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.目錄.一.方法原理 .2二.方法確認(rèn)可(包括線性、不精密度、檢出限、靈敏度和特異性) .6三.TEG實(shí)驗(yàn)檢測(cè)取血要求.11四.儀器和試劑 .12五.TEG質(zhì)控檢測(cè)操作流程.136. TEG普通杯檢測(cè)操作流程.18 七.TEG血小板圖檢測(cè)操作流程.21八.參考區(qū)間 (高嶺樣品) .25九.臨床意義 .26十 TEG 日維護(hù) .31十一 TEG 月維護(hù).33一 方法原理 承載血標(biāo)本的測(cè)試杯以作 445的角度和每 9 秒一周的速度均速轉(zhuǎn)動(dòng),一旦血栓形成,置于血標(biāo)本檢測(cè)杯中的金屬探針受到標(biāo)本形成的切應(yīng)力作用,隨之出現(xiàn)左右旋動(dòng),金屬針在旋動(dòng)過(guò)程中由于切割磁力線而產(chǎn)生電流,給電腦軟件處理后,便形成 TEG 曲線。TEG 參數(shù)圖解凝血彈性描記儀(TEG)參數(shù)解析 4SP 時(shí)間(測(cè)量從反應(yīng)開(kāi)始到彈力圖曲線出現(xiàn)分叉的時(shí)間)1、SP=Split time2、纖維蛋白原未被激活前的時(shí)間。4R 時(shí)間(從血樣開(kāi)始檢測(cè)至描記圖幅度達(dá) 2mm 所需的時(shí)間):1、R 時(shí)間是血樣放在 TEG 分析儀內(nèi)到第一塊纖維蛋白凝塊形成之間的一段潛伏期。2、R 時(shí)間因使用抗凝劑或凝血因子缺乏而延長(zhǎng),因血液呈高凝狀態(tài)而縮短。3、R 延長(zhǎng)能通過(guò)注射 FFP(新鮮的冰凍血漿)而糾正。(FFP 含有豐富的凝血蛋白)4K 時(shí)間(從 R 時(shí)間終點(diǎn)至描記圖幅度達(dá) 20mm 所需的時(shí)間):1、評(píng)估血凝塊強(qiáng)度達(dá)到某一水平的速率(20mm 幅度);2、通過(guò)高纖維蛋白原水平和較小程度地通過(guò)血小板功能來(lái)縮短 K,而影響血小板功能及纖維蛋白原的抗凝劑能延長(zhǎng) K;3、K 時(shí)間延長(zhǎng)通過(guò)注射 cryo(冷沉淀)與 FFP 來(lái)糾正; 4Alpha 角度(從血凝塊形成點(diǎn)至描記圖最大曲線弧度作切線與水平線的夾角):1、血凝塊動(dòng)力學(xué)特性;2、影響 Alpha 角度的因素與 K 時(shí)間相同(見(jiàn)上);3、參數(shù) Alpha 角度與 K 時(shí)間密切相關(guān),兩者都是反映血凝塊聚合的速率。但兩者之間又存在區(qū)別,在凝血處于極其低凝狀態(tài)時(shí),血凝塊強(qiáng)度的最終強(qiáng)度是幅度達(dá)不到 20mm,此時(shí) K 不能被定義。因此,Alpha 角度比 K 時(shí)間更全面、更易理解。4、6 個(gè)單位的 cryo 使增加 9.4。4最大幅度 MA(描記圖上的最大幅度,即最大切應(yīng)力系數(shù)):1、MA 反映了正在形成的血凝塊的最大強(qiáng)度或硬度及血凝塊形成的穩(wěn)定性;2、MA 主要受纖維蛋白原及血小板兩個(gè)因素的影響,其中血小板的作用要比纖維蛋白原大,血小板質(zhì)量或數(shù)量的異常都會(huì)影響到 MA 值;3、10 個(gè)單位血小板可使血小板計(jì)數(shù)增加 40,20031,400/mm3, MA 增加了13.2mm。4A(任一時(shí)刻描記圖曲線兩點(diǎn)間的距離):1、用來(lái)監(jiān)測(cè)任一時(shí)刻曲線兩點(diǎn)間的掃描寬度,是血凝塊強(qiáng)度或彈性函數(shù),A值用單位 mm 來(lái)計(jì)量;2、MA 值在確定前與 A 值相等;3、MA 值確定后 A 值測(cè)量血凝塊溶解的信息。4TMA 時(shí)間(從凝血開(kāi)始至 MA 值確定所需用的時(shí)間):1、TMA=Time To MA,血凝塊動(dòng)力學(xué)特性的綜合測(cè)量;2、TMA 包含血凝塊的形成速率,評(píng)估形成穩(wěn)定血凝塊所需用的時(shí)間。4G(血凝塊強(qiáng)度,即最大切應(yīng)力強(qiáng)度):1、將 A 值進(jìn)行轉(zhuǎn)換使其能實(shí)際測(cè)量血凝塊強(qiáng)度(G),用單位 d/sc 來(lái)計(jì)量;2、G 值在 MA 值確定后的同時(shí)也被確定。3、G = 5000A/(100-A),描述 Clot firmness.4EPL(預(yù)測(cè)在 MA 值確定后 30 分鐘內(nèi)血凝塊將要溶解的百分比)1、EPL=Estimate Percent Lysis;2、EPL=100(MA-A30)/MA;4CL30(測(cè)量在 MA 值確定后 30 分鐘內(nèi)血凝塊溶解剩余的百分比):1、CL3085%意示處于高纖溶狀態(tài),即纖溶亢進(jìn);應(yīng)使用抗纖溶藥來(lái)糾正。2、CL30=100X(A30/MA)4LY30(測(cè)量在 MA 值確定后 30 分鐘內(nèi)血凝塊幅度減少速率) 1、LY307.5%意示處于高纖溶狀態(tài).即纖溶亢進(jìn);應(yīng)使用抗纖溶藥來(lái)糾正。