2024年8月基因工程模擬練習題+參考答案解析一、單選題（共40題，每題1分，共40分）1.天然PstI限制性內切酶的來源是：A、BacillusamyloliquefaciensB、EscherichiacoliC、HaemophilusInfluenzaeD、Provisenciastuartii正確答案：D答案解析：天然PstI限制性內切酶來源于普羅威登斯菌（Provisenciastuartii）。選項A中Bacillusamyloliquefaciens是嗜淀粉芽孢桿菌；選項B中Escherichiacoli是大腸桿菌；選項C中HaemophilusInfluenzae是流感嗜血桿菌，均不符合。2.以質粒為載體，將外源基因導入受體菌的過程稱：A、轉化B、轉染C、感染D、轉導E、轉位正確答案：A答案解析：轉化是指將質粒等外源DNA導入受體菌的過程，通過轉化可使受體菌獲得新的遺傳性狀。轉染一般指將病毒核酸導入細胞等。感染通常用于描述病毒等病原體侵入細胞等情況。轉導是利用噬菌體等載體將供體菌的基因轉移到受體菌。轉位一般指基因在基因組中的位置移動等。3.EcoRⅠ切割DNA雙鏈產生：A、平端B、5’突出粘端C、3’突出粘端D、鈍性末端E、配伍末端正確答案：B答案解析：EcoRⅠ切割DNA雙鏈產生5’突出粘端。其識別序列為5’-GAATTC-3’，切割位點在G和A之間，切割后形成5’突出的粘性末端。4.DNA被某種酶切割后，電泳得到的電泳帶有些擴散，下列原因中那一項不太可能？A、酶失活B、蛋白質（如BSA）同DNA結合C、酶切條件不合適D、酶切反應時酶濃度過低正確答案：A5.質粒DNA和外源DNA各用兩種限制性內切酶切開，經連接轉化后獲得重組子，下列各組重組子中有可能含有兩種相反基因極性的是：A、ApaI/ClaIB、BamHI/BglIIC、BclI/SmaID、HindIII/KpnI正確答案：B6.在質粒提取的步驟里，異戊醇的作用是：A、使蛋白質脫水B、使DNA脫水C、幫助DNA進入水相D、減少氣泡，有助于相的穩定正確答案：D答案解析：異戊醇可以減少氣泡，有助于相的穩定。在質粒提取過程中，加入異戊醇能降低分子表面張力，使離心時形成的界面更清晰，減少氣泡對分層的影響，利于后續操作的順利進行。7.在重組DNA技術中通常不涉及的酶是：A、限制性核酸內切酶B、DNA聚合酶C、DNA連接酶D、反轉錄酶E、DNA解鏈酶正確答案：E答案解析：在重組DNA技術中，限制性核酸內切酶用于切割DNA分子，獲得特定的DNA片段；DNA聚合酶用于DNA復制等過程；DNA連接酶用于連接DNA片段；反轉錄酶可將RNA反轉錄為DNA。而DNA解鏈酶主要作用是解開DNA雙鏈，在重組DNA技術中通常不涉及。8.哪一個載體更適用于150kBDNA片段的克隆？A、質粒B、λ載體C、BACD、YAC正確答案：C9.重組DNA技術中實現目的基因與載體DNA拼接的酶：A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA連接酶D、RNA連接酶E、限制性內切正確答案：C答案解析：DNA連接酶能夠催化雙鏈DNA片段互補末端之間的磷酸二酯鍵形成，從而實現目的基因與載體DNA的拼接。DNA聚合酶主要用于DNA復制等過程；RNA聚合酶用于轉錄合成RNA；RNA連接酶在重組DNA技術中一般較少使用；限制性內切酶是用于切割DNA的，產生粘性末端或平末端，為后續的拼接做準備，但它本身不能直接實現拼接。