1、LOGO食品中有害物質(zhì)的測(cè)定食品中有害物質(zhì)的測(cè)定LOGO主要內(nèi)容主要內(nèi)容農(nóng)農(nóng) 藥藥1獸獸 藥藥2毒毒 素素3LOGO第一節(jié) 食品中農(nóng)藥殘留及其檢測(cè) 農(nóng)藥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的各種藥劑統(tǒng)稱，農(nóng)藥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的各種藥劑統(tǒng)稱，種類很多。種類很多。 我國(guó)農(nóng)藥生產(chǎn)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)：目前全世我國(guó)農(nóng)藥生產(chǎn)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)：目前全世界實(shí)際生產(chǎn)和使用的農(nóng)藥的品種為界實(shí)際生產(chǎn)和使用的農(nóng)藥的品種為500多種，多種，其中大量使用的有其中大量使用的有100種，主要是化學(xué)合成種，主要是化學(xué)合成生產(chǎn)的。生產(chǎn)的。LOGO 農(nóng)藥包括：殺蟲劑、殺菌劑、除草劑、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。 我國(guó)已由農(nóng)藥進(jìn)口國(guó)變成農(nóng)藥出口國(guó)。 我國(guó)現(xiàn)有主要農(nóng)藥合成

2、企業(yè)近400家，已建成700千噸以上原藥生產(chǎn)裝置，可常年生產(chǎn)250多種原藥、農(nóng)藥中產(chǎn)量居世界第二位（美國(guó)第一），農(nóng)藥產(chǎn)量呈逐年增長(zhǎng)的趨勢(shì)。LOGO 新品種與新工藝不斷出現(xiàn)。 常用的有：有機(jī)氯農(nóng)藥和有機(jī)磷農(nóng)藥兩類。 殺蟲劑有胺丙畏、苯胺硫磷等。 殺菌劑有腐霉利、乙霉威等。除草劑有丙草胺、麥草畏等。生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑有烯效唑、多效唑、油菜素內(nèi)酯等。生物農(nóng)藥發(fā)展迅速。LOGO1、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)不合理，個(gè)別品種老化 殺蟲劑 殺菌劑 除草劑我國(guó) 68.5% 10.4% 18.3%發(fā)達(dá)國(guó) 40% 20% 40% 農(nóng)藥加工劑型增多，主要有乳油、粉劑、粉粒劑、懸浮劑、水劑、片劑、煙劑等。 原料及中間體已經(jīng)滿足國(guó)內(nèi)需求。 存

3、在問題：LOGO2、農(nóng)藥加工落后，助劑研究滯后 我國(guó)原藥與制劑比例較低，目前為1:9但發(fā)達(dá)國(guó)家為1:10-30。3、生產(chǎn)規(guī)模小，工藝技術(shù)落后，產(chǎn)品質(zhì)量差 我國(guó)農(nóng)藥產(chǎn)量約占全球的25%但銷售額不足8%4、生物農(nóng)藥還應(yīng)大力發(fā)展。LOGO 農(nóng)藥在防治農(nóng)作物病蟲害、控制人類傳染病、提高農(nóng)畜產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量以及確保人體健康等方面，都起著重要的作用。但是，大量廣泛用農(nóng)藥也會(huì)造成對(duì)食物的污染。 農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥施用后，殘存在生物體、農(nóng)副產(chǎn)品和環(huán)境中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝產(chǎn)物、降解物和雜質(zhì)的總稱。殘留的數(shù)量叫殘留量。 LOGO農(nóng)藥進(jìn)入人體的方式土壤、水土壤、水 、空氣、空氣家禽、畜家禽、畜植物、飼料植物、飼

4、料水生動(dòng)、植物水生動(dòng)、植物肉、蛋、乳肉、蛋、乳人人LOGO 食品中普遍存在農(nóng)藥殘留, 殘留量隨食品種類及農(nóng)藥的種類不同而有很大差異，由于農(nóng)藥的毒性都很大，有的還可在人體內(nèi)蓄積，對(duì)人體造成危害。食品中殘留農(nóng)藥過高會(huì)導(dǎo)致癌癥和帕金森癥。 1994 年，我國(guó)農(nóng)藥中毒人數(shù)已超過10萬人，大部分是由于農(nóng)藥殘留而引起。LOGO容易吸收農(nóng)藥的蔬菜 番茄、茄子、圓辣椒、卷心菜、白菜及大多數(shù)根菜類、薯類。對(duì)農(nóng)藥吸收率較低的 葉菜類、果類等。LOGO 為提高食品的衛(wèi)生質(zhì)量，保證食品的安全性，保障消費(fèi)者身體健康，許多國(guó)家都對(duì)食品中農(nóng)藥允許殘留量作了規(guī)定。我國(guó)和WHO制訂了有機(jī)氯農(nóng)藥六六六、滴滴涕在食品中的允許殘留量

