.CS2100i/CS2000i全自動凝血儀應用操作指南威士達醫療設備有限公司目錄l SYSMEX公司及威士達醫療設備有限公司簡介 3l CS2100i/CS2000i產品及性能介紹 .3l CS2100i/CS2000i常用配套試劑及使用簡介.4l CS2100i/CS2000i簡明操作流程.6l CS2100i/CS2000iFBG定標曲線設置7l CS2100i/CS2000i基本維護保養.8l CS2100i/CS2000i常見報警及處理措施.9l CS2100i/CS2000i應用問題Q&A.11Sysmex公司簡介日本SYSMEX（希森美康）株式會社是一家跨國企業，創建于1968年，原名為日本東亞醫用電子株式會社。主要從事臨床檢驗設備及試劑的開發、制造和銷售。公司總部設在日本的神戶市，現在中國、歐洲、美洲、東南亞等近三十處設有海外現地法人，并已成為日本東京、大阪證券交易所的第一家上市企業。日本SYSMEX株式會社集近四十年專業發展之經驗，以領先的科技、創意的設計和卓越的品質而成為行業先導，尤其在血液分析、凝血分析、尿沉渣分析領域更處于世界領先地位，成為全球著名的體外診斷產品制造商。在全球凝血市場占有率居于前列。威士達醫療設備公司簡介Vastec Medical Ltd.（威士達醫療有限公司）是一家專門從事臨床檢驗設備經營、開發以及國際技術合作的專業公司1993在香港成立，迄今為止已陸續在北京、天津、上海、南京、杭州、廣州、福州、昆明、成都、長沙、武漢等全國二十多城市設立了辦事處，形成了覆蓋全國的高效率服務網絡。威士達醫療有限公司本著為檢驗界提供超值產品及服務的宗旨，使威士達產品在全國廣大醫院享有良好的聲譽，并且與國內許多家知名醫院建立了長期友好的合作關系。經營的產品遍及凝血、尿液分析、微生物、生化、危重監護系統、免疫系列等臨床檢驗各領域，適用于醫院檢驗科、各類醫學院校、科研機構等實驗室。CS2100i/CS2000i產品及性能介紹CS-2100i/CS-2000i是以希森美康迄今為止在血凝分析領域所積累的經驗和取得的成績為基礎，根據實驗室的各種需求率先開發的“新概念設備”。她集凝固法、發色底物法、免疫比濁法以及凝集法四種測定原理為一身，在標本處理能力、檢測準確性、可操作性方面均有新的突破。作為新時代的凝血綜合分析系統，CS-2100i/CS-2000i以其出色的靈活性和可維護性，在血凝檢測領域中發揮重要作用。CS多達四種方法學檢測原理，是目前方法學最多，開展項目最全的凝血儀:1. 凝集法: PT, APTT, Fbg, TT, Extrinsic Factors (II, V, VII, X), Intrinsic Factors (VIII, IX, XI, XII), PS, PC2. 發色底物法: AT-III, PLG, 2-AP, PC, FXIII, PAI3. 免疫比濁法: D-Dimer, vWF:Ag4. 聚集法: vWF: Rco, 血小板聚集CS2100i/CS2000i常用配套試劑及使用簡介常用SIEMENS血凝試劑目錄產品貨號產品名包裝用途OUHP29Thromborel S10 x 4mlPT試劑OUHP4910 x 10mlB4218-1Actin10 x 2mlAPTT試劑B4218-210 x 10mlORHO37Calcium Chloride（0.025 mol/l）10 x 15ml氯化鈣溶液B4233-15Fibrinogen Determination Reagent Kit1 kitFbg試劑盒（包含定標血漿）B4233-25Thrombin Reagent10 x 1mlFbg凝血酶試劑B4233-2710 x 5mlB4234-25Owrens