4CI(凝血綜合指數(shù))-3 低凝 -3正常+3 +3 高凝 4E(彈性常數(shù))1、E 是標(biāo)準(zhǔn)化的 G,作為一個(gè)彈性常數(shù);2、EMX 是最大振幅時(shí)的 E;EMX=(100 X MA)/(100-MA);4TPI(血小板動(dòng)力學(xué)指數(shù))1、TPI=EMX/K 2、TPI = Thrombodynamic Potential Index,血凝塊動(dòng)力潛能指數(shù);6 低 6正常15 15 高4CLT 時(shí)間(測(cè)量從 MA 值確定后 A 值達(dá)到 2mm 的時(shí)間)1、CLT=Clot lysis time(也稱(chēng)為 TTL=Time to lysis)血塊溶解時(shí)間。4LTE 時(shí)間(CLT 的估計(jì)值)LTE=Lysis time estimate估計(jì)的血塊溶解時(shí)間(CLT)。在 MA 出現(xiàn)后 30 秒電腦開(kāi)始計(jì)算 LTE,并不斷更新直到 MA 出現(xiàn)后 60 分鐘。如果血塊在 60 分鐘之前已溶解,此時(shí) LTE 為實(shí)際血塊最終溶解時(shí)間。如果 LTE 大于 3 小時(shí),該值顯示“3hrs”。LTE 是根據(jù)彈力圖的斜率并外推到振幅為 2mm 計(jì)算得到。4AA%INHIBITION判斷血小板血栓素受體抑制劑對(duì)血小板抑制的百分比,如阿司匹林等.4ADP%INHIBITION判斷血小板 ADP 受體抑制劑對(duì)血小板抑制的百分比,如氯吡格雷等二 方法確認(rèn)可(包括線性、不精密度、檢出限、靈敏度和特異性)準(zhǔn)確度為求證TEG的測(cè)量準(zhǔn)確度,Haemoscope公司進(jìn)行了一項(xiàng)評(píng)估,將TEG5000型分析儀和TEG3000型分析儀的測(cè)量性能表現(xiàn)進(jìn)行對(duì)照。準(zhǔn)備40種冷凍干血樣。每種血樣被分為兩份,同時(shí)裝載到一校準(zhǔn)后的5000型分析儀和3000型TEG儀上。然后在37攝氏度下,按本手冊(cè)介紹的檢測(cè)步驟,用相同的TEG軟件同時(shí)對(duì)兩份血樣進(jìn)行測(cè)試。以下四參數(shù)就是經(jīng)這種標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)測(cè)定的。R(mm) =從血凝開(kāi)始的距離(時(shí)間,以2mm/分鐘的速度)K(mm) =從標(biāo)準(zhǔn)血凝塊強(qiáng)度的距離(時(shí)間,以2mm/分鐘的速度)(20mm振幅)MA(mm) =血凝塊強(qiáng)度最大值(振幅,單位mm)Angle(deg) =血凝塊增長(zhǎng)率的斜率用 t 測(cè)試對(duì)檢測(cè)得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,這是一種建立在兩樣本零差別假設(shè)基礎(chǔ)上,將接受測(cè)試的兩個(gè)相同樣本的測(cè)試結(jié)果進(jìn)行對(duì)照的統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)方法。測(cè)驗(yàn)結(jié)果證明5000系列TEG的樣本測(cè)量性能與3000系列分析儀一致。分析顯示,5000系列和3000系列結(jié)果在P 0.05,TEG參數(shù)R,K,MA和角度沒(méi)有實(shí)際的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。并且,兩相等血樣間的絕對(duì)差(見(jiàn)下表)沒(méi)有超出儀器精確程度允許的誤差范圍,1個(gè)單位。下表列出,兩種型號(hào)儀器的兩相等血樣的測(cè)量結(jié)果及標(biāo)準(zhǔn)偏差,兩相等血樣的差別及標(biāo)準(zhǔn)偏差,t值和2-tail的概率。參數(shù)測(cè)量對(duì)照同一型血樣分成的兩相等血樣的測(cè)量結(jié)果對(duì)照(血樣類(lèi)型=40)參數(shù)R(mm)K(mm)Angle(deg)MA(mm)5000型(血樣1量結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)偏)11.56251.1782.15000.37973.96252.38230.62501.0363000型(血樣2測(cè)量結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)偏差)11.75001.2762.27500.42373.37503.0630.40101.261血樣間差別(血樣標(biāo)準(zhǔn)偏差)0.18750.3540.12500.0900.58750.6130.22401.498T值0.681.390.960.87DF787878782-TAIL P值0.4970.1680.3410.388精準(zhǔn)度為驗(yàn)證使用本手冊(cè)推薦的激活劑(Celite,組織因子,凝血酶,DAPTTIN,高嶺土-由Haemoscpe公司提供)進(jìn)行檢測(cè)的測(cè)試精確度,Haemoscpe公司做了以下評(píng)估:按照TEG用戶手冊(cè)介紹的步驟,從5位未發(fā)生凝血問(wèn)題的健康人每人抽取10立方厘米血樣。