腫瘤細胞免疫治療 久騰醫學 基本內容 一 癌癥治療二 腫瘤免疫治療三 技術發展前景四 公司介紹 一 癌癥治療 一 背景 WHO國際癌癥研究中心報告 根據目前癌癥的發病趨勢 2020年全世界癌癥發病率將比現在增加50 全球每年新增癌癥患者人數將達到1500萬人 近五十多年來 盡管腫瘤治療中常用的手術 放療 化療等手段有了很大的改進 但腫瘤患者的五年生存率仍提高甚微 人們認識到單靠現有的腫瘤治療手段是不夠的 應大力加強新的有效的腫瘤治療方法的研究 二 人為什么會得癌癥 人類接觸致癌物是不可避免的 不過多少而已 人體內癌細胞產生也是每天都有的 不過多少而已 但為什么大多數人不得癌癥呢 癌細胞產生 癌細胞清除 12 5 25 0 37 5 50 0 75 0 62 5 87 5 100 0 0 正常小鼠 白細胞的體外殺癌活性 明標實驗法 對人宮頸癌細胞 Hela 殺傷率 人體抗癌活性穩定性及相關因素的影響 100 80 60 40 20 0 2 4 6 8 10 12 14 16 周數 急性精神壓力 三天恢復 癌細胞殺傷率 100 80 60 40 20 0 2 4 6 8 10 12 14 16 周數 慢性精神壓力 三個月恢復 人體抗癌活性穩定性及應相因素 癌細胞殺傷率 人與人之間有差別 不同人對不同癌有差別年齡不同有差別 身體狀況不同有差別生活環境有差別 飲食習慣有差別 腫瘤 全身性疾病 系統性疾病 三 癌癥治療方法的比較 放療 會產生放射性皮炎 放射性食管炎以及食欲下降 惡心 嘔吐 腹痛 腹瀉或便秘等諸多毒副反應化療 會產生食欲下降 惡心 嘔吐 免疫功能下降 骨髓抑制等副反應手術治療 有局限性 很多腫瘤無法進行 近年來 腫瘤的生物治療以其安全有效 副作用小等優點已逐漸被廣大醫務工作者和患者接受 并已成為繼手術 放療 化療后的第四種腫瘤治療模式 手術 放療 化療 生物治療 二 腫瘤免疫治療 一 概念及歷史 腫瘤免疫治療是生物治療的一種方法 通過激發和增強機體的免疫功能或以生物制劑的作用調節機體的免疫反應 從而達到治療腫瘤的目的 1 腫瘤免疫理論的歷史 1909年Ehrlich首先提出 免疫系統能從機體內清除改變了的宿主成分 并提出了細胞免疫直接對抗腫瘤的概念 六十年代經Thomas Burnet和Good等人將該觀點系統化 提出了免疫監視學說 免疫系統具有一個十分完備的監視功能 能準確地分辨 自己 和 非己 的成分 能消滅機體內突變的細胞 防止腫瘤的生長 上個世紀末 科學家們提出抗腫瘤保護性免疫反應的存在以及誘導和擴大這種反應的可能性 2 腫瘤免疫治療的臨床應用 1 細胞因子療法 IL 2 IFN IL 12 TNF a 2 生物分子靶向藥物 抗人細胞表皮生長因子的單克隆抗體 C225 抗血管內皮生長因子 VEGF 配體的單克隆抗體 Avastin 等等3 過繼性細胞免疫治療 4 腫瘤疫苗療法腫瘤 5 腫瘤的免疫基因治療 二 腫瘤過繼性細胞免疫治療 概念指向腫瘤患者轉輸具有抗腫瘤活性的免疫細胞直接殺傷腫瘤或激發機體免疫反應殺傷腫瘤細胞 1 過繼性細胞免疫治療分類 1 