2020北京PCR考試試題及答案

一、單項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術的主要作用是（）A.基因表達分析B.基因克隆C.核酸擴增D.蛋白質合成答案：C2.在PCR反應中，起到催化合成新DNA鏈作用的是（）A.引物B.dNTPC.Taq酶D.模板DNA答案：C3.PCR反應的變性溫度一般為（）A.50-55℃B.72℃C.94-95℃D.60-65℃答案：C4.以下哪種物質不是PCR反應的基本成分（）A.RNA酶B.模板DNAC.引物D.dNTP答案：A5.PCR反應中引物的長度一般為（）A.10-20個核苷酸B.1-5個核苷酸C.30-50個核苷酸D.50-100個核苷酸答案：A6.以下關于PCR的描述錯誤的是（）A.可以特異性擴增目的基因B.反應需要在一定的緩沖體系中進行C.不需要模板即可進行反應D.具有很高的靈敏度答案：C7.在PCR反應中，延伸階段的溫度通常為（）A.94-95℃B.50-55℃C.72℃D.60-65℃答案：C8.用于PCR反應的模板DNA可以來源于（）A.基因組DNAB.質粒DNAC.cDNAD.以上都可以答案：D9.如果PCR擴增沒有得到預期的產物，可能的原因不包括（）A.引物設計錯誤B.模板量過多C.反應體系中沒有加入Taq酶D.退火溫度過低答案：D10.PCR技術是誰發明的（）A.KaryMullisB.JamesWatsonC.FrancisCrickD.RosalindFranklin答案：A二、多項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應體系包括以下哪些成分（）A.模板DNAB.引物C.Taq酶D.dNTPE.緩沖液答案：ABCDE2.影響PCR擴增特異性的因素有（）A.引物特異性B.退火溫度C.模板純度D.Taq酶的活性E.延伸時間答案：ABC3.以下哪些是PCR技術的應用領域（）A.遺傳病診斷B.病原體檢測C.基因分型D.法醫學鑒定E.轉基因檢測答案：ABCDE4.在設計PCR引物時，需要考慮的因素有（）A.引物長度B.引物的GC含量C.引物的特異性D.引物的退火溫度E.引物的溶解性答案：ABCD5.以下關于Taq酶的說法正確的是（）A.具有熱穩定性B.是一種DNA聚合酶C.催化dNTP合成DNA鏈D.可以耐受高溫變性步驟E.對引物有較高的特異性要求答案：ABCDE6.PCR反應中可能出現的問題有（）A.非特異性擴增B.無擴增產物C.擴增產物量過少D.擴增產物量過多E.引物二聚體形成答案：ABCDE7.以下關于PCR反應緩沖液的作用說法正確的是（）A.提供合適的pH環境B.提供必要的離子C.穩定Taq酶活性D.促進引物與模板結合E.促進dNTP合成DNA鏈答案：ABC8.以下哪些可以作為PCR反應的模板（）A.血液中的DNAB.組織中的DNAC.細胞中的RNA（先反轉錄為cDNA）D.細菌中的DNAE.病毒中的DNA答案：ABCDE9.為了提高PCR反應的特異性，可以采取的措施有（）A.優化引物設計B.提高退火溫度C.降低模板濃度D.減少引物量E.更換Taq酶答案：ABD10.在PCR反應中，引物的作用有（）A.提供起始合成的位點B.決定擴增的特異性C.引導Taq酶合成DNA鏈D.提高反應的靈敏度E.穩定反應體系答案：ABC三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR反應可以在常溫下進行。（）答案：錯誤2.引物在PCR反應中是可以重復使用的。（）答案：錯誤3.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反應。（）答案：錯誤4.PCR反應中，退火溫度越高，特異性越好。（）答案：正確5.只要有足夠的dNTP，PCR反應就可以無限進行。（）答案：錯誤6.模板DNA的純度對PCR反應結果沒有影響。（）答案：錯誤7.在PCR反應中，延伸時間越長，擴增產物就越長。（）答案：錯誤8.引物的GC含量越高越好。（）答案：錯誤9.PCR技術只能用于檢測DNA，不能用于檢測RNA。（）答案：錯誤10.一個好的PCR反應體系不需要進行優化就可以得到理想的結果。（）答案：錯誤四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述PCR反應的基本原理。答案：PCR反應基于DNA的半保留復制原理。以DNA為模板，在Taq酶作用下，以四種dNTP為原料，在引物的引導下，經過變性（使模板DNA雙鏈解開）、退火（引物與模板結合）、延伸（合成新的DNA鏈）三個步驟的多次循環，實現特定DNA片段的大量擴增。2.請說明引物設計的基本原則。答案：引物長度一般10-20個核苷酸；GC含量適中（40%-60%）；引物特異性要強，避免與非目的序列結合；引物之間不能形成二級結構，如引物二聚體；引物的退火溫度要合適，可根據公式計算。3.簡述PCR反應中出現非特異性擴增的原因及解決方法。答案：原因：引物特異性差、退火溫度低、模板不純等。解決方法：重新設計特異性好的引物、提高退火溫度、純化模板等。4.說明Taq酶在PCR反應中的作用。答案：Taq酶是一種熱穩定的DNA聚合酶。在PCR反應中，它以dNTP為原料，按照模板DNA的序列，在引物引導下合成新的DNA鏈，使PCR反應得以進行。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論PCR技術在新型冠狀病毒檢測中的應用及意義。答案：應用：可特異性擴增新冠病毒的核酸片段用于檢測是否感染。意義：快速、靈敏地檢測病毒，有助于早期診斷，控制疫情傳播，對患者的隔離、治療以及疫情防控策略的制定有著重要意義。2.如何優化PCR反應體系以提高擴增效率？答案：優化引物設計確保特異性和合適的退火溫度；調整模板和引物濃度；選擇合適的Taq酶；優化反應緩沖液成分；精確控制反應的溫度和時間等。3.請闡述PCR技術在遺傳病診斷方面的重要性。答案：可擴增與遺傳病相關的基