10.如果沒有得到PCR產物，下面哪個不是導致擴增失敗的原因?A、可能沒有加入酶B、DNA解鏈不充分C、人工合成的引物錯誤D、減少循環周期次數正確答案：D答案解析：如果沒有得到PCR產物，擴增失敗的原因可能有多種。選項A中沒有加入酶會導致無法進行擴增反應；選項B中DNA解鏈不充分會影響引物與模板的結合，進而影響擴增；選項C中人工合成的引物錯誤也無法正確引導擴增。而選項D減少循環周期次數一般不會直接導致擴增失敗，只是可能會使擴增產物量減少，不是導致完全沒有PCR產物的原因。11.不經電泳分離直接將樣品點在硝酸纖維素膜上的技術是：A、Eastern雜交B、Northern雜交C、Western雜交D、斑點雜交正確答案：D答案解析：斑點雜交是將樣品直接點在硝酸纖維素膜上，而不是先進行電泳分離，然后再進行雜交檢測等后續操作，符合不經電泳分離直接點樣的特點。Eastern雜交主要用于檢測蛋白質與蛋白質相互作用等；Northern雜交是用于檢測RNA；Western雜交是用于檢測蛋白質，這幾種雜交技術通常都需要先進行電泳分離等操作。12.Klenow酶與DNA聚合酶相比，前者喪失了下面哪種酶的活性？A、5′→3′合成酶B、3′→5′外切酶C、5′→3′外切酶D、轉移酶正確答案：C答案解析：Klenow酶是DNA聚合酶I大片段，DNA聚合酶I具有5′→3′聚合酶活性、3′→5′外切酶活性和5′→3′外切酶活性，Klenow酶是DNA聚合酶I經枯草桿菌蛋白酶切割后產生的大片段，它保留了5′→3′聚合酶活性和3′→5′外切酶活性，但喪失了5′→3′外切酶活性。13.經電泳后將DNA轉移至硝酸纖維素膜上的技術是：A、Southern雜交B、斑點雜交C、Western雜交D、Eastern雜交正確答案：A答案解析：Southern雜交是將DNA經電泳分離后轉移至硝酸纖維素膜或尼龍膜上，然后與標記的核酸探針進行雜交，以檢測特定DNA片段的技術。斑點雜交是將DNA或RNA樣品直接點在硝酸纖維素膜或尼龍膜上進行雜交。Western雜交是用于檢測蛋白質的技術。Eastern雜交主要用于分析蛋白質的糖基化等修飾。所以經電泳后將DNA轉移至硝酸纖維素膜上的技術是Southern雜交。14.蛋白質的合成方向為：A、從C端→N端B、N端→C端C、定點雙向進行D、以上都不對正確答案：B答案解析：蛋白質合成是從N端向C端進行的。在翻譯過程中，核糖體沿著mRNA移動，按照密碼子的順序依次將氨基酸連接成多肽鏈，新加入的氨基酸會連接到正在延伸的多肽鏈的C末端，從而使得蛋白質合成方向為N端→C端。15.雙脫氧鏈末端終止法測序不需要：A、Klenow小片段B、引物C、dNTPD、標記dNTPE、ddNTP正確答案：A答案解析：雙脫氧鏈末端終止法測序需要引物、dNTP、標記dNTP、ddNTP，不需要Klenow小片段，Klenow小片段是DNA聚合酶I經枯草桿菌蛋白酶裂解后產生的大片段，具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性，而雙脫氧鏈末端終止法測序一般用的是測序酶等，不是Klenow小片段。16.下列哪一種酶作用時需要引物？A、限制酶B、末端轉移酶C、反轉錄酶D、DNA連接酶正確答案：C答案解析：反轉錄酶以RNA為模板合成DNA時需要引物，此引物通常是一段RNA序列。