Veronal Buffer10 x 15 ml緩沖液OWHM13Test Thrombin Reagent10 x 5 mlTT試劑owwr15Berichrom ATIII500 tests抗凝血酶III試劑ORKL17Standard Human Plasma10 x 1ml通用標準血漿OQWW11Dimer Assay Plus150 testsD-二聚體試劑OQXA11Dimer Standard Plasma6 x 1mlD-二聚體標準血漿291070Ci-Trol 110 x 1ml定值質控血漿水平1291071Ci-Trol 210 x 1ml定值質控血漿水平2291072Ci-Trol 310 x 1ml定值質控血漿水平3OQKA11Dimer Ci-trol 16 x 1mlD-二聚體質控血漿 1OQKB11Dimer Ci-trol 26 x 1mlD-二聚體質控血漿 2ORKE41Control Plasma N10 x 1ml正常水平質控NOUPZ17Control Plasma P10 x 1ml異常水平質控P試劑使用簡介測試項目試劑名組成及規格復溶物及方法復溶后穩定性PTThromborel S10 x 4ml(干粉）10 x 10ml(干粉）蒸餾水4ml，37穩定30分鐘蒸餾水10ml，37穩定30分鐘2-8 5天APTTActin10 x 2ml（液體）10 x 10ml（液體）直接使用，臨用前輕微混勻2-8 7天氯化鈣溶液Calcium Chloride10 x 15ml（液體）直接使用2-25 可至有效期FBGDade Fibrinogen Determination ReagentsThrombin Reagent 1x6mlFibrinogen Standard 1x1mlOwrens Veronal Buffer3x15ml蒸餾水1ml，37穩定30分鐘蒸餾水1ml，37穩定30分鐘直接使用2-8 5天2-8 4小時2-8 6月Dade Thrombin reagent10x1ml （干粉）10x5ml （干粉）蒸餾水1ml，37穩定30分鐘蒸餾水5ml，37穩定30分鐘2-8 5天Owrens Veronal Buffer10x15ml （液體）直接使用2-8 6月TTTest Thrombin ReagentTest Thrombin 10x5ml（干粉）Buffer Solution 1x50ml（液體）用盒內自帶的緩沖液5ml溶解干粉試劑，37穩定30分鐘2-8 7天ATIIIBerichrom ATIIIThrombin Reagent 6 x 15 mlSubstrate Reagent 6 x 3 mlTris Buffer solution1 x 100 ml15ml自帶復溶液溶解Thrombin Reagent，室溫穩定30分鐘后使用3ml蒸餾水溶解Substrate Reagent2-8 4周2-8 6周2-8 6月D-DimerDimer Assay PlusAccelerator 6x5 mlReagent 6x4 mlReagent Diluent 1x25ml5ml蒸餾水溶解Accelerator 15-25穩定15分鐘使用4mlReagent Diluent溶解Reagent 15-25穩定5分鐘使用2-8 5天15-25 5天2-8 12周定值質控血漿水平1Ci-Trol 110 x 1ml（干粉）蒸餾水1ml，室溫穩定15分鐘，臨用前小心混勻8小時內使用定值質控血漿水平2Ci-Trol 210 x 1ml（干粉）蒸餾水1ml，室溫穩定15分鐘，臨用前小心混勻8小時內使用定值質控血漿水平3Ci-Trol 310 x 