將每份血樣分為8份,使用4臺(tái)TEG儀器,測(cè)試的時(shí)間跨度為兩天;對(duì)加入Haecomscope高嶺土的血樣,測(cè)試時(shí)間跨度5天。對(duì)每種活化劑來(lái)說(shuō),需要被用來(lái)處理40個(gè)血樣。基于TEG測(cè)量數(shù)據(jù),對(duì)不同活化劑處理的血樣來(lái)說(shuō),TEG參數(shù)的精確度可以用變化系數(shù)(CV)百分比表示如下:硅顆粒(品牌名稱(chēng):Celite;Haemoscope公司提供)R8.7%K7.6%ANG2.4%MA4.1%組織因子(品牌名稱(chēng):Hemoliance;制造商:Ortho)R K ANG MA13.1% 12.9% 2.3% 3.3% 凝血酶 (品牌名稱(chēng):Thrombin Sigma,制造商:Sigma) R K ANG MA 13.2% 13.4% 3.5% 3.8%高嶺土/Sulphatide/磷脂混合物 (品牌名稱(chēng):DAPTTIN;制造商:Immuno)R12.7%K17%ANG2.8%MA5.0% 高嶺土H/Sulphatide/磷脂混合物 (品牌名稱(chēng):Kaolin;Haemoscope公司提供) R K ANG MA 13.4% 4.4% 2.8% 6.3% 比較而言,TEG測(cè)量的參數(shù)CV值相對(duì)較小,而其他多數(shù)凝血測(cè)量?jī)x器,CV值要高一些。正常值范圍Haemoscope在軟件中提供了正常值范圍參考,在下述表格里可以看到。樣本類(lèi)型RKANGMA樣本量Celite10.014.03.06.053.067.059.068.0132Sodium Clitrate +Celite7.013.03.05.061.073.055.065.098原血31.046.011.021.022.038.047.058.0132枸櫞酸化原血28.046.07.014.031.049.049.059.0132組織因子(TF)4.06.02.04.062.073.061.069.0178Sodium Clitrate +TF1.53.52.07.059.075.053.065.041 功能纖維蛋白原水平測(cè)試 有20位病人同意加入了這一項(xiàng)研究計(jì)劃。這20位病人年齡在22到62之間(平均年齡= 34.911.9 ),其中,10位男性,10位女性。他們的實(shí)驗(yàn)室纖維蛋白原水平在34.5和862毫克/分升之間。這些研究對(duì)象不包括已知患有血凝因子不足或血凝缺陷,肝病,或需血液稀釋或心肺支路的病患。在靜脈插入導(dǎo)管,將靜脈血收集到兩個(gè)含3. 8%檸檬酸納的4.5cc硅化試管 (BectonDickinson,Rutherford, NJ)中。在37攝氏度溫度下將樣本在TEG分析儀上運(yùn)行45分鐘。從第一個(gè)試管中取出0. 33立方厘米血樣,混合20ul的.2M CaCl2對(duì)其進(jìn)行重新鈣化,10ul的重組人體組織因子(加快獲得MA參數(shù))和4ul的ReoPro(2 mg/ml)(Eli Lilly, Indianapolis,IN)成一個(gè)血樣,進(jìn)行MA測(cè)量。重復(fù)進(jìn)行這些分析,最終的MA值(以ReoPro表現(xiàn)的MAR)是多次分析結(jié)果的均值。試管中血樣剩余部分用于進(jìn)行纖維蛋白原水平(使用克勞斯照片光學(xué)方法,紐約,長(zhǎng)島,醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)控制,MLA Electra 1600c分析儀)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。對(duì)第二個(gè)試管中的血樣,連續(xù)進(jìn)行兩次通常的鹽稀釋?zhuān)瑸榈氖谦@得更廣范圍的纖維蛋白原水平。按前面描述的方法對(duì)稀釋過(guò)的樣本進(jìn)行相同的樣本準(zhǔn)備和TEG測(cè)試,隨匹配樣本送實(shí)驗(yàn)室分析纖維蛋白原。最小平方線性回歸被用來(lái)確定TEG MAR值和測(cè)量出的纖維蛋白原水平間的關(guān)系。畫(huà)出一條回歸線對(duì)應(yīng)計(jì)算95%的斜角置信區(qū)間。當(dāng)P14.5IU, 每周二、四上午抽血(不需要空腹)序號(hào)檢測(cè)項(xiàng)目開(kāi)單類(lèi)型取血種類(lèi)取血要求采血管采血量抗凝時(shí)間1普通檢測(cè)血栓彈力圖實(shí)驗(yàn)高嶺土靜脈或動(dòng)脈全血安靜環(huán)境,一針見(jiàn)血枸櫞酸(藍(lán)蓋)抗凝管按刻度要求抽滿即刻送達(dá)兩小時(shí)之內(nèi)檢測(cè)2血小板圖檢測(cè)血栓彈力圖實(shí)驗(yàn)高嶺土靜脈或動(dòng)脈全血安靜環(huán)境,一針見(jiàn)血枸櫞酸(藍(lán)蓋)抗凝管肝素化(綠蓋)抗凝管各一份按刻度要求抽滿即刻送達(dá)兩小時(shí)之內(nèi)檢測(cè)血栓彈力圖實(shí)驗(yàn)氯吡格雷血栓彈力圖實(shí)驗(yàn)阿司匹林TEG血栓彈力圖實(shí)驗(yàn)血樣準(zhǔn)備描述1 枸櫞酸化全血血樣程序:備兩個(gè)注射器,戴上手套,在安靜環(huán)境下,用一根19G蝶形針,一針見(jiàn)血吸取樣血,最初1ml棄用。