5、標(biāo)準(zhǔn)；有機(jī)磷農(nóng)藥在食品中允許殘留量標(biāo)準(zhǔn)； LOGO小資料：我國(guó)將全面禁用5種高毒農(nóng)藥包括：甲胺磷、久效磷、甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、磷胺。 這5種農(nóng)藥目前年總產(chǎn)量達(dá)10萬噸；占我國(guó)農(nóng)藥生產(chǎn)總量的2025%。禁用方案分3階段：第一階段第一階段(2004年年1月月1日日12月月31日日)： 撤消撤消5種高毒農(nóng)藥產(chǎn)品生產(chǎn)、銷售、使用的有種高毒農(nóng)藥產(chǎn)品生產(chǎn)、銷售、使用的有關(guān)證書，開始部分禁用，使用比例下降關(guān)證書，開始部分禁用，使用比例下降15。LOGO第二階段第二階段(2005年年1月月1日日2006年年12月月31日日)： 禁止禁止5種高毒農(nóng)藥原藥生產(chǎn)企業(yè)外的其他企種高毒農(nóng)藥原藥生產(chǎn)企業(yè)外的其他企業(yè)生產(chǎn)或

6、加工此類產(chǎn)品，并將其使用范圍局限于業(yè)生產(chǎn)或加工此類產(chǎn)品，并將其使用范圍局限于棉花、小麥、玉米、水稻棉花、小麥、玉米、水稻4種作物。種作物。第三階段第三階段(2007年年1月月1日日)：中國(guó)全面禁止中國(guó)全面禁止5種高毒農(nóng)藥的使用。種高毒農(nóng)藥的使用。農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法 實(shí)際上，最容易引起農(nóng)藥食物中毒的當(dāng)屬有機(jī)磷類殺蟲劑。 我國(guó)專家江希流曾對(duì)為數(shù)眾多的農(nóng)藥品種進(jìn)行過分級(jí)排隊(duì)，從中篩選出了十種強(qiáng)污染的農(nóng)藥，其中有七種為有機(jī)磷類，即敵百蟲、敵敵畏、樂果、氧化樂果、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、甲胺磷，其他三種為殺蟲雙、殺蟲瞇和除草醚。 氨基甲酸酯類農(nóng)藥毒作用機(jī)理與有機(jī)磷農(nóng)藥相似，主

7、要是抑制膽堿酯酶活性.二、有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法二、檢測(cè)原理 利用有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)動(dòng)物體內(nèi)乙酰膽堿酯酶（ AChE ）具有抑制作用的原理，在乙酰膽堿酯酶及其底物（乙酰膽堿）的共存體系中加入農(nóng)產(chǎn)品樣品提取液（樣品中含有水），如果樣品中不含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥，酶的活性就不被抑制，乙酰膽堿就會(huì)被酶水解，水解產(chǎn)物與加入的顯色劑反應(yīng)就會(huì)產(chǎn)生顏色；反之，如果試樣提取液中含有一定量的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥，酶的活性就被抑制，試樣中加入的底物就不能被酶水解，從而不顯色。農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法 水解水解加酶加酶顯色劑顯

8、色劑未水解未水解顯色劑顯色劑不顯色不顯色顯色顯色無農(nóng)藥無農(nóng)藥有農(nóng)藥有農(nóng)藥農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法三、酶的基質(zhì)和顯色反應(yīng)類型 1.酶的基質(zhì) 酶抑制劑顯色反應(yīng)可使用的基質(zhì)（底物）和顯色劑很多。 各種乙酰膽堿（ ACh ）、乙酰萘酯以及其他羧酸酯、乙酸羥基吲哚及其衍生物 考慮考慮：靈敏度，適用性，酶源、基質(zhì)、顯色劑獲得：靈敏度，適用性，酶源、基質(zhì)、顯色劑獲得難易難易農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法 1. 肉眼觀察法酶片法、試紙法、速測(cè)卡法基于反應(yīng)體系反應(yīng)前后明顯的顏色變化來觀察、判斷農(nóng)藥毒性高低的一種定性測(cè)量方法。一般選用靛酚乙酸酯（紅色）為底物。美國(guó)于

9、1985 年曾報(bào)道了一種稱為農(nóng)藥檢測(cè)器的酶片，可在田間快速檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，其靈敏度在 0.110mg / kg 范圍。 四、檢測(cè)方法農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法 速測(cè)卡法 華南農(nóng)大植保系和深圳天福貿(mào)易有限公司推出的“農(nóng)藥速測(cè)卡” 廣州進(jìn)出口食品檢驗(yàn)研究中心與廣州天河綠洲生物化學(xué)研究中心聯(lián)合研制生產(chǎn)的“農(nóng)藥檢測(cè)卡” 農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法速測(cè)卡以濾紙作載體，白紙片上載有乙酰膽堿酯酶和基質(zhì)，紅紙片載有顯色劑。 當(dāng)空白樣品加于白紙片上，在酶作用下，乙酰膽堿與水發(fā)生水解，水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色。當(dāng)含有有機(jī)磷和氨基甲酸醋類農(nóng)藥的樣品加

