2.簡述血沉測定的方法學(xué)評價。①手工法包括魏氏法、潘氏法等：魏氏法簡便實(shí)用，1CSH推薦為血沉測定的參比方

法；潘氏法與魏氏法測定相關(guān)性較好，采用手指采血，用血量少，尤其適用于兒童，但易混入組織液，目前已很少使

用。手工法只能測定血沉某個時刻的最終結(jié)果，特異性差，其應(yīng)用有很大的局限性。②血沉儀可動態(tài)記錄整個血沉過

程的變化，描繪出紅細(xì)胞沉降的曲線，反映了不同疾病或疾病不同階段，血沉3個沉降階段所存在的差異，為臨床分

析血沉測定結(jié)果提供了新的手段。

3.白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)質(zhì)量控制中應(yīng)注意哪些影響因素?①影響白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的因素：主要是細(xì)胞在涂片中的分

布不均和觀察者對細(xì)胞辨認(rèn)的差異。②影響白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)精確性的因素。③影響涂片染色效果的因素。④白細(xì)胞分

類計(jì)數(shù)的參考方法：EDTA一叢抗凝靜脈血，人工制成血涂片，以Romanowsky液進(jìn)行染色，使用“城墻式”移動法,

油鏡下分類計(jì)數(shù)200個白細(xì)胞。當(dāng)其他分類法與此法作為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較時，需要4個熟練檢驗(yàn)人員對同一張涂片各計(jì)

數(shù)200個白細(xì)胞(即總數(shù)為800個細(xì)胞)后，求出平均值來作為各類白細(xì)胞的靶值。

4.嗜酸性粒細(xì)胞升高的臨床意義是什么？嗜酸性粒細(xì)胞增多指成人外周血嗜酸性粒細(xì)胞＞0.5X109/J引起嗜酸性粒

細(xì)胞增多的原因包括：①寄生蟲病是最常見的病因。②變態(tài)反應(yīng)性疾病是僅次于寄生蟲病的另一主要病因，見于支氣

管哮喘、壞死性血管炎、藥物過敏反應(yīng)等。③皮膚病，如濕疹等。④血液病，如慢性粒細(xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多

癥、多發(fā)性骨髓瘤、脾切除術(shù)后、嗜酸性粒細(xì)胞白血病、霍奇金病。⑤某些惡性腫瘤，如肺癌。⑥某些傳染病，如猩

紅熱急性期。⑦其他，如風(fēng)濕性疾病、腦垂體前葉功能減低癥等。⑧高嗜酸性粒細(xì)胞綜合征。

5.電阻抗法血液分析儀進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢測原理是什么？根據(jù)血細(xì)胞相對非導(dǎo)電的性質(zhì),懸浮在電解質(zhì)溶液中的血

細(xì)胞顆粒在通過計(jì)數(shù)小孔時可引起電阻的變化，于是瞬間引起了電壓變化而出現(xiàn)一個脈沖信號。脈沖信號變化的程度

取決于非導(dǎo)電性細(xì)胞體積的大小，細(xì)胞體積越大產(chǎn)生的脈沖振幅越高，記錄脈沖的數(shù)量就可測定細(xì)胞的數(shù)量。這些脈

沖信號經(jīng)過放大、閾值調(diào)節(jié)、甄別、整形、計(jì)數(shù)及自動控制保護(hù)系統(tǒng)，最終可打印出數(shù)據(jù)報(bào)告

6.試述血紅蛋白測定的主要方法及其方法學(xué)評價。①氟化高鐵血紅蛋白測定法(HiCN)為國際標(biāo)準(zhǔn)參考方法。操作簡單、

顯色快且結(jié)果穩(wěn)定可靠，可檢測除SHb外的各種血紅蛋白。KCN有劇毒，且存在高白細(xì)胞和高球蛋白血癥可致試劑混

濁，以及HbCO轉(zhuǎn)化較慢等問題。②十二烷基硫酸鈉(SDS)血紅蛋白測定法可替代HiCN法。SDS與Hb作用(除SHb

外)，生成SDS—Hb棕紅色化合物，其吸收峰在538nm,SDS可用HiCN法定的抗凝血或溶血液，制備標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