限制酶識別特定序列并切割DNA，不需要引物；末端轉移酶是在DNA末端添加核苷酸，不需要引物；DNA連接酶連接DNA片段，不需要引物。17.PCR退火溫度一般是：A、95℃B、85℃C、72℃D、65℃E、55℃正確答案：E答案解析：PCR退火溫度一般在55℃-65℃之間，所以大于55℃符合要求，其他選項溫度過高不符合退火溫度范圍。18.下列關于建立cDNA文庫的敘述哪項是錯誤的：A、從特定組織或細胞中提取mRNAB、將特定細胞的DNA用限制性核酸內切酶切割后，克隆到噬菌體或質粒中，C、用逆轉錄酶合成mRNA的對應單股DNAD、用DNA聚合酶，以單股DNA為模板合成雙鏈DNA正確答案：B答案解析：建立cDNA文庫是從特定組織或細胞中提取mRNA（A選項正確），然后用逆轉錄酶合成mRNA的對應單股DNA（C選項正確），再用DNA聚合酶以單股DNA為模板合成雙鏈DNA（D選項正確），而不是將特定細胞的DNA用限制性核酸內切酶切割后克隆到噬菌體或質粒中，B選項錯誤。19.人類基因組計劃的主要研究內容不包括：A、遺傳圖分析B、物理圖分析C、序列圖分析D、蛋白質功能分析E、轉錄圖分析正確答案：D答案解析：人類基因組計劃的主要內容包括遺傳圖分析、物理圖分析、轉錄圖分析和序列圖分析。蛋白質功能分析不屬于人類基因組計劃的主要研究內容。20.同一種質粒DNA，以三種不同形式存在，電泳時它們的遷移率是：A、OCDNA>SCDNA>LDNAB、SCDNA>LDNA>OCDNAC、LDNA>OCDNA>SCDNAD、SCDNA>OCDNA>LDNA正確答案：B21.多克隆位點：A、含有許多拷貝的克隆化基因B、使得對克隆所用限制酶的選擇具有靈活性C、含有許多拷貝的同一種限制酶位點D、使得對克隆所用的生物種類的選擇具有靈活性正確答案：B答案解析：多克隆位點是指載體上人工合成的含有多種限制酶識別序列的DNA片段，它可以插入外源DNA片段，使得對克隆所用限制酶的選擇具有靈活性。選項A中說含有許多拷貝的克隆化基因錯誤；選項C中含有許多拷貝的同一種限制酶位點不準確；選項D中說對克隆所用生物種類的選擇具有靈活性也不正確。22.第一個由重組大腸桿菌生產的人類蛋白（多肽）藥物是：A、胰島素B、干擾素C、白細胞介素D、生長激素正確答案：A答案解析：胰島素是第一個由重組大腸桿菌生產的人類蛋白（多肽）藥物。胰島素是一種蛋白質激素，對調節血糖水平至關重要。通過基因工程技術，將胰島素基因導入大腸桿菌中，使其能夠表達并生產胰島素，為糖尿病患者提供了有效的治療藥物。生長激素、干擾素、白細胞介素等雖然也是重要的蛋白質藥物，但不是第一個由重組大腸桿菌生產的。23.PCR主要的酶是：A、DNA連接酶B、反轉錄酶C、末端轉移酶D、堿性磷酸酶E、TaqDNA聚合酶正確答案：E答案解析：PCR技術中主要使用的酶是TaqDNA聚合酶，它具有耐高溫的特性，能在較高溫度下進行DNA的擴增反應，而其他幾種酶在PCR過程中一般不發揮主要作用。24.轉化常指：A、噬菌體感染B、基因轉位C、攝取外來DNA，引起細胞生物學類型的改變D、產生點突變E、產生移碼突變正確答案：C答案解析：轉化是指受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段并整合到自己的基因組中，從而獲得供體菌部分遺傳性狀的過程，可引起細胞生物學類型的改變，符合選項C的描述。