另外吸取足量血放在藍(lán)瓶蓋的聚丙烯試管內(nèi)(含有濃度為3.2%的枸櫞酸鈉),待采血量達(dá)到試管要求的刻度時(shí),停止吸取。將試管封口后上下輕輕翻轉(zhuǎn)3次(切勿用力搖晃),使血與枸櫞酸鈉混合。稱(chēng)為枸櫞酸化的全血2 肝素化化全血血樣程序:備兩個(gè)注射器,戴上手套,在安靜環(huán)境下,用一根19G蝶形針,一針見(jiàn)血吸取樣血,最初1ml棄用。另外吸取足量血放在綠瓶蓋的聚丙烯試管內(nèi)(含有肝素濃度14.5IU),待采血量達(dá)到試管要求的刻度時(shí),停止吸取。將試管封口后上下輕輕翻轉(zhuǎn)3次(切勿用力搖晃),使血與肝素混合。稱(chēng)為肝素化的全血四 儀器和試劑TEG檢測(cè)需要TEG血栓彈力圖儀-5000和配套的試劑(Kaolin,AA和ADP),加樣槍?zhuān)ㄐ枰?0ml,20ml,50ml,100ml,340ml,360ml和1000ml的規(guī)格)TEG 血栓彈力圖儀結(jié)構(gòu)1 水平儀:調(diào)平血栓彈力圖儀的標(biāo)準(zhǔn)。2 電源按鈕:打開(kāi)或關(guān)閉電源。3 加溫線:傳遞溫控模塊的信號(hào)。4 杯槽:裝載樣品并進(jìn)行加熱。5 水平調(diào)節(jié)支撐:旋轉(zhuǎn)以調(diào)平血栓彈力圖儀。6 馬達(dá)按鈕:按壓后馬達(dá)運(yùn)行,并有黃燈顯示。7 控制桿:可移動(dòng)到 LOAD、TEST、EJECT 三個(gè)位置。8 杯架:用來(lái)上下移動(dòng)樣品。9 平臺(tái):用來(lái)彈出樣品。五 TEG質(zhì)控檢測(cè)操作流程一調(diào)節(jié)水平儀電機(jī)指示燈杯架平臺(tái)水平調(diào)節(jié)支撐杯井lever桿在test位置溫度讀數(shù)水平儀(頂部)杯架lever桿在Load位置溫度讀數(shù)參照分析儀頂部的水平儀中水泡位置,調(diào)節(jié)分析儀底部的三個(gè)支撐腳(前面兩個(gè),后面一個(gè)),直到水泡居于中間。二基線測(cè)試eTest1) 在主界面上點(diǎn)擊“TEG”按鈕,這是唯一能開(kāi)始運(yùn)行樣品的界面。如果這是一天中的第一個(gè)樣品,一個(gè)“Maintenance check”欄會(huì)隨即出現(xiàn),提示你以下要做的事情: 調(diào)平 運(yùn)行基線測(cè)試eTest 運(yùn)行Level和Level質(zhì)控品2) 點(diǎn)擊“Check now”,出現(xiàn)“Maintenance”對(duì)話框。“Daily maintenance”子菜單中會(huì)出現(xiàn)測(cè)出的基線值,可接受的范圍為18002300。3) 將Lever桿移到Test位置,選擇通道,點(diǎn)擊“eTest”。可以選擇所有的通道同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。4) 如果出現(xiàn)信息“Channel not at equilibrium”或“eTest value off center”,則將Lever桿移到Load位置,待分析儀穩(wěn)定后再進(jìn)行測(cè)試。5) 一旦出現(xiàn)“eTest value OK”后,將Lever桿移到Load位置。如果不能出現(xiàn)該字樣,請(qǐng)及時(shí)與銷(xiāo)售商聯(lián)系。6) 在TEG 1 分析儀電源打開(kāi)的同時(shí),進(jìn)行其它幾臺(tái)TEG分析儀的基線測(cè)試。7) 點(diǎn)擊“Done”,然后點(diǎn)擊“OK”。三運(yùn)行質(zhì)控1 對(duì)質(zhì)控品【包括質(zhì)控1(藍(lán)瓶)和蒸餾水(綠瓶)】進(jìn)行復(fù)溫,保證十分鐘以上溫時(shí)間;2 打開(kāi)電腦及TEG主機(jī)的“POWER”鍵,電腦桌面上雙擊TEG圖標(biāo)進(jìn)入TEG專(zhuān)用分析軟件;3 下拉菜單中輸入默認(rèn)用戶名Site Administrator,輸入密碼teg(小寫(xiě)),點(diǎn)擊OK,彈出選擇操作者對(duì)話框4 點(diǎn)擊Temporary Operator(選中變成藍(lán)色),點(diǎn)擊Logon,進(jìn)入TEG主界面5 點(diǎn)擊右上角TEG圖標(biāo),進(jìn)入操作界面。彈出對(duì)話框6 查看TEG主機(jī)頂部水平儀,將水平儀內(nèi)的氣泡至于中央。若不在中央,可以調(diào)節(jié)主機(jī)底部三個(gè)支腳;7 點(diǎn)擊Check now,進(jìn)入eTest界面8 將測(cè)試桿移到test位置,每個(gè)通道分別運(yùn)行eTest測(cè)試,出現(xiàn)“eTest value is OK”表明測(cè)試通過(guò)后,點(diǎn)擊Done,彈出對(duì)話框,把測(cè)試桿移回Load位置,點(diǎn)擊確定。注意:如果不通過(guò)可以使用調(diào)節(jié)筆,調(diào)節(jié)通道后對(duì)應(yīng)的BASE旋鈕,增減基線值,使測(cè)試通過(guò)。9 上杯操作:將杯架沿著杯桿往下滑到平臺(tái)上。測(cè)試桿必須位于Load位置。將普通杯置于杯架上,將杯架滑到杯桿上部,將一只手放在分析儀頂部,另一只手按住杯架底部的按鈕,按壓三次,確保金屬針已經(jīng)插入杯蓋。