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文檔簡介

.,實驗二小鼠骨髓細胞染色體制備與觀察,.,實驗原理,小鼠骨髓細胞始終保持較強的分裂活性，且細胞數量較多。,.,秋水仙素，可以抑制細胞分裂時的紡錘體形成，使處于增殖狀態的細胞停止在中期。注射到動物活體內，可以收集到較多的中期分裂相的骨髓細胞。,.,.,實驗目的與要求：1.熟悉小鼠骨髓細胞染色體制備方法。2.了解小鼠染色體核型。3.認識秋水仙素對細胞增殖的作用。器材與試劑內容與方法（一）小鼠骨髓細胞染色體制備預處理,取材，收集細胞,低滲,固定、再固定,滴片,染色,.,取材前23h，向腹腔內注射秋水仙素。注射濃度隨動物種類不同而異。秋水仙素的主要作用是使分裂細胞阻斷在有絲分裂中期，增加中期分裂相的比例。,腹腔內注射秋水仙素23小時后，頸椎脫臼處死小鼠。,.,小白鼠骨骼標本,.,.,取出小鼠的后肢股骨，注意不要將股骨剪斷，否則容易造成骨髓細胞的流失。,.,用紗布擦股骨上的肌肉組織，清除干凈,注射器抽取生理鹽水沖洗骨髓,.,收集細胞：,暴露骨髓腔，反復沖洗骨髓腔獲得骨髓細胞，收集到離心管中,定容至6ml.,.,滴23滴于玻片上，吹氣，在酒精燈火焰過火8次，做記號，涼干，染色,滴片：,滴片后，將片子侵入Giemsa染液缸中，1015分鐘，棄去染液，水洗，晾干，鏡檢。,.,.,.,作業與思考題,1、繪制一個你所觀察到的小鼠骨髓細胞染色體中期分裂相。2、本實驗中秋水仙素、低滲液、固定液各起什么作用？3、簡述實驗中應注意那些關鍵問題？,.,（二）染色體標本片觀察1.標本片質量評價（1）細胞密度合適、均勻；（2）背景干凈，細胞核和染色體清晰；（3）有較多的分裂相；（4）染色體分散較好。,.,細胞密度,.,染色體分散度,.,2.染色體形態特征觀察,.,3.染色體計數,（10010）,15,16,9,9+16+15=40,10,8,22,22+8+10=40,.,4.細胞增殖指數統計,細胞增殖指數=,100%,.,實驗三細胞器的觀察,一、中心體二、高爾基體,.,一、中心體（410）,馬蛔蟲子宮橫切片全貌,.,中心體（1010）,.,中心體（4010）,.,二、高爾基體（410）

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