本法操作簡單，呈色穩(wěn)定，準(zhǔn)確性和精確性符合要求，且無公害，為次選方法。SDS本身質(zhì)量差異較大，且破壞白細(xì)

胞，不適用于同時有白細(xì)胞計(jì)數(shù)和Hb測定的血細(xì)胞分析儀上使用。③疊氮高鐵血紅蛋白(HiN3)測定法具有與HiCN測

定法相似的優(yōu)點(diǎn)，顯色快而穩(wěn)定，試劑毒性僅為HiCN的1/7,但仍存在公害問題。④堿羥血紅蛋白(AHD575)測定法,

試劑簡單，不含有毒劑，呈色穩(wěn)定，可用氯化血紅素作標(biāo)準(zhǔn)品。但此法在血液分析儀中的應(yīng)用受限。⑤多參數(shù)血液分

析儀測Hb已逐步取代手工法，操作簡單、快速，同時可以獲得多項(xiàng)紅細(xì)胞的參數(shù)。其測定原理多采用HiCN法，但由

于各型號儀器使用的溶血劑不同，形成Hb的衍生物不同。儀器要經(jīng)過HiCN標(biāo)準(zhǔn)液校正后，才能進(jìn)行Hb測定。

7.網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測的臨床意義是什么？網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(Ret)是反映骨髓造血功能的重要指標(biāo)。(1)判斷骨髓增生能力，

判斷貧血類型：①網(wǎng)織紅細(xì)胞增多，表示骨髓造血功能旺盛。常見于溶血性貧血(尤其急性溶血)、急性失血；造血恢復(fù)

期可見Ret短暫和迅速增高，是骨髓功能恢復(fù)較敏感的指標(biāo)；②網(wǎng)織紅細(xì)胞減少，表示骨髓造血功能低下，見于再生

障礙性貧血、溶血性貧血、自身免疫性溶血性貧血危象。典型再生障礙性貧血，網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)常低于0.005,網(wǎng)織

紅細(xì)胞絕對值低于15X109/L,為其診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。(2)評價療效，判斷病情變化：Ret是貧血患者隨訪檢查的項(xiàng)目之

一。(3)骨髓移植后監(jiān)測骨髓造血恢復(fù)

8.血沉變化的臨床意義是什么？(1)生理性增快:女性高于男性。婦女月經(jīng)期、妊娠3個月以上，以及老年人血沉常增

快。(2)病理性增快可見于：①各種炎癥：感染是血沉加快最常見的原因，如急性細(xì)菌性感染；結(jié)核病、結(jié)締組織炎癥、

風(fēng)濕熱等慢性炎癥于活動期血沉增快，病情好轉(zhuǎn)時血沉減慢，故血沉(ESR)可動態(tài)觀察病情變化。②組織損傷及壞死：

見于較大范圍組織損傷或手術(shù)創(chuàng)傷。心肌梗死時血沉增快，而心絞痛時血沉多正常，可作為兩者鑒別指標(biāo)。③惡性腫

瘤血沉增快，而良性腫瘤血沉多正常。④高球蛋白血癥。⑤貧血。⑥高膽固靜血癥。(3)血沉減慢：臨床意義較小，主

要見于紅細(xì)胞明顯增多、纖維蛋白原含量嚴(yán)重減低時。血沉是較為常用而缺乏特異性的指標(biāo)，血沉常作為疾病是否活

動的監(jiān)測指標(biāo)