將杯架往下滑到杯桿一半時(shí),兩手扶住杯架,用大拇指將杯子壓回杯槽中,上杯完成;(質(zhì)控操作需要在每個(gè)通道進(jìn)行上杯。)10 向已經(jīng)上好的杯子中加入20ul的氯化鈣;11 在主界面的“QC”菜單下選擇批號(hào)Lot number。點(diǎn)擊“Add”按鈕。12 在中鍵入質(zhì)控1的批號(hào)、 有效期后點(diǎn)擊Normal values按鈕,在中按照質(zhì)控品包裝盒蓋背后的數(shù)值填寫(xiě),然后點(diǎn)DONE。13 選擇一通道,選擇樣本類(lèi)型L1,在病人名字處選擇質(zhì)控批號(hào)。其他通道重復(fù)相同操作。14 將蒸餾水與質(zhì)控品瓶蓋打開(kāi),將蒸餾水全部倒入質(zhì)控品瓶中,小心不要將水濺出來(lái)。15 重新蓋上瓶蓋,搖晃使其充分溶解后靜置5分鐘。注意每個(gè)制成的試劑,在室溫下最多保存一小時(shí)。16 將重構(gòu)后的質(zhì)控品,上下顛倒5次,打開(kāi)瓶蓋吸取340l沿杯內(nèi)壁向杯中緩緩注入,上升杯架至頂端;17 將Lever桿移到Test位置。選中加樣的通道,按下“Start” 或F10。18 其他通道按相同步驟進(jìn)行;19 點(diǎn)擊Done回到TEG主界面,查看描記圖形;20 雙擊描記圖形小圖可以最大化圖形,直到MA值參數(shù)值兩面沒(méi)有星號(hào)表示描記已經(jīng)結(jié)束,可以停止。21 點(diǎn)擊Stop或F11停止描記,彈出對(duì)話框,選擇“是”22 將測(cè)試桿從Test位置移回Load位置后,向下壓到Eject位置,下滑杯架至臺(tái)面,再用力壓到底,彈出使用后的杯子。取出扔至黃色垃圾袋中。23 通過(guò)觀察參數(shù)值與正常值區(qū)間,判斷儀器是否正常運(yùn)轉(zhuǎn)。24 按上述流程開(kāi)始下一個(gè)通道質(zhì)控25 質(zhì)控完成后正常操作樣本。六 TEG普通杯檢測(cè)操作流程1 復(fù)根據(jù)患者要進(jìn)行的測(cè)試,對(duì)高嶺土試劑(紫色)和肝素酶杯(藍(lán)色)進(jìn)行復(fù)溫,保證十分鐘以上溫時(shí)間;2 打開(kāi)電腦及TEG主機(jī)的“POWER”鍵,電腦桌面上雙擊TEG圖標(biāo)進(jìn)入TEG專(zhuān)用分析軟件;3 下拉菜單中輸入默認(rèn)用戶名Site Administrator,輸入密碼teg(小寫(xiě)),點(diǎn)擊OK,彈出選擇操作者對(duì)話框;4 點(diǎn)擊Temporary Operator(選中變成藍(lán)色),點(diǎn)擊Logon,進(jìn)入TEG主界面5 點(diǎn)擊右上角TEG圖標(biāo),進(jìn)入操作界面。彈出對(duì)話框6 查看TEG主機(jī)頂部水平儀,將水平儀內(nèi)的氣泡至于中央。若不在中央,可以調(diào)節(jié)主機(jī)底部三個(gè)支腳;7 點(diǎn)擊Check now,進(jìn)入eTest界面8 將測(cè)試桿移到test位置,每個(gè)通道分別運(yùn)行eTest測(cè)試,出現(xiàn)“eTest value is OK”表明測(cè)試通過(guò)后,點(diǎn)擊Done,彈出對(duì)話框,把測(cè)試桿移回Load位置,點(diǎn)擊確定。注意:如果不通過(guò)可以使用調(diào)節(jié)筆,調(diào)節(jié)通道后對(duì)應(yīng)的BASE旋鈕,增減基線值,使測(cè)試通過(guò)。9 上杯操作:將杯架沿著杯桿往下滑到平臺(tái)上。測(cè)試桿必須位于Load位置。將普通杯和肝素酶杯分別置于兩通道杯架上,將杯架滑到杯桿上部,將一只手放在分析儀頂部,另一只手按住杯架底部的按鈕,按壓三次,確保金屬針已經(jīng)插入杯蓋。將杯架往下滑到杯桿一半時(shí),兩手扶住杯架,用大拇指將杯子壓回杯槽中,上杯完成;10 向已經(jīng)上好的杯子中加入20ul的氯化鈣;11 選擇病人名字或建立新病歷:在工具欄上點(diǎn)擊“Case” ,選擇Add case,點(diǎn)擊“Done” 輸入入病人ID號(hào)以及姓名,點(diǎn)擊“Done”12 選擇一通道和二通道,選定樣品類(lèi)型(CK),在下拉菜單中選定病人名字,填寫(xiě)簡(jiǎn)單說(shuō)明(也可不填);13 將高嶺土試劑瓶蓋摘下,向瓶中注入1ml血。蓋上瓶蓋后上下顛倒5次。注意不要?jiǎng)×覔u晃;14 將高嶺土激活的血樣靜置三到五分鐘,保證高嶺土充分激活血樣。15 打開(kāi)高嶺土瓶蓋,吸取340l血,沿杯內(nèi)壁向普通杯中緩緩注入,上升杯架至頂端;16 將Lever桿移到Test位置。選中加樣的通道,按下“Start” 或F10。 點(diǎn)擊Done回到TEG主界面,查看描記圖形;17 雙擊描記圖形小圖可以最大化圖形,直到MA值參數(shù)值兩面沒(méi)有星號(hào)表示描記已經(jīng)結(jié)束,可以停止。18 點(diǎn)擊Stop或F11停止描記,彈出對(duì)話框,選擇“是”19 將測(cè)試桿從Test位置移回Load位置后,向下壓到Eject位置,下滑杯架至臺(tái)面,再用力壓到底,彈出使用后的杯子。取出扔至黃色垃圾袋中。20 按上述流程開(kāi)始下一個(gè)樣本21 不需要使用后按儀器Power關(guān)機(jī)。