標(biāo)準(zhǔn)解讀

《DB31/T 823-2014 豬尿中賽庚啶殘留量的測(cè)定 酶聯(lián)免疫吸附法與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》是一項(xiàng)地方標(biāo)準(zhǔn),由上海市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了使用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)兩種方法來(lái)檢測(cè)豬尿樣本中賽庚啶殘留的具體步驟和技術(shù)要求。

對(duì)于酶聯(lián)免疫吸附法部分,標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)描述了樣品處理過(guò)程、試劑配制方法以及實(shí)驗(yàn)操作流程。它指出,首先需要對(duì)收集到的新鮮或冷凍豬尿進(jìn)行適當(dāng)稀釋,并加入特定抗體以形成抗原-抗體復(fù)合物。隨后通過(guò)洗滌去除未結(jié)合物質(zhì),再加入酶標(biāo)二抗,進(jìn)一步生成可被儀器讀取信號(hào)的底物反應(yīng)產(chǎn)物。根據(jù)吸光度值的變化計(jì)算出樣品中的賽庚啶濃度。

而在液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法方面,則強(qiáng)調(diào)了更為精確復(fù)雜的分析手段。此方法要求先將待測(cè)樣品經(jīng)過(guò)固相萃取柱凈化濃縮,然后利用高效液相色譜系統(tǒng)分離目標(biāo)化合物,最后采用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)其進(jìn)行定性和定量分析。整個(gè)過(guò)程中需嚴(yán)格控制流動(dòng)相組成、流速等條件,并設(shè)置合適的離子源參數(shù)以獲得最佳檢測(cè)效果。

這兩種方法各有特點(diǎn):ELISA操作簡(jiǎn)便快速但靈敏度相對(duì)較低;而LC-MS/MS雖然設(shè)備成本較高且操作復(fù)雜,卻能提供更高精度的結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)還明確了不同方法適用范圍及最低檢出限等內(nèi)容,為相關(guān)檢測(cè)工作提供了科學(xué)依據(jù)。


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  • 2014-07-18 頒布
  • 2014-10-01 實(shí)施
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DB31/T 823-2014豬尿中賽庚啶殘留量的測(cè)定酶聯(lián)免疫吸附法與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法_第1頁(yè)
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DB31/T 823-2014豬尿中賽庚啶殘留量的測(cè)定酶聯(lián)免疫吸附法與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法-免費(fèi)下載試讀頁(yè)

文檔簡(jiǎn)介

ICS65120

B46.

備案號(hào)43080—2014

:

上海市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB31/T823—2014

豬尿中賽庚啶殘留量的測(cè)定

酶聯(lián)免疫吸附法與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

Determinationofcyproheptadineresiduesinswineurine—

ELISAmethodandLC-MS/MSmethod

2014-07-18發(fā)布2014-10-01實(shí)施

上海市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

DB31/T823—2014

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由上海市畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位上海市獸藥飼料檢測(cè)所上海農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院上海市質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)技術(shù)

:、、

研究院

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人黃士新吳劍平張?chǎng)晤櫺缽埥至绽畹つ輫?yán)鳳周悅榕

:、、、、、、、、。

DB31/T823—2014

豬尿中賽庚啶殘留量的測(cè)定

酶聯(lián)免疫吸附法與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬尿中賽庚啶殘留量的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

-。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬尿中賽庚啶殘留量的篩選與確證第一法測(cè)定結(jié)果大于檢測(cè)限需要使用第二法進(jìn)

,,

行確證

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

第一法酶聯(lián)免疫吸附法

3方法原理

樣品中賽庚啶與酶標(biāo)記的賽庚啶競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合微孔中的賽庚啶特異性抗體結(jié)合體與顯色劑生成有色

,

物質(zhì)在產(chǎn)生最大吸收其吸光度與賽庚啶含量成正比用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算可得樣品中賽庚啶

,450nm,,

含量

4試劑和材料

除方法另有規(guī)定外試劑均為分析純實(shí)驗(yàn)室用水符合中二級(jí)水的規(guī)定

,,GB/T6682。

41賽庚啶酶聯(lián)免疫試劑盒保存使用前回溫至

.:2℃~8℃,23℃~25℃。

42賽庚啶標(biāo)準(zhǔn)溶液

.:0ng/mL、0.05ng/mL、0.1ng/mL、0.2ng/mL、0.4ng/mL、0.8ng/mL。

43濃縮洗液含吐溫的磷酸鹽緩沖液

.:(PBST)。

44濃縮酶標(biāo)記物酶標(biāo)記的賽庚啶

.:。

45工作洗滌液將濃縮洗液用二級(jí)水稀釋后可得

.:(4.3)。

46酶標(biāo)工作液將濃縮酶標(biāo)記物用工作洗滌液稀釋后可得

.:(4.4)(4.5)。

47顯色劑四甲基聯(lián)苯胺

.:(TMB)。

48反應(yīng)終止液的鹽酸溶液

.:1mol/L。

5儀器和設(shè)備

51酶標(biāo)

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