9.試述中性粒細(xì)胞病理變化的臨床意義。中性粒細(xì)胞增多指分葉核粒細(xì)胞超過70%,絕對值＞7X109/L。①急性感

染或炎癥是最常見的原因，以中性粒細(xì)胞為主。尤其是化膿性球菌感染。其增高程度與病原體種類、感染部位和程度

以及機(jī)體的反應(yīng)性等有關(guān)。②廣泛組織損傷或壞死和急性溶血，如嚴(yán)重?zé)齻⑿募」Ｋ赖染梢姲准?xì)胞增多，以中性

粒細(xì)胞為主。③急性失血，白細(xì)胞迅速增多，以中性粒細(xì)胞為主。④急性中毒。⑤惡性腫瘤、白血病，急性白血病以

幼稚白血病細(xì)胞增多為主。慢性白血病以成熟的白血病細(xì)胞增高為主

10.為什么血細(xì)胞分析儀對白細(xì)胞的分類結(jié)果只能作為篩檢試驗(yàn)?(1)三分群血液分析儀用阻抗法的原理，依據(jù)臼細(xì)胞

的體積的大小，人為地將白細(xì)胞分成三群，這種分類不夠準(zhǔn)確。(2)五分類的血細(xì)胞分析儀聯(lián)合應(yīng)用光學(xué)和電學(xué)等技術(shù)

的儀器，檢測同一血細(xì)胞的體積、細(xì)胞核形狀及胞質(zhì)中顆粒，在綜合分析后作出白細(xì)胞分類，這種檢測分類法雖然較

電阻抗法高，但仍不能滿足臨床檢出異常細(xì)胞的需要。（3）各類型的血液分析儀尚不具有識別紅細(xì)胞、白細(xì)胞核、血小

板的能力，仍不能檢出白細(xì)胞形態(tài)的病理性變化，特別是對幼稚細(xì)胞的檢測。而顯微鏡能根據(jù)血細(xì)胞與染色液特異性

的結(jié)合，根據(jù)血涂片上細(xì)胞的體積、細(xì)胞核形狀及胞質(zhì)中顆粒等著色情況，進(jìn)行綜合分析并能識別異常和幼稚細(xì)胞，

因此，血細(xì)胞分析儀只能作為健康人血液一般檢驗(yàn)的篩檢之用

11.試述尿液常規(guī)分析的臨床價值。（1）泌尿系統(tǒng)疾病的診斷與療效觀察。泌尿系統(tǒng)的炎癥、結(jié)石、腫瘤、血管病變及

腎移植術(shù)后發(fā)生排異反應(yīng)時，各種病變產(chǎn)物直接進(jìn)入尿中，引起尿液成分變化，因此尿液分析是泌尿系統(tǒng)疾病診斷與

療效觀察的首選項(xiàng)目。（2）其他系統(tǒng)疾病的診斷。尿液來自血液，其成分又與機(jī)體代謝有密切關(guān)系，故任何系統(tǒng)疾病的

病變影響血液成分改變時，均能引起尿液成分的變化，因此可通過尿液分析協(xié)助臨床診斷。（3）安全用藥的監(jiān)護(hù)。某些

藥物如慶大霉素、卡那霉素、多黏菌素B與磺胺類藥等常可引起腎損害，故用藥前及用藥過程中需觀察尿液的變化，

以確保用藥安全。（4）職業(yè)病的輔助診斷。鉛、鎘、鈿、汞等均可引起腎損害，尿中此類重金屬排出量增多，對職業(yè)病

的診斷及預(yù)防有一定意義（5）對人體健康狀態(tài)的評估。對人群進(jìn)行尿液分析，可篩查有無腎、肝、膽疾病和糖尿病，以

達(dá)早期診斷及預(yù)防疾病的目的

12.試述糞便隱血試驗(yàn)的臨床意義。糞便隱血檢查對消化道出血的診斷有重要價值。消化性潰瘍、藥物致胃黏膜損傷（如

服用阿司匹林、口引跺美辛、糖皮質(zhì)激素等）、腸結(jié)核、Crohn病、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲病及胃癌、結(jié)腸癌等

消化道腫瘤時，糞便隱血試驗(yàn)均常為陽性。故須結(jié)合臨床其他資料進(jìn)行鑒別診斷。在消化性潰瘍時，陽性率為40%?

