1、艾滋病檢測點標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程考范本）（參HIV 抗體檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（ SOP文件）1、目的：為了規(guī)范本衛(wèi)生院艾滋病檢測點的正常運行， 保證艾滋病抗體檢測的準(zhǔn)確， 確保實驗室生物安 全，特制定本操作規(guī)程。2、適用范圍：適用于本衛(wèi)生院艾滋病抗體檢測從標(biāo)本的采 集、處理、檢測到報告的全過程。3、職責(zé)：各檢測工作人員按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行艾滋病 抗體檢測，本院艾滋病檢測工作領(lǐng)導(dǎo)小組負(fù)責(zé)對 檢測活動全過程及各項生物安全措施執(zhí)行情況 進(jìn)行監(jiān)督。4、標(biāo)準(zhǔn)操作程序：4.1 樣品的采集和處理4.1.1 樣品的采集：4.1.1.1 血清樣品采集：用真空采血管抽取5mL靜脈血，室溫下自然放置 1-2 小時，待血清凝固和血

2、塊收縮后在用4000rmp離心15min,吸 出血清備用。4. 1. 1. 2抗凝血樣品釆集：用加有抗凝劑的真 空管或用消毒注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗 凝劑的試管，反復(fù)輕搖，分離血漿和血細(xì)胞備用。4.1.1. 3采樣注意事項:4. 1. 1. 31釆集樣品應(yīng)按臨床釆血技術(shù)規(guī)范及試劑盒說明書要求進(jìn)行。4. 1. 1. 3. 2釆集標(biāo)本時應(yīng)注意安全，直接接觸HIV感染者或艾滋病病人血液和體液的操作應(yīng)戴雙層手套。4. 1. 2樣品的保存:用于抗體檢測的血清或血漿樣品應(yīng)存放與-20C以下，短期（1周）內(nèi)進(jìn)行檢測的樣品可存放于 28C。4. 1. 3樣品的運送:III4. 1. 3. 1實驗室間傳遞

3、的樣品應(yīng)為血清或血 漿，除特殊情況外一般不運送全血。樣品應(yīng)置于標(biāo)明帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記, 樣品的編號或受檢者姓名、種類、采樣時間4.1.3.2 將試管放入專用帶蓋的容器內(nèi)，容器 的材料要易于消毒。 在試管的周圍墊有緩沖吸水 材料，以免碰碎。4.1.4 樣品的接收：4.1.4.1 含有感染性樣品的包裹必須在具有處 理感染源設(shè)備的實驗室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)的工作人 員打開，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。4.1.4.2 核對標(biāo)本與送檢單，檢查樣品管有無 破損及遺漏。如發(fā)現(xiàn)遺漏應(yīng)立即將尚存留的樣品 移出、對樣品管和盛器消毒， 同時還要報告有關(guān) 領(lǐng)導(dǎo)和專家。4.2 檢驗方法和步驟4.2.2 快速檢測法（膠

4、體金法）4.2.2.1 原理采用膠體金免疫技術(shù)和層析原理， 定性測定血 清樣本中的 HIV1+2 抗體。4.2.2.2 操作步驟4.2.2.2.1 將標(biāo)本平衡至室溫。4.2.2.2.2 將所需數(shù)量的測試卡從包裝盒中拿 出平衡至室溫， 打開鋁箔包裝袋， 平置于臺面上 并編號（與樣本編號相對應(yīng)） 。4.2.2.2.3 用微量加樣器取試劑說明書規(guī)定的 樣本血清或血漿，加到測試卡的加樣處。4.2.2.2.4 在試劑說明書規(guī)定的時間內(nèi)觀察結(jié) 果。4.2.2.3 結(jié)果判定：4.2.2.3.1 陽性：在檢測區(qū)和對照區(qū)位置出現(xiàn) 兩條紫紅色條帶。如果檢測區(qū)的條帶隱約可見， 建議對該樣本重復(fù)試驗， 并使用其他廠家