血栓彈力圖普通杯測(cè)試注意事項(xiàng)1 裝杯時(shí)注意請(qǐng)勿觸碰杯子和針的接觸面2 請(qǐng)勿在Test位置上進(jìn)行裝杯。3 eTest結(jié)束后,一定要將Lever桿移回Load位置;七 TEG血小板圖檢測(cè)操作流程1 對(duì)血小板聚集功能檢測(cè)試劑盒進(jìn)行復(fù)溫,保證十分鐘以上溫時(shí)間;2 打開(kāi)電腦及TEG主機(jī)的“POWER”鍵,電腦桌面上雙擊TEG圖標(biāo)進(jìn)入TEG專(zhuān)用分析軟件;3 下拉菜單中輸入默認(rèn)用戶名Site Administrator,輸入密碼teg(小寫(xiě)),點(diǎn)擊OK,彈出選擇操作者對(duì)話框4 點(diǎn)擊Temporary Operator(選中變成藍(lán)色),點(diǎn)擊Logon,進(jìn)入TEG主界面5 點(diǎn)擊右上角TEG圖標(biāo),進(jìn)入操作界面。彈出對(duì)話框6 查看TEG主機(jī)頂部水平儀,將水平儀內(nèi)的氣泡至于中央。若不在中央,可以調(diào)節(jié)主機(jī)底部三個(gè)支腳;7 點(diǎn)擊Check now,進(jìn)入eTest界面8 將測(cè)試桿移到test位置,每個(gè)通道分別運(yùn)行eTest測(cè)試,出現(xiàn)“eTest value is OK”表明測(cè)試通過(guò)后,點(diǎn)擊Done,彈出對(duì)話框,把測(cè)試桿移回Load位置,點(diǎn)擊確定。注意:如果不通過(guò)可以使用調(diào)節(jié)筆,調(diào)節(jié)通道后對(duì)應(yīng)的BASE旋鈕,增減基線值,使測(cè)試通過(guò)。9 上杯操作:將杯架沿著杯桿往下滑到平臺(tái)上。測(cè)試桿必須位于Load位置。將普通杯置于杯架上,將杯架滑到杯桿上部,將一只手放在分析儀頂部,另一只手按住杯架底部的按鈕,按壓三次,確保金屬針已經(jīng)插入杯蓋。將杯架往下滑到杯桿一半時(shí),兩手扶住杯架,用大拇指將杯子壓回杯槽中,一次上杯完成;(由于血小板圖要進(jìn)行4次檢測(cè),所以需要在4個(gè)通道分別進(jìn)行上杯操作。)10 配液:從試劑包中分別取出P1(紅色)、P2(灰色)、P3(藍(lán)色)和蒸餾水(綠色),打開(kāi)P1和蒸餾水瓶蓋,取50l蒸餾水加入P1瓶中,蓋上P1瓶蓋,旋轉(zhuǎn)混勻。打開(kāi)P2瓶蓋,取100l蒸餾水加入P2瓶中,蓋上P2瓶蓋,旋轉(zhuǎn)混勻。打開(kāi)P3瓶蓋,取100l蒸餾水加入P3瓶中,蓋上P3瓶蓋,旋轉(zhuǎn)混勻。11 選擇病人名字或建立新病歷:在工具欄上點(diǎn)擊“Case” ,選擇Add case,點(diǎn)擊“Done” 輸入入病人ID號(hào)以及姓名,點(diǎn)擊“Done”12 選擇一通道,選定樣品類(lèi)型(CK),在下拉菜單中選定病人名字,填寫(xiě)簡(jiǎn)單說(shuō)明(也可不填);選擇二通道,選定樣品類(lèi)型(A),在下拉菜單中選定病人名字,填寫(xiě)簡(jiǎn)單說(shuō)明(也可不填);選擇三通道,選定樣品類(lèi)型(ADP),在下拉菜單中選定病人名字,填寫(xiě)簡(jiǎn)單說(shuō)明(也可不填);選擇四通道,選定樣品類(lèi)型(AA),在下拉菜單中選定病人名字,填寫(xiě)簡(jiǎn)單說(shuō)明(也可不填)。13 在一通道中加入20ul的氯化鈣。14 將高嶺土試劑瓶蓋摘下,向瓶中注入1ml血。蓋上瓶蓋后上下顛倒5次。注意不要?jiǎng)×覔u晃;15 將高嶺土激活的血樣靜置三到五分鐘,保證高嶺土充分激活血樣。16 打開(kāi)高嶺土瓶蓋,吸取340l血,沿杯內(nèi)壁向杯中緩緩注入,上升杯架至頂端;17 將Lever桿移到Test位置。選中加樣的通道,按下“Start” 或F10。18 打開(kāi)P1瓶吸取10l加入二通道,將肝素化血樣上下混勻后吸取360l加入二通道中,混吸三次,上升杯架至頂端。將Lever桿移到Test位置。選中加樣的通道,按下“Start” 或F10。19 打開(kāi)P1試劑瓶吸取10l加入三通道,打開(kāi)P2瓶吸取10l加入三通道,將肝素化血樣上下混勻后吸取360l加入三通道中,混吸三次,上升杯架至頂端。將Lever桿移到Test位置。選中加樣的通道,按下“Start” 或F10。20 打開(kāi)P1試劑瓶吸取10l加入三通道,打開(kāi)P3瓶吸取10l加入四通道,將肝素化血樣上下混勻后吸取360l加入四通道中,混吸三次,上升杯架至頂端。將Lever桿移到Test位置。選中加樣的通道,按下“Start” 或F10。檢測(cè)完成21 點(diǎn)擊Done回到TEG主界面,查看描記圖形。22 雙擊描記圖形小圖可以最大化圖形,直到MA值參數(shù)值兩面沒(méi)有星號(hào)表示描記已經(jīng)結(jié)束,可以停止。23 點(diǎn)擊Stop或F11停止描記,彈出對(duì)話框,選擇“是”24 將測(cè)試桿從Test位置移回Load位置后,向下壓到Eject位置,下滑杯架至臺(tái)面,再用力壓到底,彈出使用后的杯子。取出扔至黃色垃圾袋中。25 點(diǎn)擊Multi后,按鈕變?yōu)楹筮x擇CK、 A和ADP的圖形使三個(gè)圖形變?yōu)樗{(lán)色后,點(diǎn)擊,通過(guò)已得的疊加圖形判斷結(jié)果。