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文檔簡介

土壤銨態氮的測定(KCl浸提靛酚藍比色法)方法原理:用2mol/L KCl 溶液浸提土壤,把吸附在土壤膠體上的NH4+浸提出來。土壤浸出液中的銨態氮在強堿性介質中與次氯酸鹽和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚藍,溶液的顏色很穩定。在含氮0.05-0.5mg/L的范圍內,吸光度與銨態氮含量稱正比,可用比色法測定。主要儀器:往復震蕩機 分光光度計試劑配制:1. 2mol/L KCl 溶液:稱取149.1g氯化鉀(KCl,化學純)溶于水中,稀釋至1000ml。2. 苯酚溶液:稱10g苯酚和亞硝基鐵氰化鈉100mg稀釋至1000ml。此試劑不穩定,須貯于棕色瓶中,4冰箱保存。3.次氯酸鈉堿性溶液:稱取氫氧化鈉10g、Na2HPO4.7H2O 7.06g、Na3PO4.12H2O 31.8g和52.5g/L次氯酸鈉(即含5%有效氯的漂白粉溶劑)10ml 溶于水中,稀釋至1000ml,貯于棕色瓶中,在4冰箱保存。4.掩蔽劑:將400g/L的酒石酸鉀鈉與100g/L的EDTA二鈉鹽溶液等體積混合。每100ml混合液中加入10mol/L氫氧化鈉溶液0.5ml。5.銨態氮標準液配制:稱取干燥的硫酸銨 0.4717g溶于水中,洗入容量瓶后定容至1000ml,制備成含銨態氮 100ug/mL 的貯存溶液;使用前加水稀釋40倍,得2.5 ug/mL標準溶液。操作步驟:稱取過20目篩的風干土樣5g,加入氯化鉀溶液50ml,振蕩1小時,取出靜置,吸取上清液10ml進行分析(如果不能在24h內進行分析,用濾紙過濾懸濁液儲存在冰箱中備用)。將10ml上清液吸入50ml試管內,加5ml苯酚溶液,5ml次氯酸鈉堿性溶液,搖勻。在20室溫下放置1小時,加掩蔽劑1ml以溶解可能產生的沉淀物,然后用水定容至刻度,在625納米處比色,讀取吸光值。標準曲線繪制:分別吸取0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml銨態氮標準液于50ml試管中,各加10ml氯化鉀溶液,加5ml苯酚溶液,5ml次氯酸鈉堿性溶液,搖勻。在20室溫下放置1小時,加掩蔽劑1ml然后用水定容至刻度,在625納米處比色,讀取吸光值。注:顯色后在20左右放置1小時,再加入掩蔽劑。過早加入會使顯色反應很慢,藍色偏弱;加入過晚,則生成的氫氧化物沉淀可能老化而不易溶解。土壤硝態氮的測定試劑配制:1. 2mol/L KCl 溶液:稱取149.1g氯化鉀(KCl,化學純)溶于水中,稀釋至1000ml。2. KNO3 標液配制: 100ug/mL KNO3貯存液,稱0.7221g KNO3溶于1000ml水中;稀釋此溶液10倍即得10ug/mL KNO3標準液。3.10% H2SO4操作步驟:1.與銨態氮一塊浸提,共用浸提液。2.吸取土壤浸提液5ml(用KCl溶液補至10ml)或10ml于50ml試管中,加10% H2SO4 1ml,然后定容至刻度,分別在210和275納米下比色,讀取吸光值。標準曲線繪制:分別吸取KNO3標準液0、1、2、4、6、8、10ml

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