DB62/T2686—2023羊巴氏桿菌病防治技術規范2023-09-25實施2023-09-25實施I本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件代替DB62/T2686-2016《羊巴氏桿菌病防治技術規范》,與DB62/T2686-2016相比，除結構調整和編輯性改動外，主要技術變化如下：a)刪除了引言；b)更改了規范性引用文件；c)增加了實驗室診斷中的PCR鑒定；增加了PCR鑒定所需的引物序列；增加了種屬PCR及分d)增加了結果判定；e)修改了藥物治療。本文件由甘肅省農業農村廳提出并監督實施。本文件由甘肅省動物衛生標準化技術委員會歸口。本文件起草單位：甘肅農業大學、甘肅省動物疫病預防控制中心、甘肅省畜牧技術推廣總站、碌曲縣動物疫病預防控制中心、甘肅省綿羊繁育技術推廣總站、靜寧縣畜牧獸醫中心雷大畜牧獸醫站、渭源縣慶坪鎮畜牧獸醫站、碌曲縣瑪艾鎮畜牧獸醫工作站、臨澤縣農業農村局、定西市岷縣禾馱鎮畜牧獸醫工作站、臨澤縣蓼泉鎮畜牧獸醫工作站、臨澤縣新華鎮畜牧獸醫工作站、山丹縣動物疫病預防控制中心、山丹縣東樂鎮農業農村綜合服務中心。本文件主要起草人：王文莉、李巖、馬胡賽、王鵬程、黃耀華、戴雄雄、張芳玲、索南卓瑪、王耀東、包蘇琴、崔家仁、馬吉軍、楊明國、程博、馬應舉、王新武、張寶林。本文件所代替文件的歷次版本發布情況為：——2016年首次發布為DB62/T2686-2016,本次為第一次修訂。本文件由甘肅省動物疫病預防控制中心解釋。12規范性引用文件僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本GB/T27530牛出血性敗血病診斷技術NY/T5030無公害農產品獸藥使用準則中華人民共和國獸藥典(2020年版)4.1流行特點多殺性巴氏桿菌隨患病動物分泌物和排泄物排出體外，主要經消化道感染，也可經呼吸道感染(飛沫傳播),皮膚、黏膜傷口也可感染。在牧區，吸血昆蟲叮咬也是傳播疾病的重要途徑。健康帶菌羊在4.1.4發病季節2一年四季均可發，氣候寒冷(冬春)、悶熱潮濕的季節(6月～8月)多發。病羊精神沉郁，食欲廢絕，體溫升高至41℃~42℃。呼吸急促、咳嗽、鼻孔常有出血，有時血液混4.3.4PCR鑒定3多殺性巴氏桿菌屬特異性16SrRNA基因、種特異性KMT1及莢膜基因capA、capB、cap引物序列應按照表1合成。表1引物序列信息表基因引物引物序列(5'→3')片段大小退火溫度FACGCGTCGACAGAGTTTGATCCTGRCGCGGATCCGCTACCTTGTFRFRFRFRFRFAATCGGAGAACGCAGAAATR4.3.4.2多殺性巴氏桿菌種的PCR鑒定將染色鑒定為可疑多殺性巴氏桿菌的菌株在固體培養基上純化，取細菌培養物2mL,用試劑盒提取DNA模板1μL,無菌無酶水補至總體積25μL。反應條件為：預變性95℃,5min;擴增循環30×(95℃60s,55℃30s,72℃60s);延伸72℃7min。PCR擴增產物在1.5%瓊脂糖凝膠中進行電泳。KMT1基因擴增產物大小為460bp。對KMT1基因PCR陽性的樣品進一步用相同的方法進行5個莢膜型的鑒定。5結果判定根據4.1流行特點、4.2臨床癥狀及病理變化可做出初步診斷，確診需按照4.3進行實驗室診斷。6.1定期預防接種，春秋兩季用市售合格的羊巴氏桿菌疫苗進行預防接種。6.2緊急預防接種，發生本病后，對同群羊進行緊急免疫接種。6.3加強飼養管理，提高飼料營養水平，保持飲水清潔；強化獸醫衛生消毒，保持環境衛生，增強羊群抵抗力。消除誘發因素；避免牛羊受寒中暑。6.4嚴格檢疫，避免引入患病動物和帶毒動物。47.2對病羊按照以下藥物進行治療：氨基糖苷類、頭孢類及磺胺類藥物等。慶大霉素，按每kg體重1000U～1500U,頭孢噻呋1.1mg/kg～2.2mg/kg,1日1次，20%磺胺嘧啶鈉5mL～10mL,均肌內注射