5、的試劑 確認(rèn)。4.2.2.3.2 陰性：只在對照區(qū)出現(xiàn)一條紫紅色 條帶。4.2.2.3.3 無效：對照區(qū)未出現(xiàn)紫紅色條帶。4.2.2.3.4 注意：在規(guī)定的時間內(nèi)不論測試區(qū) 內(nèi)的色帶顏色深淺與否均應(yīng)判為陽性。4.3 儀器的使用和維護(hù)4.3.1 設(shè)立常用儀器的維護(hù)制度，以保證正常 運轉(zhuǎn)；根據(jù)使用情況更換必要的部件：4.3.2 冰箱 定期檢查溫度并作好記錄， 必須每天檢查 和記錄冷凍和冷藏室的溫度。4.3.3 定期檢查其他儀器設(shè)備。4.4 HIV 抗體篩查結(jié)果的記錄、解釋與報告4.4.1 篩查試驗呈陰性反應(yīng)出具 HIV 抗體陰性 報告。4.4.2 篩查試驗呈陽性反應(yīng)，可出具“ HIV 抗 體待復(fù)檢

6、”報告， 不能出陽性報告。 同時應(yīng)盡快 進(jìn)行以下處理：4.4.2.1 填寫 HIV 抗體篩查報告，經(jīng)檢測者、 復(fù)核者和簽發(fā)者審核簽字。4.4.2.2 盡可能重新采集受檢者的血樣。4.4.2.3 將二份血樣（或僅原血樣，特指無法 采集受檢者血樣時） 連同 HIV 抗體篩查報告一并 送當(dāng)?shù)匕滩『Y查實驗室4.4.2.5 做好檢測后咨詢。4.5 保密程序4.5.1 要有專人負(fù)責(zé)妥善保存各種實驗記錄， 不得擅自修改和銷毀。 嚴(yán)格遵守保密制度， 未經(jīng) 省級衛(wèi)生行政部門許可， 不得向無關(guān)人員或單位 提供任何情況。4.5.2 檢測的陽性結(jié)果不是最終結(jié)果，應(yīng)及時 做進(jìn)一步確認(rèn)， HIV 抗體檢測點不能出具 H

7、IV 抗體陽性的結(jié)果報告，更不能告知受檢者本人。4.6 實驗室的清理和消毒4.6.1 帶入和帶出實驗室的物品4.6.1.1 對所有帶入實驗室的物品都應(yīng)進(jìn)行檢 查。含有測試樣品的包裹應(yīng)在實驗室的專用實驗 臺上打開。4.6.1.2 將 HIV 測試樣品轉(zhuǎn)送其他實驗室時， 應(yīng)防止對人員和環(huán)境的污染。 護(hù)送樣品的人應(yīng)明 確接收地點和接收人， 實驗室負(fù)責(zé)人或其指定的 人員應(yīng)及時確認(rèn)樣品已送達(dá)指定的實驗室， 被轉(zhuǎn) 入安全位置并得到妥善處理。4.6.1.3 污染或可能造成污染的材料在帶出實 驗室前應(yīng)進(jìn)行消毒。4.6.2 減少利器的使用4.6.2.1 盡量避免在實驗室使用針頭、刀片等 利器，如果必須使用， 在

8、處理或清洗時應(yīng)采取措 施防止刺傷或劃傷， 并應(yīng)對用過的物品進(jìn)行消毒 處理。4.6.2.2 最好不使用玻璃制品。4.6.2.3 盡量使用安全針具采血，如蝶形真空 針，自毀性針具等， 以降低直接接觸血液和刺傷 的危險性。應(yīng)將用過的針頭直接放入堅固的容器 內(nèi)，消毒后廢棄。4.6.3. 實驗室常用物品的消毒方法：4.6.3.1 廢棄物缸： 10%（v/v ）次氯酸鈉（含 10000 ppm 有效氯）。4.6.3.2 工作臺面和儀器表面： 75%乙醇。4.6.3.3 溢出物： 10%次氯酸鈉（ w/v ）。4.6.3.4 實驗室：甲醛蒸氣熏蒸。福爾馬林和 水加熱沸騰，其體積根據(jù)實驗室的大小而定。4.6.

9、3.5 污染的臺面和器具： 40%甲醛水溶液， 也可以用過氧化氫或過氧乙酸。4.7 艾滋病檢測實驗室安全防護(hù)4.7.1. 建立安全制度4.7.1.1 實驗室的設(shè)備、建筑和設(shè)施的安全性 應(yīng)通過專家的評審。4.7.1.2 建立安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序，該程序應(yīng)適 用于現(xiàn)有的實驗條件， 并與實驗室其他規(guī)章制度 一致。4.7.1.3 無論是否發(fā)生意外事故，每年都要對 安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序及其實施情況進(jìn)行檢查。4.7.1.4 制定意外事故處理預(yù)案，建立意外事 故的登記和報告制度。4.7.1.5 實驗室主任要按照規(guī)定，對突發(fā)事件 和職業(yè)暴露事故進(jìn)行調(diào)查、處理和報告。4.7.2 人員管理4.7.2.1 實驗室主任應(yīng)了解