70%,呈間斷性陽性。消化性潰瘍治療后當(dāng)糞便外觀正常時，隱血試驗(yàn)陽性仍可持續(xù)5?7天，此后如出血完全停止，

隱血試驗(yàn)即可轉(zhuǎn)陰。消化道癌癥時，陽性率可達(dá)95%,呈持續(xù)陽性，故糞便隱血試驗(yàn)常作為消化道惡性腫瘤診斷的一

個篩選指標(biāo)。尤其對中老年人早期發(fā)現(xiàn)消化道惡性腫瘤有重要價值。此外在流行性出血熱患者的糞便中隱血試驗(yàn)也有

84%的陽性率，可作為該病的重要佐證。

13.試述尿HCG金標(biāo)法測試原理。在纖維素膜的特定位置,分別包被單抗鼠IgG抗體（對照線），單抗人HCG抗體（測

定線），呈上下排列，另外，試帶上還含有均勻分布的膠體金標(biāo)記人B-HCG單抗、膠體金標(biāo)記的鼠IgG抗原。檢測時

因?qū)游饔媚蛞褐械腍CG與膠體金標(biāo)記的人3-HCG單抗結(jié)合，移至測定線，形成金標(biāo)記8-HCG單抗一B-HCG抗原

一單抗人HCG抗體的雙抗體夾心式復(fù)合物，測試線呈現(xiàn)紫紅色。同時，金標(biāo)記鼠IgG抗原隨尿上行至單抗鼠IgG抗體,

形成金標(biāo)記鼠IgG抗原與單抗鼠IgG抗體復(fù)合物，對照線呈紫紅色。

I簡述血細(xì)胞發(fā)育過程中的形態(tài)演變規(guī)律。胞體由大到小,但原始細(xì)胞比早幼粒細(xì)胞小，巨核細(xì)胞由小到大，核漿比

例由大到小；胞核由大到小，成熟紅細(xì)胞胞核消失；核形由圓到凹陷到分葉，有的細(xì)胞可不分葉；核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)由細(xì)

致疏松到粗糙緊密，核染色質(zhì)顏色由淡紫色到深紫色；核膜由不明顯到明顯；核仁由顯著可見到無，胞質(zhì)量由少到多，

胞質(zhì)顏色由藍(lán)到紅或由深藍(lán)到淺藍(lán)；胞質(zhì)顆粒由無到有；紅細(xì)胞在成熟過程中，胞質(zhì)不會出現(xiàn)顆粒。

2.簡述再障的骨髓病理學(xué)特點(diǎn)。骨髓增生減退,造血組織與脂肪組織的容積百分比降低，脂肪細(xì)胞與基質(zhì)增多。粒細(xì)

胞、紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞均減少，淋巴細(xì)胞增多。間質(zhì)內(nèi)漿細(xì)胞、肥大細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞等非造血細(xì)胞增多，并可有間質(zhì)

水腫、出血甚至液性脂肪壞死

3再障的診斷標(biāo)準(zhǔn)是什么?①全血細(xì)胞減少,網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值減少；②一般無肝脾腫大；③骨髓至少1個部位增生

減低或重度減低，骨髓小粒非造血細(xì)胞增多；④除外引起全血細(xì)胞減少的其他疾病，如PNH、MDS-RA急性造血功能

停滯等；⑤一般抗貧血藥物治療無效。

4.簡述溶血性貧血的共性改變。①一般貧血實(shí)驗(yàn)室表現(xiàn),正常細(xì)胞性貧血，網(wǎng)織紅細(xì)胞一般增高，血片中有特殊形態(tài)

的紅細(xì)胞，類白血病反應(yīng)。骨髓有核細(xì)胞顯著增多，粒紅比例倒置。②血紅蛋白的釋放。③膽紅素代謝異常。④紅細(xì)