1ml（干粉）蒸餾水1ml，室溫穩定15分鐘，臨用前小心混勻8小時內使用D-二聚體質控血漿 1Dimer Ci-trol 16 x 1ml（干粉）蒸餾水1ml，室溫穩定15分鐘，臨用前小心混勻8小時內使用D-二聚體質控血漿 2Dimer Ci-trol 26 x 1ml（干粉）蒸餾水1ml，室溫穩定15分鐘，臨用前小心混勻8小時內使用正常水平質控NControl Plasma N10 x 1ml（干粉）蒸餾水1ml，室溫穩定15分鐘，臨用前小心混勻8小時內使用異常水平質控PControl Plasma P10 x 1ml（干粉）蒸餾水1ml，室溫穩定15分鐘，臨用前小心混勻8小時內使用CS2100i/CS2000i簡明操作流程打開電源開關前的檢查 1. 檢查廢液瓶是否清空及洗液瓶是否灌滿2. 確保IPU(信息處理電腦)是否與主機網線連接可靠。3. 丟棄垃圾箱中用過的反應杯，加入適量的干凈的反應杯。4. 將準備好的試劑放在試劑架上，確保試劑條碼清淅，試劑條碼與試劑架缺口對準。打開電源 開機順序：IPU(信息處理電腦) 進入CS應用軟件界面打開儀器電源單元（左側）。開機后的維護： Maint.Rinse Probe 此步驟是每天開機后都必須要做的。試劑準備：Reagent Change/Add 待試劑倉燈變綠打開試劑倉蓋放入試劑并蓋好倉門自動掃描試劑。如掃描后相應試劑位上顯示“？”號：點擊“？”號試劑位Edit Reagent Info. 儀器確認試劑；如試劑不能使用：Lot Group Settings在相應試劑右側空白格處單擊使其打勾，使儀器中的試劑生效。樣本檢測及結果查詢 樣本分析：主界面點擊Order Order Entry 輸入病人樣本編號及相應的項目 Enter OK Start連續進樣：在Order 中選擇Next 進入空白架中ID號輸入完畢后如果前面標本吸樣還未結束點擊SAVE ，如前面吸樣結束但還在分析點擊StartContinue急診分析：主界面下：STATSet/Remove Sample待急診蓋燈變綠，打開急診蓋放入急診樣本輸入編號及項目Regist蓋上急診蓋Start查看數據：主界面下：Joblist 查看儀器的檢測結果關機前的工作 關機前的維護： Maint.Rinse Probe 此步驟是每天關機前都必須執行的。關機程序 確認屏幕左下端顯示為綠色不閃動時的“Ready”狀態，然后執行關機程序：主界面點擊Shutdown Turn off the Main Unit power按下OK 鍵后，將根據關機程序自動關機再關閉IPU畫面并關閉電腦如果無需冷卻試劑，請關閉主機電源；如果仍需繼續冷卻試劑，請勿關閉主機電源。CS2100i/CS2000i定標曲線設置操作步驟： 1、按下工具欄中的Order鍵，出現分析指令畫面。2、按下畫面右上方Switch Order鍵，出現對話框，選擇Hold Calib.Curve Order。3、出現定標曲線窗口，選擇所要定標的項目，并點擊（在下欄，通過 more鍵選擇）。4、點擊相應項目后出現定標曲線設置對話框（如圖），分別輸入試劑批號及定標品的定值。5、在完成試劑批號的確認后，按“OK”完成。6、在定標曲線窗口下按“Regist”，完成注冊后按“START”鍵，執行定標曲線分析。7、執行完分析后，按工具欄中的Calid.Curve鍵，進入定標曲線界面。8、按“Change”鍵，選擇已分析完的項目（對應的批號），按Validate鍵使定標曲線生效。9、當試劑批號發生改變時，需重新建立該批號的定標曲線。CS2100i/CS2000i基本維護保養每日維護 1. 開機后和關機前必須清洗針Maint.Rinse ProbeOK 主要是預防堵針2. 