10、所有工作人員。在 安排工作區(qū)域時， 要根據(jù)人員的工作種類和所涉 及的生物材料，對實驗室環(huán)境做安全檢查。4.7.2.2 新調(diào)入人員、外來合作、進(jìn)修和學(xué)習(xí) 的人員在進(jìn)入實驗室之前必須經(jīng)過實驗室主任 的批準(zhǔn)。非實驗室人員和非實驗室物品不得進(jìn)入 實驗室。4.7.2.3 嚴(yán)格執(zhí)行實驗室工作人員年度采血檢 測 HIV 抗體和備案制度， 工作人員血清應(yīng)長期保 留。4.7.3 所有工作人員必須經(jīng)過 HIV 檢測技術(shù)和 實驗室安全培訓(xùn)， 包括上崗培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)， 并接受 實驗室管理人員的監(jiān)督。 實驗室的安全責(zé)任人要 對工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)， 所有工作人員都有責(zé) 任保護(hù)自己和他人的安全。4.7.3.2 必須告知新上崗

11、人員實驗室工作的 潛在危險， 進(jìn)行安全教育， 直至有能力后方可單 獨工作。4.7.3.3 HIV 檢測技術(shù)人員必須參加上級單位 組織的生物安全培訓(xùn)，并考核合格。4.7.4 個人保健4.7.4.1 高標(biāo)準(zhǔn)的個人保健對于減少感染的危 險性很重要。 皮膚受損、 患病都會增加感染的危 險。皮膚的傷口和擦傷都應(yīng)以防水敷料覆蓋。4.7.4.2 進(jìn)實驗室前要摘除首飾，修剪長的帶 刺的指甲，以免刺破手套。4.7.4.3 進(jìn)入實驗室應(yīng)穿工作服，戴手套。如 果接觸物傳染危險性大， 則應(yīng)戴雙層手套和防護(hù) 眼鏡。4.7.4.4 離開實驗室前必須脫去工作服并洗 手。4.7.4.5 嚴(yán)禁在實驗室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和 化妝

12、。4.7.5 實驗室職業(yè)暴露及應(yīng)急處理4.7.5.1 皮膚針刺傷或切割傷：立即用肥皂和 大量流水沖洗，盡可能擠出損傷處的血液，用 70%乙醇或其他消毒劑消毒傷口。4.7.5.2 皮膚污染：用水和肥皂沖洗污染部位， 并用適當(dāng)?shù)南緞┙荩?75%乙醇或其他皮膚 消毒劑。4.7.5.3 粘膜污染：用大量流水或生理鹽水徹 底沖洗污染部位。4.7.5.4 衣物污染：盡快脫掉污染的衣物，進(jìn) 行消毒處理。4.7.5.5 污染物潑濺：發(fā)生小范圍污染物潑濺 事故時， 應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理。 發(fā)生大范圍污染 物潑濺事故時， 應(yīng)立即通知實驗室主管領(lǐng)導(dǎo)和安 全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場查清情況， 確定消毒的程 序。4.7.

13、6 職業(yè)暴露事故登記：4.7.6.1 事故發(fā)生的時間、地點及詳細(xì)經(jīng)過。4.7.6.2 暴露方式；受傷部位、傷口深淺、暴 露程度；污染物種類（血液或其他體液）以及其 中含有 HIV 的情況。4.7.6.3 處理方法和經(jīng)過，包括專家或領(lǐng)導(dǎo)赴 現(xiàn)場指導(dǎo)和處理的情況。4.7.6.4 是否采用暴露后藥物預(yù)防，如果是， 應(yīng)詳細(xì)記錄用藥情況、 包括首次用藥時間、 服藥 方案和毒副作用。4.7.6.5 隨訪檢測的日期、項目和結(jié)果。4.7.7 報告和檢測4.7.7.1 發(fā)生重大事故時，在緊急處理的同時 要立即向主管領(lǐng)導(dǎo)和專家報告。同時抽血檢測 HIV 抗體，暴露一年內(nèi)要定期檢測。4.7.7.2 發(fā)生小型事故時可在緊急處理后立即 將事故情況和處理方法報告主管領(lǐng)導(dǎo)和專家， 檢 測同前。4.8 HIV 職業(yè)暴露后的藥物預(yù)防參見中國疾病預(yù)防控制中心 全國艾滋病檢測 技術(shù)規(guī)范（ 2009 版）。5、參