抗原激活的殺傷細胞 TAK 2 腫瘤浸潤性淋巴細胞 TIL 3 細胞毒性T淋巴細胞 CTL 4 激活的殺傷性單核細胞 AKM 5 自體細胞因子誘導的殺傷細胞 CIK 6 自然殺傷細胞 NaturalkellcellNK 7 自體DC細胞刺激的CIK細胞免疫治療 8 經修飾的自體DC細胞刺激的T淋巴細胞治療 2 CIK細胞治療腫瘤 又稱細胞因子誘導的殺傷細胞 是將人的外周血單個核細胞在體外用多種細胞因子共同培養后獲得的T淋巴細胞 因為同時表達CD3和CD56兩種膜蛋白分子 又被稱為NK細胞樣 淋巴細胞 兼具有 淋巴細胞強大的抗腫瘤活性和NK細胞的非MHC限制性殺瘤優點 培養9天CIK細胞 培養2天CIK細胞 培養12天CIK細胞 2 1 CIK細胞抗腫瘤治療的特點 1 CIK細胞增殖速度快 2 CIK細胞對正常細胞無毒性作用 3 CIK細胞殺瘤活性高 殺瘤譜廣 4 CIK細胞是活化的自體細胞 應用起來非常安全 2 2 CIK抗腫瘤機理 1 CIK細胞以細胞 殺傷 作用對多種腫瘤細胞均有的殺傷活性 2 CIK細胞表面的CD3樣受體被結合而激活CIK細胞產生漿毒性顆粒介導溶解腫瘤細胞作用 3 CIK細胞分泌IL 2 IL 6 IFN 等多種抗腫瘤的細胞因子 2 3 CIK細胞治療適應癥 1 早 中 晚期惡性實體瘤和白血病2 部分暫時不宜做手術 介入或其他治療的腫瘤患者 2 4 自體CIK細胞的治療策略 1 手術或放化療后抽取50ml外周血 2 體外誘導CIK細胞100億以上 3 患者回輸CIK細胞至少一個療程 每星期回輸一次共四次 4 CIK能提高機體免疫功能清除殘留的腫瘤細胞防止腫瘤向遠處器官轉移 2 5 CIK細胞免疫治療的作用 1 改善生活質量 食欲增強 睡眠改善 體重增加 2 抑制腫瘤復發和轉移 3 保護機體的免疫功能 4 一些肝癌患者經過CIK治療后甲胎球蛋白值下降 肝功能好轉 5 血液中抗腫瘤效應細胞數量和抗腫瘤的細胞因子有所提高 3 NK細胞治療腫瘤 NK細胞來源于造血細胞 其發育成熟依賴骨髓及胸腺微環境 無需抗原預先作用 就可以直接殺傷細nm菌或病毒感染的細胞和腫瘤細胞 原技術上的限制 在體外要獲得臨床上使用的足夠數量的NK細胞有較大困難 而且費用高 培養7天NK細胞 NK細胞 3 1 NK細胞治療適應癥 1 早 中 晚期惡性膠質瘤 腎癌 肺癌 食道癌 肝癌 結腸癌 乳腺癌 卵巢癌等多種惡性實體瘤2 部分暫時不宜做手術 介入或其他治療的腫瘤患者 也可先進行NK細胞治療 以提高機體的免疫功能 3 2 自體NK細胞的治療策略 1 手術或放化療后抽取患者30ml外周血 2 體外誘導NK細胞30億以上 3 每星期回輸NK細胞一次給患者 至少一個療程四次 4 CIK能提高機體免疫功能清除殘留的腫瘤細胞防止腫瘤向遠處器官轉移 3 3 NK細胞治療流程 4 自體DC CIK細胞免疫治療 將DC細胞在體外直接與CIK細胞混合 體外刺激CIK細胞大量增值后將活化的免疫細胞回輸入患者體內 產生抗腫瘤作用 4 1 DC CIK細胞治療的適應癥 1 早 中 晚期惡性實體瘤和白血病2 