10、于白紙片上時(shí)，抑制了乙酰膽堿酯酶的活性，使這種酶不能被水解，從而無顯色反應(yīng)。農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法 白色藥片變成藍(lán)色，說明農(nóng)藥殘留無或在檢出限下； 白色藥片不變藍(lán)，說明含有超出檢出限的農(nóng)藥。農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法 農(nóng)藥速測(cè)卡對(duì)幾種常用農(nóng)藥的最低檢測(cè)限（單位mg/kg）如下： 甲胺磷 1.7 馬拉硫磷 2.0 水胺硫磷 3.1 對(duì)硫磷 1.7 久效磷 2.5 乙酰甲胺磷 3.5 敵敵畏 0.3 樂果 1.3 敵百蟲0.3 呋喃丹 0.5 西維因 2.5 好年冬 1.0 農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘

11、留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法（1）整體測(cè)定法 選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成 1平方厘米左右見方碎片，取 5g放入帶蓋瓶中，加入 10ml 純凈水或 0.1mol /L pH7.5 的磷酸緩沖液 水與菜葉的比例以 ( 1 : l ) ( l :2 ）為宜 ，震搖 50 次，靜置2min 以上。 取一片速測(cè)卡，用白色藥片蘸取提取液，放置 10min 以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，有條件時(shí)在 37 恒溫裝置中放置 10min 。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤(rùn)。 將速測(cè)卡對(duì)折，用手捏 3min 或用恒溫裝置恒溫 3min ，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。 每批測(cè)定應(yīng)設(shè)一個(gè)純凈水或緩沖液的空白對(duì)照卡

12、。農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法（2）表面測(cè)定法 擦去蔬菜表面泥土，滴 2 3 滴緩沖溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。 取一片速測(cè)卡，將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上 放置 10min 以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，有條件時(shí)在 37 恒溫裝置中放置 10min 。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤(rùn)。 將速測(cè)卡對(duì)折，用手捏 3min 或用恒溫裝置恒溫 3min ，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。 每批測(cè)定應(yīng)設(shè)一個(gè)洗脫液的空白對(duì)照卡。農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法 速測(cè)卡使用經(jīng)驗(yàn) : 由于菜葉含有大量的葉綠素，若菜葉剪得太碎，葉綠素顏色會(huì)對(duì)陰性反應(yīng)的藍(lán)色觀察有影響

13、，對(duì)農(nóng)藥速測(cè)卡的初次使用者易產(chǎn)生錯(cuò)誤的判斷。 可疑陽性試樣是根據(jù)顯色反應(yīng)的藍(lán)色比空白淺，比陽性深而判定的。藍(lán)色變淺程度存在差異，且有部分葉綠素的影響。農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法 農(nóng)藥速測(cè)卡使用的最佳 pH 值是 7.5 ，若樣液的 pH 值偏離太大，會(huì)產(chǎn)生錯(cuò)誤的結(jié)果。 應(yīng)用農(nóng)藥速測(cè)卡時(shí)，反應(yīng)的溫度和時(shí)間對(duì)顯色有影響，必須同時(shí)進(jìn)行空白對(duì)照。 農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法 試紙法（速測(cè)卡法）操作簡(jiǎn)單、成本低，但對(duì)于深顏色樣品的檢測(cè)， 實(shí)驗(yàn)誤差較大，而植物酶片用于植物樣品檢測(cè)時(shí)也存在基體干擾問題，操作者人為因素較大，靈敏度較低，只能勉強(qiáng)算是一種定性方法。

14、 農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法2.定量測(cè)定（1）原理樣品中有機(jī)磷類農(nóng)藥經(jīng)乙腈提取，提取溶液經(jīng)凈化、濃縮后，用雙塔自動(dòng)進(jìn)樣器同時(shí)注入氣相色譜的兩個(gè)進(jìn)樣口，樣品中組分經(jīng)不同極性的兩根毛細(xì)管柱分離，火焰光度檢測(cè)器(FPD)檢測(cè)。當(dāng)含有機(jī)磷樣品于檢測(cè)器中的富氫火焰上燃燒時(shí)，以HPO碎片的形式，放射出波長(zhǎng)為526mn的特征光，這種光通過濾片選擇后，由光電倍增管接收，轉(zhuǎn)換成電信號(hào)，經(jīng)微電流放大器放大后，由記錄儀記錄下色譜峰。通過比較樣品的峰高和標(biāo)準(zhǔn)品的峰高，計(jì)算出樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法（2）儀器和試劑儀器。旋渦混合器、勻漿機(jī)、氮吹儀、氣相色譜儀試劑。方法所用試劑，凡未指明規(guī)格者，均為分析純；水為蒸餾水。乙腈。丙酮，重蒸。氯化鈉，140烘烤4h。濾膜，0.2m。鋁箔。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品。農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法（3）操作步驟1.農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液配制農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液配制單一農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取一定量某農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，用丙酮稀釋，逐一配制成26種農(nóng)藥1 000mg/L的單一農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，貯存在18以下冰箱中。使用時(shí)根據(jù)各農(nóng)藥在對(duì)應(yīng)檢測(cè)器上的響應(yīng)值，吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用丙酮稀釋配制成所需的標(biāo)準(zhǔn)工作液。農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)- -酶抑制法酶抑制法2.試樣試