丟棄用過的反應杯（清洗反應杯垃圾箱，并將反應杯垃圾箱完全擦干）3. 丟棄廢品（丟棄試劑倉中空試劑瓶，及時清空廢液桶里的廢液）4. 取走試劑盤，擦拭其中的冷凝水（請在關閉電源的狀態下操作）5. 檢查并丟棄防逆流室中的液體每周維護 1. 用清洗洗液灌注水路中管道:Maint.Primer OK 2. 清潔儀器（請不要使用除水及中性清潔劑以外的清洗液）每年維護 1. 清洗洗液桶內部，清洗管路以及管路中的過濾裝置2. 清潔傳動軌道并上潤滑油3. 用酒精擦拭試劑針按需維護 1. 調節壓力Maint.MorePressure AdjustmentOK（當發生壓力有關的錯誤時）2. 特殊光路調節Maint.Lamp Calibration OK（當更換燈泡或提示需要校準時）CS2100i/CS2000i常見報警及處理措施CS2100i/CS2000i應用問題Q&A樣本采集 Q1：凝血標本如何正確采集？A1：儀器測定標本的準確性，除了和儀器本身的精度有關外，還與采集標本和存放時間有很重要的關系。1、抗凝劑：109mmol/L的枸櫞酸鈉與血液的比例為1:9,并且應根據HCT（見Q2）調整抗凝劑比例。推薦使用真空管。注意避免用130mmol/L（3.8%）的枸櫞酸鈉抗凝管采集凝血標本，因為過多抗凝劑會導致PT，APTT的檢測結果假性延長。2、采血盡量做到 “一針見血”，止血帶壓力要小，束縛時間要短，選用20G或21G號針頭。采集完畢后立即與抗凝劑混勻，同時要避免用力振搖。3、標本的運輸與保存：標本應帶蓋存放；存放時間：2-8，4小時；-20，2周；-70，6個月。如標本放置時間過長，會使檢測結果受到影響。4、標本應在采集后2小時內離心，離心力為2000-2500g，離心15分鐘，4小時內測定完畢。5、如果遇到嚴重溶血標本的情況，在排除患者自身原因后，應重新采血。因為溶血標本紅細胞破裂，血紅蛋白釋放，會影響整個凝血過程，使檢驗結果不準確。Q2：在標本采集中最容易發生的錯誤有哪些？A2：一般有以下幾種情況：1、當紅細胞壓積超過55%或低于25%，會引起凝固時間延長對策：按調整公式重新調抗凝劑的體積：C=1.8510-3100-HVC=枸櫞酸鈉的體積（ml）V=全血的體積H=紅細胞壓積2、當標本溶血是，會引起PT，APTT輕微縮短對策：應重新采集標本3、采血不順利，混入組織液，因子被激活，引起PT，ATTP結果延長對策：應重新采集4、有肝素污染或用血氣管做凝血實驗，會造成APPT結果假性延長對策：應嚴格進行采集PT測定 Q3：凝血酶原時間（PT）測定幾種報告方式有何不同？A3：PT結果的報告方式包括1、 秒數2、 PT比值：即病人PT測定秒數以正常平均PT數的比值3、 活動度：在以下不同稀釋度的血漿制成的PT標準曲線上按病人秒數讀取相應的活動度4、 國際標準化比值INR。Q4：何謂INR值及ISI？A4：從PT檢測創立起，人們就注意到不同凝血質（凝血活酶）給PT結果帶來室間室內的不可比性。后研究發現，一種試劑所測標本的PR值（凝血酶原比值）的對數值和另一試劑所測同一標本的PR的對數值呈線性關系，即BlogPR1=AlogPR2,PR1B=PR2A,其中A,B是與試劑有關的常數，所以用任一試劑測同一標本，所得PR的一個與試劑有關的常數次方，所得的數值是一定值，人們把這一定值取名為國際標準化比值（INR），其中與試劑有關的常數取名為國際敏感度指數（ISI）。Q5：INR如何應用？A5：INR系統主要應用于口服抗凝劑患者的用藥監測上。因為不同的PT試劑組織凝血活酶的來源不同，試劑敏感性不同導致測定同一標本PT結果的沒有可比性，前面三種報告方式均無解決這一問題，INR的報告方式則解決了這一問題。