再次點(diǎn)擊Multi后,按鈕變?yōu)楹筮x擇CK、A、AA的圖形使三個(gè)圖形變?yōu)樗{(lán)色后,點(diǎn)擊,通過(guò)已得的疊加圖形判斷結(jié)果。26 按上述流程開(kāi)始下一個(gè)樣本27 不需要使用后按儀器Power關(guān)機(jī)。 八 參考區(qū)間 (高嶺樣品)TEG參數(shù)值臨床分析建議治療R 4 min酶動(dòng)力型高凝抗凝藥物11min R 14 min凝血因子x 4 FFP or 16 ml/kg46mm MA 54 mm血小板功能0.3mcg/kg DDAVP#41mm MA 73血小板型高凝抗血小板治療R73酶動(dòng)力型和血小板型高凝抗血小板治療和抗凝藥物Angle() 45纖維蛋白原水平0.06 u/kg冷沉淀EPL15%, CI1.0原發(fā)性纖溶亢進(jìn)抗纖溶藥物EPL15%, CI3.0繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)抗凝藥物EPL15%,CI3.0血栓前狀態(tài)抗凝藥物九.臨床意義血栓彈力圖儀(Thrombelastograph Coagulation Analyzer,以下簡(jiǎn)稱(chēng)TEG)是一種從整個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程來(lái)監(jiān)測(cè)凝血過(guò)程的分析儀器。此設(shè)備的特點(diǎn)是能夠全面的反映患者從凝血到纖溶的全過(guò)程中凝血各個(gè)成分之間的相互作用的結(jié)果,數(shù)據(jù)準(zhǔn)確,操作簡(jiǎn)便,而且是肝移植手術(shù)的國(guó)際通用設(shè)備。在美國(guó)匹茲堡大學(xué)醫(yī)院、澳大利亞器官移植中心以及中國(guó)天津東方器官移植中心目前均采用此設(shè)備,主要用于凝血和纖溶全過(guò)程及血小板功能的全面檢測(cè),并準(zhǔn)確指導(dǎo)凝血功能異常的治療以及成份輸血。TEG 的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)過(guò)程來(lái)源于它對(duì)凝血全過(guò)程的完全描記,其所描圖形與實(shí)際凝血過(guò)程一一相對(duì)(見(jiàn)下圖),且精密度,準(zhǔn)確性及穩(wěn)定性高,對(duì)血液成分無(wú)破壞,全面反映凝血和纖溶各個(gè)成分之間相互作用的成果。臨床醫(yī)生可根據(jù)圖形得知凝血各環(huán)節(jié)存在的問(wèn)題,充分自信對(duì)凝血異常進(jìn)行有效的處理,防止凝血異常所導(dǎo)致的進(jìn)一步惡化和不可控制的大出血,以及預(yù)測(cè)血栓發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)和分析血栓發(fā)生的原因。而當(dāng)相應(yīng)治療措施實(shí)施后,又可準(zhǔn)確從圖形上觀察到治療效果。目前凝血功能全過(guò)程的監(jiān)測(cè)在有凝血功能障礙的患者術(shù)中越來(lái)越被重視,在肝移植中的作用更是不可缺少。在肝移植患者中,幾乎全部都有凝血功能障礙,而術(shù)中出現(xiàn)纖溶亢進(jìn),高凝狀態(tài)以及 DIC 等更是關(guān)系到手術(shù)成功的關(guān)鍵,并且目前關(guān)于血栓性疾病的控制也是臨床醫(yī)生非常關(guān)注的問(wèn)題。因此臨床醫(yī)生需要這樣一種能夠快速全面監(jiān)測(cè)患者術(shù)中凝血功能變化的儀器,對(duì)術(shù)中的凝血因子缺失,纖維蛋白原缺乏,血小板功能低下,高凝狀態(tài)和血栓,纖溶亢進(jìn),DIC 等做到全面監(jiān)測(cè)。以往在臨床上,監(jiān)測(cè)凝血方面常用的指標(biāo)是 ACT 檢測(cè)和凝血常規(guī)的檢測(cè)。ACT 即激活全凝血時(shí)間,反映的是凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)到纖維蛋白多聚體形成的過(guò)程,即反映部分凝血因子功能,也就是說(shuō)它反映的是凝血的起始過(guò)程。對(duì)此首先有一個(gè)問(wèn)題,如果 ACT 正常,那接下來(lái)的凝血一定會(huì)正常嗎?答案顯然是不一定。其次,若 ACT 延長(zhǎng)是凝血因子不足還是肝素影響,是不能僅通過(guò) ACT 所能知道的。第三,若 ACT 縮短也不一定代表高凝。況且繼發(fā)纖溶亢進(jìn)、DIC 更是ACT 所不能反映的。目前 ACT 品牌眾多,不同品牌基線不一、標(biāo)準(zhǔn)不同,難免會(huì)給臨床應(yīng)用帶來(lái)不利的影響。相關(guān)的其他常規(guī)檢查如 PT、APTT 等也是部分凝血因子功能的檢測(cè),這些參數(shù)和 ACT 一樣都是以纖維素形成為結(jié)局。目前的檢驗(yàn)科設(shè)備,在凝血方面涉及面廣,可檢測(cè)凝血的各個(gè)細(xì)節(jié),但由于檢驗(yàn)種類(lèi)繁多,結(jié)果分析復(fù)雜,牽扯到的物力、人力很大,在手術(shù)時(shí)間內(nèi)以及在人群凝血篩查中檢測(cè)到所有這些參數(shù)值也是可操作性不大的,如果在術(shù)中很可能會(huì)影響術(shù)中的治療時(shí)間,因此對(duì)于現(xiàn)場(chǎng)的指導(dǎo)作用受到了很多的限制。