選項A噬菌體感染不是轉化；選項B基因轉位與轉化概念不同；選項D產生點突變和選項E產生移碼突變與轉化的定義不符。25.與mRNAACG相對應的tRNA的反密碼子是：A、UGCB、TGCC、GCAD、CGU正確答案：D26.用免疫化學法篩選重組體的原理是：A、根據外源基因的表達B、根據載體基因的表達C、根據mRNA同DNA的雜交D、根據DNA同DNA的雜交正確答案：A27.由mRNA合成cDNA需要：A、Klenow小片段B、DNA連接酶C、Klenow大片段D、反轉錄酶E、堿性磷酸酶正確答案：D答案解析：反轉錄酶是以mRNA為模板合成cDNA的關鍵酶，它能催化以mRNA為模板合成互補DNA鏈的反應。Klenow小片段、Klenow大片段主要用于DNA的合成等其他相關反應，DNA連接酶用于連接DNA片段，堿性磷酸酶用于去除核酸末端的磷酸基團等，均不是由mRNA合成cDNA直接需要的酶。28.多數限制性核酸內切酶切割后的DNA末端為：A、平行末端B、3’-突出末端C、5’-突出末端D、粘性末端E、缺口末端正確答案：D答案解析：多數限制性核酸內切酶切割后的DNA末端為粘性末端，即雙鏈DNA被酶切后，產生的兩個末端的堿基序列互補，能夠通過堿基配對重新結合，形成類似粘性的結構。29.PCR反應體系與雙脫氧末端終止法測序體系不同的是缺少：A、模板B、引物C、DNA聚合酶D、ddNTPE、緩沖液正確答案：D答案解析：PCR反應體系中需要模板、引物、DNA聚合酶、緩沖液等成分來擴增特定DNA片段。而雙脫氧末端終止法測序體系是利用ddNTP（雙脫氧核苷酸）隨機終止DNA鏈的延伸來進行測序，在PCR反應體系中不需要ddNTP，所以PCR反應體系與雙脫氧末端終止法測序體系不同的是缺少ddNTP。30.在基因工程中通常所用的質粒存在于：A、細菌染色體B、酵母染色體C、細菌染色體外D、酵母染色體外E、病毒DNA外正確答案：C答案解析：質粒是細菌染色體外能夠自主復制的小型環狀雙鏈DNA分子，存在于細菌染色體外。A選項細菌染色體錯誤；B選項酵母染色體外一般是酵母人工染色體等，不是質粒；D選項同理酵母染色體外不是質粒；E選項病毒DNA外也不正確，質粒存在于細菌中而非病毒相關。31.下列哪一種不是產生星號活性的主要原因？A、甘油含量過高B、含有非鎂離子的二價陽離子C、反應體系中含有有機溶劑D、酶切反應時酶濃度過低正確答案：D答案解析：星號活性是指在非理想的反應條件下，限制酶可能會切割一些與識別序列相似但不完全相同的序列，從而產生非特異性的切割條帶。甘油含量過高、反應體系中含有有機溶劑、含有非鎂離子的二價陽離子等都可能導致星號活性的產生。而酶切反應時酶濃度過低通常不會直接導致星號活性，反而可能影響酶切效率，使酶切不完全。32.Maxam-Gilbert法與Sanger法測序的共同點是均需：A、電泳后放射自顯影讀圖B、化學裂解試劑C、Klenow酶D、dNTPE、引物正確答案：A33.關于宿主控制的限制修飾現象的本質，下列描述中只有不恰當的是：A、由作用于同一DNA序列的兩種酶構成B、這一系統中的核酸酶都是Ⅱ類限制性內切核酸酶C、這一系統中的修飾酶主要是通過甲基化作用對DNA進行修飾D、不同的宿主系統具有不同的限制—修飾系統正確答案：B答案解析：宿主控制的限制修飾現象由作用于同一DNA序列的兩種酶構成，修飾酶主要通過甲基化作用對DNA進行修飾，且不同的宿主系統具有不同的限制—修飾系統。