INR=PTRISI，其中的ISI值是指PT試劑的國際敏感度指數，理論上通過ISI標定后的試劑，在一定范圍內檢測同一標本的PT時，所得INR值是相等的。這樣就建立了PT結果的可比性。使用INR應注意幾點;1、 ISI值越高，其試劑的靈敏度越小，INR變異越大，所以口服抗凝劑檢測時應盡可能選用ISI值接近1.0的試劑，以獲得較好的精準性；2、 INR的局限性不適用于以下情形：口服抗凝劑初期的病人血漿，肝病凝血因子缺陷病人血漿，非抗凝治療而PT延長的病人血漿。Q6：進行PT測定的同時如何演算纖維蛋白原濃度值？A6：PT測定完后纖蛋白原會轉變成纖維蛋白，其形成的濁度與纖維蛋白質的含量成正比，因此不需要任何試劑，即可由產生的濁度直接推算出纖維蛋白原的含量。但演算法的應用必須注意一個前提:當血漿的Fbg含量在正常范圍時，該法與經典的Clauss法無顯著差異，但Fbg含量超出正常范圍時，它的結果與Clauss法相差較大，所以演算法只能作為篩選試驗，如果Fbg含量超出正常仍然需要更準確的Clauss定量法檢測。Q7：當換新的PT試劑時，在CS上如何輸入新的ISI值？A7：主菜單Calib curveChangePTEditPT INR在ISI Value中輸入新的值（根據試劑說明書找到對應儀器的ISI值），按OK確認，最后點擊Validated保存即可。APTT測定 Q8：做APTT臨床標本時發現結果延長？A8：對此問題分析如下：1、 判斷APTT是否延長，首先檢查當天質控情況，每天兩個水平的質控結果都必須在本實驗室的質控范圍中，排除儀器和試劑系統錯誤，所以發現延長時一定要用質控確認。2、 APTT受氯化鈣、血漿溫度、育溫時間影響較大，所以應嚴格可控制溫度及育溫時間，試劑在儀器中不使用或放入冰箱時，一定要將瓶口緊閉，以免蒸發造成試劑濃度增高。氯化鈣是否反復加入，容器是否受污染等因素。3、 該試劑嚴禁凍溶，最佳保存溫度為2-6冷藏，盡量縮短在室溫的放置及運輸的時間，尤其是室內溫度較高時，并嚴格控制在有效期內使用。4、 正確采集臨床標本（與抗凝劑比例等）詢問臨床是否使用影響血凝的藥物。5、 內源性凝血因子缺乏。Q9:做APTT臨床標本時發現結果縮短?A9:對此問題分析如下：檢查試劑是否污染，測試杯是否反復使用，試劑保存時是否加蓋，抽血是否順利規范，標本體積是否符合規定（過多或過少），需要用質控血漿確認是否失控。FIB測定 Q10:FIB測試中出現測定值過高或過低，為什么？A10：FIB定標的好壞直接影響測定值的準確性，所以嚴禁各批號間的試劑混用，更換新批號時必須重新定標，定標后的r值至少在0.995以上方可使用。使用FIB緩沖液時必須丟棄原來的已使用過的剩余液體，加入新的未使用過的試劑。Q11:在CS上如何制作FIB的標準曲線？A11：FBG定標曲線步驟：1、按下工具欄中的Order鍵，出現分析指令畫面。2、按下畫面右上方Switch Order鍵，出現對話框，選擇Hold Calib.Curve Order。3、出現定標曲線窗口，選擇所要定標的項目，并點擊（在下欄，通過 more鍵選擇）。4、輸入項目后出現定標曲線設置對話框，分別輸入試劑批號及定標品的靶值。5、在完成試劑批號的確認后，按“OK”完成。6、在定標曲線窗口下按“Regist”，完成注冊后按“START”鍵，執行定標曲線分析。7、執行完分析后，按工具欄中的Calid.Curve鍵，進入定標曲線界面。8、按“Change”鍵，選擇已分析完的項目（批號），按Validate鍵使定標曲線生效。9、當試劑批號發生改變時，需重新建立該批號的定標曲線。質量保證 Q12:為什么復溶用的水對確保血凝實驗的結果準確性非常重要？