部分暫時不宜做手術 介入或其他治療的腫瘤患者 也可先進行D CIK細胞治療 以提高機體的免疫功能 4 2 DC CIK制備流程 CIK細胞 成熟DC細胞 DC細胞刺激的CIK細胞 1 1 5 1010 腫瘤抗原 PBMNC0 5 3 107 50ml 共培養 細胞因子 細胞因子 4 3 自體DC CIK治療腫瘤的策略 1 抽取病人50 60ml外周血 2 體外誘導DC CIK細胞100億以上 3 回輸患者DC CIK細胞 至少一個療程四次 4 殺傷細小殘留的腫瘤細胞防止腫瘤復發和轉移 5 各種體細胞比較 三 腫瘤疫苗治療腫瘤 腫瘤疫苗治療腫瘤是利用腫瘤細胞抗原或相應的核酸進行治療腫瘤的方法 主要包括以下幾種 1 基因修飾的腫瘤疫苗 2 熱休克蛋白疫苗 3 腫瘤抗原肽疫苗 4 核酸疫苗 5 樹突狀細胞 DC 疫苗和DC 腫瘤融合細胞疫苗 6 CA125的抗獨特型抗體ACA125疫苗 7 預防宮頸癌發生的HPV疫苗 1 DC細胞治療腫瘤 因具有長長的樹突狀突起和星狀多形性而得名 源自骨髓中的前體細胞 是已知機體內抗原呈遞能力最強的細胞 比普通抗原呈遞細胞強1000倍 DC細胞 分化成熟的DC模式圖 它能在機體內外捕獲抗原后 將信息傳遞給T B淋巴細胞 從而引發一系列的特異性免疫應答反應 人成熟DC表型的流式細胞檢測 可見CD80 CD83 CD86高表達 1 1 DC腫瘤疫苗制備流程 1 2 特點及適應癥 特點 DC細胞是體內提呈抗原最強的細胞 它在負載腫瘤抗原后 能刺激T淋巴細胞分化為具有抗腫瘤活性的細胞毒性T淋巴細胞 對腫瘤細胞實施特異性殺傷 適應癥 該治療方法在治療惡性實體瘤和白血病方面具有廣泛的臨床應用前景 1 3 樹突狀細胞疫苗在實體瘤治療中的策略 1 1 抽取病人50 60ml外周血 2 分離單核細胞體外誘導DC細胞 3 DC細胞負載自體腫瘤抗原通過靜脈回輸給病人或皮下注射 4 經腫瘤抗原負載DC細胞能刺激自體T細胞產生強烈的抗腫瘤免疫應答 1 3 樹突狀細胞疫苗在實體瘤治療中的策略 2 1 抽取病人50 60ml外周血 2 分離單核細胞體外誘導DC細胞 3 DC細胞負載自體腫瘤抗原并與自體的淋巴細胞混合刺激自體T細胞產生細胞毒性T淋巴細胞 4 將這些細胞毒性T淋巴細胞通過靜脈回輸給病人直接殺傷腫瘤細胞 腫瘤細胞模式圖 由于腫瘤細胞表面抗原的多樣性 腫瘤抗原免疫原性弱 難以激活有效的機體免疫 2 自體DC 腫瘤融合細胞疫苗 2 1 DC 腫瘤融合細胞誘導機體產生抗腫瘤免疫的機理 提呈所有腫瘤細胞表面抗原 包括已知和未知抗原 誘導高親合力的多克隆CTL 2 2 自體DC 腫瘤融合疫苗制備過程 原代腫瘤細胞 成熟DC細胞 自體DC 腫瘤融合細胞疫苗 PBMNC 50 60ml 融合 細胞因子 腫瘤細胞純化技術 術后腫瘤組織 2 3 自體DC 腫瘤融合疫苗治療策略 1 抽病人50ml 60ml外周血 分離單核細胞 體外誘導DC細胞 DC 融合細胞疫苗經皮下注射 DC 融合細胞疫苗能刺激自體T細胞 誘導產生的抗腫瘤免疫應答 制備DC 腫瘤融合細胞疫苗 自體DC 