胞壽命縮短。

6.簡述凝血過程的三個階段。第一階段為血液凝血活酶的形成,第二階段為凝血酶的形成，第三階段為纖維蛋白的形

成。第一階段有內(nèi)源性和外源性凝血系統(tǒng)兩個途徑。外源性凝血系統(tǒng)是由于血管壁或組織損傷后釋放因子m,因子vn、

鈣離子形成復(fù)合物，促使因子X活化，然后形成凝血活酶。內(nèi)源性凝血系統(tǒng)是通過固相和液相激活因子刈，然后是IX-

VIII-Ca-PF3復(fù)合物形成，從而促使因子X活化，形成凝血活酶

7.如何早期診斷DIC。①存在可引起DIC的病因，如感染、創(chuàng)傷、腫瘤等。②有兩種以上的下列臨床表現(xiàn)：反復(fù)、

嚴(yán)重或廣泛的出血；不明原因或難以糾正的休克；出現(xiàn)反映肺、腦、肝、腎等器官栓塞的癥狀和體征；原來疾病不可

解釋的溶血現(xiàn)象。③實(shí)驗(yàn)室檢查符合以下表現(xiàn)：血小板減少或進(jìn)行性下降，F(xiàn)g含量減少，3P實(shí)驗(yàn)陽性或D-二聚體升

高。PT縮短或較正常對照延長3s以上

8.簡述骨髓檢查的適應(yīng)證：①外周血細(xì)胞數(shù)量、成分及形態(tài)異常。②不明原因的發(fā)熱、肝腫大、脾腫大、淋巴結(jié)腫大。

③不明原因的骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、黃疸、紫瘢、血沉明顯加快。④惡性血液病化療后的療效觀察。⑤其他:

骨髓活檢、骨髓細(xì)胞

培養(yǎng)、微生物學(xué)及寄生蟲學(xué)檢查等

10.血小板在止血過程中的作用是什么?①血小板能維持正常血管壁的完整性，使其通透性減低。②通過黏附、聚集和

釋放反應(yīng)在創(chuàng)口處形成血小板栓子。③釋放各種血小板因子參與血液凝固，其中PF3最重要。④釋放止血物質(zhì)TXA2,

使血小板進(jìn)一步收縮。⑤釋放血小板收縮蛋白，使血塊收縮，有利于止血

11.何為急性白血病M4型?其亞型如何劃分?M4為粒-單核細(xì)胞白血病,按粒細(xì)胞、單核細(xì)胞的比例，形態(tài)不同分為四

個亞型：①M(fèi)aa：以原始及早幼粒細(xì)胞白血病增生為主。單核細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞總數(shù)＞20%（NEC）。②M4）：以原、幼單核細(xì)

胞增生為主，原粒細(xì)胞+早幼粒細(xì)胞＞20%（NEC）。③M4C；具有粒系又具有單核系特征的原始細(xì)胞＞30%（NEC）。④M4E0；

除上述特征外，還有顆粒粗大且圓、著色較深的嗜酸性粒細(xì)胞，占5%?30%

12.何為造血干細(xì)胞"?它具備哪些特征?造血干細(xì)胞是一種具有自身復(fù)制能力的細(xì)胞,必須具備：①有分裂能力：一個

干細(xì)胞在經(jīng)過一個細(xì)胞周期活動后可生成兩個與分裂前性質(zhì)相同的干細(xì)胞，這就是干細(xì)胞自身復(fù)制的特性。由于它有

自身復(fù)制能力，所以能保持本細(xì)胞庫數(shù)的恒定。②有分化為更成熟細(xì)胞的能力：即具有向骨髓多系細(xì)胞分化的能力。

造血干細(xì)胞既能自身復(fù)制，經(jīng)常維持一定的數(shù)量，又能分化為使多系細(xì)胞相對穩(wěn)定。概括為：血細(xì)胞來源于骨髓的造

血多能干細(xì)胞，多能干細(xì)胞能分化為多系統(tǒng)的定向干細(xì)胞，然后經(jīng)過原始、幼稚各階段，而后成熟為多種血細(xì)胞

13.試舉例說明急性白血病的MICM分型。M（形態(tài)學(xué)）1（免疫學(xué)）C（細(xì)胞化學(xué)）M（分子生物學(xué)）,以急性早幼粒細(xì)胞白血