A12:復溶用的水是保證試劑質量的重要一關，通常建議用戶應使用蒸餾水或pH為6.0-7.0的去離子水，因為1 pH增高會使凝固時間延長2水中有氨，可引起V因子迅速破壞，使PT時間延長3水變渾濁常表明污染或鈣離子存在4水中含保護劑、抗生素、抗體或其它添加劑時，不能用于復溶試劑Q13:為什么要強調建立本實驗室的參考范圍？A13:因為參考范圍是隨著儀器、試劑、年齡、性別以及環境等因素而變化的，作為操作者應學會確定參考值的程序，并根據實驗室的實際情況建立自己的參考范圍。值得注意的是，試劑說明書上只是提供建議范圍，這是試劑廠家根據當地人群和有限的儀器數據統計的結果，不是能真正反應實驗室的實際情況（特別是進口試劑）。Q14:普通實驗室如何建立適合本實驗室的正常參考值？A14:建立正常參考值的方法如下：收集20-50位未服藥的健康人（性別，年齡比例合適）的抗凝血漿（采用方法與病人同），值范圍X3SD，消除在界限外的原始數據，重新計算平均值和SD，可接受的正常參考值范圍為X2SD，它將包括95%的正常人。Q15:當凝血測試中出現異常結果，作為實驗室人員應怎么做？A15：作為實驗人員，當凝血測試出現異常結果，主要從以下幾方面考慮。當得到異常結果時，應首先考慮用新的質控檢查一遍，分析如下：質控正常：考慮標本方面的因素1標本本身的特點詢問臨床2標本的采集是否正確重新送檢3標本的處理是否正確改正或重新送檢質控異常：考慮儀器和試劑系統問題1確認試劑的復溶、存儲是否正確換新試劑2確認儀器的檢測程序是否正確檢查Test Protocol3確認儀器的工作環境、狀態。Q16:如何使用試劑和質控品進行自查A16：儀器配套的定值質控品（Ci-Trol 1，2&3）是Siemens提供的帶靶值范圍的血漿，可用來監測儀器及試劑的情況。當質控品失控，可從以下幾方面分析原因：1試劑：放置嚴格按試劑說明書的要求 復溶是否用蒸餾水或去離子水，是否有污染的可能 儲存1儲存溫度嚴格按試劑說明書 2試劑不用時，應加蓋蓋子，儲存于2-8 3正確使用廠家提供的配套清洗液2每個實驗室應建立自己的質控范圍質控平均值2SD或2.5SD，當試劑、質控品批號更改時，必須重新建立質控范圍。如果質控結果失控，則應查明原因后再發病人報告。Q17：質控正常而凝血實驗檢測結果仍異常時，應怎么做？A17：當出現可疑結果時，在確保試劑、質控和采樣過程無誤后，可采取如下步驟：1核對檢測程序（Test Protocol），試劑量、樣本量、孵育時間、反應時間、激活時間等是否與廠家推薦一致；2將可疑標本重復檢測一次；3采用其它方法測定，用手工法或機械方法檢測，對比結果。4詢問臨床，結合病人的實際情況（疾病、用藥等）作相應判斷。Q18:如何正確使用廠家提供的配套清洗液？A18:CLEAN是Sysmex血凝儀上最常用的清洗液，主要用來清洗樣本針和試劑針。時間用久了可能會在瓶底出現絮狀沉淀，影響洗針。合理的使用方法是用清潔容器倒入一定量的洗液，一次加入的量不宜過多，標本量大時可每隔4小時更換一次。更換時將瓶內剩余洗液倒去，重新倒入新洗液。CA CLEAN含次氯酸成分，由于不正確的清洗液會對樣本針等配件造成不可修復的損壞，所以我們要求用戶選擇原廠提供的清洗液。Q19:試劑死腔量、液面高度說明？A19:由于試劑針在試劑使用完時會碰到容器底部造成針的非正常損壞（針帶有液面感應器），為了避免發生這種情況，儀器特別設置了一定高度的死腔量。CS儀器可靈活選用各種規格的試劑容器，同時試劑瓶15度傾斜設計進一步減小死腔量，所以用戶可以通過選用小直徑的容器來減少試劑的殘留。但要注意：一定要在軟件試劑設置菜單中更改試劑容器品種，否則可能會造成吸液量不足，因為大直徑容器針下到液面下的深度淺，而小直徑容器針下到液面下的深度深。D-二聚體檢測 Q20：為什么要檢測D-二聚體? A20：D-二聚體是體內纖溶系統被激活時降解交聯的纖維蛋白