糖核苷酸 oh2cpohhoooboh脫氧核糖核苷酸 19531953年，年，dnadna的結構通過的結構通過x x射線觀察，確射線觀察，確定是兩條走向相反的多核苷酸鏈構成的雙螺旋定是兩條走向相反的多核苷酸鏈構成的雙螺

23、旋結構。在這種結構中，結構。在這種結構中，a-t a-t 、g-cg-c之間以氫鍵等之間以氫鍵等方式連接。方式連接。 微生物細胞中的核酸微生物細胞中的核酸 多數雙鏈多數雙鏈dna dna ，少數單鏈，少數單鏈dnadna。少數病毒遺傳。少數病毒遺傳物質為物質為rnarna。 原核微生物除細胞核區外，在細胞質中還存在原核微生物除細胞核區外，在細胞質中還存在攜帶少量基因的環狀攜帶少量基因的環狀dnadna片段（質粒）。片段（質粒）。 真核微生物的細胞核是真核微生物的細胞核是dnadna與蛋白質結合與蛋白質結合 ，存，存在于細胞核的染色體上。在于細胞核的染色體上。 核糖核酸（核糖核酸（rnarna）

24、 rnarna分子量比分子量比dnadna小，主要負責小，主要負責dnadna遺傳信息的遺傳信息的 傳遞與翻譯表達等。傳遞與翻譯表達等。 rnarna為單鏈分子，根據為單鏈分子，根據rnarna的功能，可以分為的功能，可以分為mrnamrna、trnatrna和和rrnarrna三種。三種。mrna (mrna (信使信使rna) rna) messenger rnamessenger rna mrnamrna約占總約占總rnarna的的5%5%，不同細胞，不同細胞mrnamrna鏈長和分子量差異大鏈長和分子量差異大 功能：將功能：將dnadna的遺傳信息傳遞到蛋白質合成基地的遺傳信息傳遞到蛋

25、白質合成基地 核核 糖核蛋白體上。糖核蛋白體上。 如如dnadna一條鏈上的堿基：一條鏈上的堿基：a t g c g t t c c a c a t g c g t t c c a c 轉錄成轉錄成mrnamrna的堿基：的堿基： u a c g c a a g g u gu a c g c a a g g u g 遺傳密碼遺傳密碼:mrna:mrna分子上三個堿基（三聯密碼）決定一個分子上三個堿基（三聯密碼）決定一個 氨基酸。氨基酸。trna (trna (轉移轉移rna)rna) 約占總約占總rnarna的的10-15%10-15%。 它在蛋白質生物合成中識別氨基酸的密碼，并將相它在蛋白質

26、生物合成中識別氨基酸的密碼，并將相應的氨基酸轉運到核糖核蛋白體上。應的氨基酸轉運到核糖核蛋白體上。 rrna (rrna (核糖體核糖體rna)rna) 約占全部約占全部rnarna的的80%80%，是核糖核蛋白體的主要組成部，是核糖核蛋白體的主要組成部分。分。 rrna rrna 的功能是與蛋白質生物合成相關。的功能是與蛋白質生物合成相關。基因與性狀基因與性狀基因：基因：dnadna分子上代表一個遺傳功能的片斷。分子上代表一個遺傳功能的片斷。結構基因：決定蛋白質結構的結構基因：決定蛋白質結構的dnadna片斷。片斷。調節基因：控制結構基因活動的調節基因：控制結構基因活動的dnadna片斷。片

27、斷。操縱基因操縱基因：與結構基因一起，起：與結構基因一起，起“開關開關”作用。作用。 laczlacylaca 性狀：表觀現象性狀：表觀現象 生物合成蛋白質，生物合成蛋白質， 以以dnadna為模板轉錄成為模板轉錄成mrnamrna，后后trnatrna根據根據mrnamrna三聯體密碼的信號將氨基酸進行運三聯體密碼的信號將氨基酸進行運送，在核糖體上完成蛋白質的合成。送，在核糖體上完成蛋白質的合成。微生物變異主要是由微生物變異主要是由基因突變基因突變和和基因重組基因重組造成的。造成的。基因突變包含了基因突變包含了自發突變自發突變和和誘發突變誘發突變兩類。兩類。自發突變自發突變: :微生物自發突

28、變頻率為微生物自發突變頻率為1010-4-41010-6-6。 誘發突變誘發突變: :用物理、化學因素使微生物遺傳信息改用物理、化學因素使微生物遺傳信息改變，從而得到新的表觀現象。變，從而得到新的表觀現象。常用的誘變劑：紫外線、常用的誘變劑：紫外線、x-x-射線等，亞硝酸、硫射線等，亞硝酸、硫酸二乙酯、過氧化氫等化學試劑。酸二乙酯、過氧化氫等化學試劑。 細菌等微生物的變異細菌等微生物的變異 點突變點突變 堿基置換（轉換、顛換）堿基置換（轉換、顛換）移碼突變 dna分子中缺失或增加少數幾個堿基對而引起分子中缺失或增加少數幾個堿基對而引起造成突變點以后全部遺傳密碼轉錄與轉釋發生錯誤造成突變點以后全

29、部遺傳密碼轉錄與轉釋發生錯誤增添一個堿基增添一個堿基abc abcabcabcabcabcabcabcab+abc abccba cba cba cba cbaabc bca bca bcabcabcabcabca缺少一個堿基缺少一個堿基 基因重組（基因重組（gene recombinationgene recombination）基因重組（或遺傳重組）：基因重組（或遺傳重組）：兩個不同性狀的個體兩個不同性狀的個體（供體、受體）內的遺傳基因轉移到一起，經過（供體、受體）內的遺傳基因轉移到一起，經過遺傳分子間的重新組合，形成新遺傳型個體的方遺傳分子間的重新組合，形成新遺傳型個體的方式。式。原核微

30、生物的基因重組：原核微生物的基因重組：轉化、轉導、接合、原轉化、轉導、接合、原生質體融合等。生質體融合等。真核微生物的基因重組：真核微生物的基因重組：有性雜交、準性雜交、有性雜交、準性雜交、轉化、原生質體融合等。轉化、原生質體融合等。 幾個基本概念幾個基本概念。轉化（轉化（transformationtransformation）轉導（轉導（transduction）。 接合（接合（conjugation between conjugation between different bacteriadifferent bacteria）。 原生質體融合操作示意圖原生質體融合操作示意圖 去壁 a+

31、b- （高滲下） a+b- peg或電脈沖 離心促融 去壁 a-b+ （高滲下） a-b+ 融合子（aa, bb, ab）長成菌落 檢出a+ b+融合子 篩選優良性狀的融合子影印接種影印接種-基因工程及應用基因工程及應用什么是基因工程？什么是基因工程？例：固氮基因轉移到其他作物、蠶產絲蛋白基因例：固氮基因轉移到其他作物、蠶產絲蛋白基因引入細菌細胞；及人胰島素、動物生長激素基因引入細菌細胞；及人胰島素、動物生長激素基因工程菌等。工程菌等。環境工程中，降解石油的超級細菌（環境工程中，降解石油的超級細菌（7070年代，美年代，美國）；耐汞的質粒（日本、瑞典）與降解染料的國）；耐汞的質粒（日本、瑞典）與降解染料的質粒（質粒（19831983，瑞士）；以及具有降解多種污染物，瑞士）；以及具有降解多種污染物功能的超級工程菌種等。功能的超級工程菌種等。 .降解石油的工程細菌降解石油的工程細菌 7070年代美國生物學家年代美國生物學家(chakrabarty)(chakrabarty)針對海洋輸油