腫瘤融合疫苗治療策略 2 抽病人50ml 60ml外周血 分離單核細胞 體外誘導DC細胞 DC 腫瘤融合細胞與淋巴細胞混合 刺激產生細胞毒性T淋巴細胞 將這些細胞毒性T淋巴細胞通過靜脈回輸給病人 直接殺傷腫瘤細胞 制備DC 腫瘤融合細胞疫苗 未純化的腎癌細胞 純化后的腎癌細胞 從術后腎癌組織中分離純化腎癌細胞 從手術后肝癌組織中分離純化肝癌細胞 未純化的肝癌細胞 純化后的肝癌細胞 4 腫瘤疫苗的區別 五 各種治療方法的區別 六 治療方案的制定 根據病人的腫瘤特征 遺傳背景 病情狀況 年齡等制定出個適合病人的個體化特征的生物治療方案 制定時應遵循以下原則 1 通常在進行體細胞免疫治療前 要降低腫瘤負荷 A 臨床惡性腫瘤綜合治療的一部分 常規治療后的鞏固治療 B 一些免疫原性較強的惡性腫瘤或對化療和放療不敏感腫瘤在手術或介入微創治療后可直接接受細胞免疫治療C 體細胞免疫治療聯合抗腫瘤的細胞因子 抗腫瘤抗體 生物靶向藥物進行治療2 體細胞免疫治療與其它治療應交替進行 1 治療方案舉例 保健治療或單獨進行體細胞免疫治療時 體細胞免疫治療聯合抗腫瘤的細胞因子 抗腫瘤抗體 生物分子靶向藥物增強療效的方案 七 治療后效果評估 按照生物制品的療效評估方法 主要以腫瘤病灶的大小變化和患者的生存期評估療效 及患者的生活質量等 1 免疫學指標的評價 治療前后T淋巴亞群的變化 2 無進展生存期 PFS 和生存期 3 影像學檢查 按RECIST標準評價 分為完全緩解 CR 部分緩解 PR 穩定 SD 和進展 PD 4 腫瘤患者的腫瘤標記物的變化情況 八 有效性證明 微創介入聯合CIK治療原發性肝癌 MinimallyInvasiveTreatmentCombinedwithCytokine InducedKillerCellsTherapyLowertheShort TermRecurrenceRatesofHepatocellularCarcinomas JImmunother 2008 31 1 63 71 Figure585名原發肝癌患者生存曲線CIK治療組6 12 18個月時無復發生存率分別為93 3 91 1 74 4 對照組則分別為90 0 70 0 60 0 三 發展前景 一 臨床應用趨勢 傳統治療方法只負責殺腫瘤細胞 不負責防止癌細胞擴散 以及巨大的副作用 使各種生物治療作為傳統療法的輔助治療手段越來越普遍 作為生物治療的熱點 過繼性細胞免疫治療的療效也得到肯定 能明顯抑制腫瘤細胞向遠處轉移 并有效提高腫瘤患者遠期生存率 過繼性細胞免疫治療的療效也已得到各國的認可 1 美國FDA 日本衛生廳已經認可體細胞治療 并開展臨床治療 2 中國衛生部已經將體細胞治療劃為第三類醫療技術 近期將出臺技術標準 3 國內頂尖醫院已經大規模開展體細胞治療臨床試驗達10年之久 國內很多的醫院已經開展體細胞治療項目 1 比較出名的有天津腫瘤醫院 北京北大醫院 北京道培醫院 中山大學附屬腫瘤醫院等2 國內比較出名的專家有夏建川 任秀寶 王福生等近期內 國內越來越多的醫院將開展體細胞治療項目 已成為趨勢 二 治療技術