這一系統中的核酸酶主要是Ⅰ類和Ⅲ類限制性內切核酸酶，并非Ⅱ類限制性內切核酸酶，所以選項B不恰當。34.Southern印跡的DNA探針雜交：A、只與序列完全相同的RNA片段B、可與任何含有相同序列的DNA片段C、可與任何含有互補序列的DNA片段D、可與用某些限制性核酸內切酶切DNA片段E、只與含有互補序列RNA片段正確答案：C答案解析：Southern印跡的DNA探針雜交原理是利用核酸分子堿基互補配對原則，探針可與任何含有互補序列的DNA片段進行雜交。35.下列三聯體密碼中，合成蛋白質的起始密碼是：A、AUUB、AUGC、UAAD、CAA正確答案：B36.在簡并引物的3′端盡量使用具有簡并密碼的氨基酸，這是因為：A、TAq酶具有一定的不精確性B、便于排除錯誤堿基的摻入C、易于退火D、易于重組連接正確答案：A37.DNA的結構對轉化的影響很大，一般說來，轉化效率最高的是：A、完整的線性雙鏈DNAB、單鏈線性DNAC、完整的環狀雙鏈DNAD、開口的雙鏈環狀DNA正確答案：A38.PCR反應過程中，引物延伸所需溫度一般是：A、95℃B、82℃C、72℃D、62℃E、55℃正確答案：C答案解析：引物延伸溫度一般為72℃左右，在該溫度下，DNA聚合酶具有較高的活性，能夠以引物為起始點，沿著模板鏈合成新的DNA鏈。39.第一個用于構建重組體的限制性核酸內切酶是：A、EcoRIB、EcoBC、EcoRIID、EcoRV正確答案：A答案解析：限制性核酸內切酶EcoRI是第一個被發現并用于構建重組體的，它能夠識別特定的DNA序列并進行切割，為基因工程的發展奠定了基礎。40.PCR實驗的特異性主要取決于：A、DNA聚合酶的種類B、反應體系中模板DNA的量C、引物序列的結構和長度D、四種dNTP的濃度E、循環周期的次數正確答案：C答案解析：引物是PCR特異性的關鍵因素，引物序列的結構和長度決定了引物與模板DNA結合的特異性，進而影響PCR反應的特異性。DNA聚合酶種類主要影響反應效率等；模板DNA量影響擴增產物量；四種dNTP濃度影響反應進行；循環周期次數影響產物數量，但都不如引物序列對特異性影響大。二、判斷題（共20題，每題1分，共20分）1.溫度敏感突變型是非常有用的，在這些突變型中，可以通過對溫度的改變控制這些突變體中異常表型的出現。A、正確B、錯誤正確答案：A2.PCR既能用于擴增天然存在的基因序列，又能重新設計天然基因序列的兩個末端。因此，任意兩個天然存在的基因序列都能快速有效地擴增，且能拼接在一起。A、正確B、錯誤正確答案：A3.人工感受態和自然感受態的細胞都能吸收線性和環狀單鏈DNA。A、正確B、錯誤正確答案：B4.促紅細胞生長素基因能在大腸桿菌中表達，也可以用大腸桿菌的基因工程菌生產人的促紅細胞生長素。A、正確B、錯誤正確答案：B5.尼龍膜是核酸雜交的一種固體支持物，具有同DNA結合能力強、韌性強，可反復洗脫使用，并且雜交信號本底低等優點，就是成本高。A、正確B、錯誤正確答案：B6.如果細菌的某種表型特征在UV處理下喪失后不再恢復，這種表型有可能是質粒賦予的。A、正確B、錯誤正確答案：A7.氯霉素擴增DNA時，加氯霉素的時間是重要的，因為加得太早，菌數不夠，加入時間過遲，菌齡過老，容易自溶。A、正確B、錯誤正確答案：A8.穿梭載體是指