而 TEG 檢測(cè)是從凝血開(kāi)始至凝血形成,并到血塊回縮和纖維溶解為結(jié)局。不僅能包含 ACT 所反映的所有問(wèn)題,而且有相關(guān) 20 個(gè)參數(shù)來(lái)支持對(duì)凝血全過(guò)程的檢測(cè)。并且所有這些參數(shù)基線一致,標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一,已經(jīng)得到國(guó)際學(xué)術(shù)界的充分認(rèn)可。TEG 與通常的傳統(tǒng)凝血試驗(yàn)有明確的相關(guān)性,但重要的區(qū)別是 TEG 在測(cè)定凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)與血小板相互作用是有獨(dú)特性,而不只是著重于獨(dú)立的一個(gè)終點(diǎn)。實(shí)在地說(shuō),傳統(tǒng)凝血測(cè)定法不能提供血小板與凝血級(jí)聯(lián)之間的任何相互作用,不少 ACT、PT、PTT 值正常但仍然有活動(dòng)性出血及凝血異常現(xiàn)象已是眾所周知。對(duì)于肝移植這樣復(fù)雜性極大的手術(shù),病人凝血功能的檢測(cè)的重要性毋庸置疑。單憑經(jīng)驗(yàn)決定凝血功能異常的原因,決定是否需要輸血、輸血量與輸血成分等,經(jīng)常是盲目的。在國(guó)外 TEG 是檢測(cè)凝血功能相當(dāng)普及的一種檢測(cè)儀器。也是肝移植手術(shù)必不可缺的一種設(shè)備。TEG 目前在臨床中已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于心外科、心內(nèi)科、神經(jīng)科、婦產(chǎn)科、ICU、急癥科、骨科等多個(gè)學(xué)科,并且表現(xiàn)出了巨大的潛力和貢獻(xiàn)。在臨床應(yīng)用中 TEG 能夠提供以下各方面的信息:1. 凝血因子定性分析,并能通過(guò)參數(shù)進(jìn)行具有臨床意義的量化概念的分析。2. 纖維蛋白原的定性分析,并能通過(guò)參數(shù)進(jìn)行具有臨床意義的量化概念的分析。3. 血小板功能。血小板數(shù)量與質(zhì)量正常是正常凝血的基本物質(zhì),手術(shù)中對(duì)出血時(shí)間(CT)的檢查既不準(zhǔn)確也不實(shí)際,目前在臨床中已很少使用。TEG 的最大振幅值(Maximum amplitudl MA)與血小板數(shù)量及其對(duì)纖維蛋白的凝集反應(yīng)有密切關(guān)系,因而 TEG 測(cè)定血小板功能最有實(shí)用價(jià)值。而在目前的 TEG 進(jìn)展中,血小板定位圖的臨床應(yīng)用使 TEG 可以準(zhǔn)確的分析出阿斯匹林和波立維對(duì)病人血小板抑制的百分比,從而為更科學(xué)的個(gè)性化抗血小板治療提供依據(jù)。4. 快速而準(zhǔn)確測(cè)定纖維溶解(Fibrinolysis)的活性。比普遍檢測(cè)檢測(cè)法(如 D-Dimers、纖維蛋白降解產(chǎn)物試驗(yàn)、優(yōu)球蛋白血塊溶解時(shí)間等)敏感準(zhǔn)確。5. 檢測(cè)血液中是否有肝素的影響,特別是對(duì)于低分子肝素的檢測(cè)是可行的。6. 診斷高凝血狀態(tài),判斷血栓風(fēng)險(xiǎn),并分析血栓原因。某些情況下,肝臟病者的凝血紊亂部分地表現(xiàn)為高凝,通過(guò) TEG 可迅速確診病人的高凝狀態(tài)。7. 檢測(cè)與凝血相關(guān)藥物作用下病人的真實(shí)的凝血狀態(tài),在很多的情況下,比如體外循環(huán)、心臟介入、ECMO 治療等,需要使病人在一種理想的低凝狀態(tài)下,TEG 可以真實(shí)的反應(yīng)這一情況。因此凝血血栓彈力圖能夠廣泛應(yīng)用于麻醉科、重癥監(jiān)測(cè)病房、器官移植(特別是肝移植)、心血管手術(shù)、急癥和創(chuàng)傷醫(yī)療中心、產(chǎn)科、神經(jīng)內(nèi)科、臨床實(shí)驗(yàn)室、血液科等科室的凝血功能監(jiān)測(cè)。TEG 的特點(diǎn)可以總結(jié)為:a)是全血、全過(guò)程的凝血監(jiān)測(cè),準(zhǔn)確判斷病人凝血的真實(shí)情況,并可直接給出明確的臨床診斷;b)根據(jù)各個(gè)參數(shù)的變化,準(zhǔn)確指導(dǎo)成分輸血和使用與凝血相關(guān)的藥物,并監(jiān)控療效;c)所有參數(shù)均為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化參數(shù),可以直接用于學(xué)術(shù)界關(guān)于凝血研究的交流使用;d)對(duì)于抗血小板藥物的藥物療效有著獨(dú)一無(wú)二的檢測(cè)結(jié)果,量化判斷藥物對(duì)病人血小板抑制的程度,為個(gè)性化治療提供依據(jù);e)操作簡(jiǎn)便,快速。結(jié)果與常規(guī)凝血檢查有良好的相關(guān)性,而且可更科學(xué)的應(yīng)用于臨床;f)成熟的技術(shù),強(qiáng)大的科研力量和完善
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