誘導多能干細胞技術(inducedpluripotentstemcells,iPSCells),楊通E-mail:tong.yang,內部資料，僅供參考,捷易生物,特色技術平臺：iPS技術平臺（外周血、尿液等非整合誘導及多種分化）CRISPR/Cas9基因編輯（敲除效率高，非整合）二代測序建庫和數據分析（可做單細胞或極少量樣本建庫）產品平臺：總代理KAPABIOSYSTEMS,abm等北美優質工具酶（如二代測序）,（二）重點任務,科技部“十三五”重點專項,干細胞與轉化醫學,遺傳相關疾病,胚胎干細胞（embryonicstemcell，ESCs）,Wikipedia,體細胞重編程,誘導多能干細胞（inducedpluripotentstemcells,iPScells）最初是日本人山中申彌（ShinyaYamanaka）于2006年利用病毒載體將四個轉錄因子（Oct4,Sox2,Klf4和c-Myc）的組合轉入分化的體細胞中，使其重編程而得到的類似胚胎干細胞（ES）的一種細胞類型。,iPS細胞,人誘導多能干細胞（hiPS)研究簡介,Yamanaka,Cell.2009,Rescuedbygenomeediting(CRISPR/Cas9,TALEN),iPSC-basedtherapy,患者體細胞取材的創傷性。hiPS細胞誘導時外源基因的插入。細胞培養液中動物源性成份的使用。傳統基因打靶的低效率。,hiPS面臨的挑戰,捷易的優勢1取材靈活（外周血、尿液）,捷易的優勢2非整合型質粒電轉（無整合）,捷易的優勢3Xeno-free培養（無異源性物質）,捷易的優勢4CRISPR/Cas9基因編輯,特色：1）Cas9mRNA和sgRNA電轉2）單鏈DNA做Doner3）Cas9蛋白和sgRNA電轉,RecoveryorConstructionofdiseasemodeliniPSCsPointmutationMulti-genemutationLargefragmentdeletionLargefragmentinsertion,非整合型hiPS建系的周期及價格,8.8萬元,疾病特異hiPS在遺傳病疾病機制研究中的思路,1）建立病人特異iPS細胞模型（比較與正常的差異）；2）CRISPR/Cas9基因修復驗證遺傳突變的重要性；3）高通量測序尋找疾病機制,建立DISC1突變家系來源的iPS細胞系（包括正常和突變），并分化成神經元，比較差異；用基因編輯技術確認DISC1的作用；二代測序尋找機制,Figure1|Normalneuraldifferentiation,butmarkedlyreducedtotalDISC1proteinlevelsinforebrainneuronsderivedfrompatientiPScellscarryingtheDISC1mutation.,Figure2|DefectsofglutamatergicsynapsesinforebrainneuronscarryingtheDISC1mutation.,Figure3|AcausalroleoftheDISC1mutationinregulatingsynapseformationinhumanforebrainneurons.,Figure4|Dysregulationofneuronaltranscriptomeencodingasubsetofpresynapticproteins,DISC1-interactingproteinsandmental-disorderassociatedproteinsinhumanforebrainneuronscarryingtheDISC1mutation.,疾病特異hiPS在遺傳病基因治療中的思路,1）建立病人特異iPS細胞模型；2）基因編輯技術修復基因突變；3）檢測基因修復后相關基因的表達。,建立乙型地中海貧血病人來源