病（M3）為例，Hb和RBC輕中度減少，白細(xì)胞不定，分類以異常早幼粒為主，Auer小體易見。骨髓象以顆粒增多的異

常早幼粒增生為主，230%（NEC）,早幼與原粒之比＞3：1,異常早幼粒胞核大小不一，胞質(zhì)中有大小不等顆粒，可見

束狀A(yù)uer小體；POX（+）,CD13/CD33（+）,CD34/HLA-DR（——）；t（15：17）（q22：ql2）形成PML/RARA融合

基因

14.試述血栓形成機(jī)制。①血管壁損傷;局部內(nèi)皮細(xì)胞抗血栓形成活性減弱或喪失，使血栓形成的內(nèi)皮下成分暴露，

促使血小板黏附、聚集和釋放，激活內(nèi)源性、外源性凝血途徑，局部形成纖維蛋白的凝塊或血栓，同時激肽的生成和

血小板釋放的血管壁通透性因子使血管壁通透性增加，利于血栓形成。②血液成分改變：血小板數(shù)量過多與功能亢進(jìn),

血液凝固性增高。纖溶活性減低及白細(xì)胞等均利于血栓形成。③血流淤滯：血流緩慢、停滯與渦流均可導(dǎo)致血栓形成、

血黏度增高，利于血小板黏附、聚集，利于血栓形成

16.試舉例說明為什么分析骨髓象必須常規(guī)分析血常規(guī)。①骨髓象相似而血常規(guī)有區(qū)別,如類白血病反應(yīng)，其骨髓象

與慢粒相似，但血中的白細(xì)胞增多不及慢粒顯著。②骨髓象有區(qū)別而血常規(guī)相似，如傳染性淋巴細(xì)胞增多癥和慢粒時

血常規(guī)都有小淋巴細(xì)胞增多，但骨髓象顯示前者淋巴細(xì)胞稍增多而后者顯著增多。③骨髓象變化不顯著而血常規(guī)有顯

著異常，如傳染性淋巴細(xì)胞增多癥，其骨髓象中的異形淋巴細(xì)胞遠(yuǎn)不及血常規(guī)中明顯。④骨髓象有顯著異常而血常規(guī)

變化不顯著，如多發(fā)性骨髓瘤，骨髓中可見特異性骨髓瘤細(xì)胞，而血常規(guī)甚少見到。⑤骨髓象細(xì)胞難辨認(rèn)，如白血病，

血常規(guī)中白血病細(xì)胞的分化程度較骨髓象為好，也較骨髓象容易辨認(rèn)

18.列舉5例引起外周血全血細(xì)胞減少的血液病及主要的鑒別指征?①血紅蛋白再生障礙性貧血:骨髓有核細(xì)胞增生低

下，淋巴細(xì)胞比例相對增高，粒、紅、巨核三系細(xì)胞增生減低。活檢示造血組織減少，脂肪組織增加。②PNH：Ham

實(shí)驗(yàn)和蔗糖溶血實(shí)驗(yàn)呈陽性反應(yīng)。③MDS：骨髓象中可見至少一系的病態(tài)造血。④非白血性白血病：骨髓象中可見大

量原始細(xì)胞和幼稚細(xì)胞。⑤惡性組織細(xì)胞病：骨髓象中可見惡性組織細(xì)胞。

1.輸注全血有哪些缺點(diǎn)?①全血中含有白細(xì)胞、血小板和血漿蛋白，可以使受血者產(chǎn)生抗體，再輸血時，可發(fā)生輸血

反應(yīng)。②由于血漿存在，全血容量較大，對老年人和兒童可引起循環(huán)超負(fù)荷，發(fā)生心力衰竭。③全血的血漿中可能含

有較高濃度的枸椽酸鈉、鉀和氨等，易發(fā)生代謝性堿中毒。

2.ABO定型試驗(yàn)中常要注意哪些問題?①ABO亞型:紅細(xì)胞上的A或B抗原很弱，只作正定型時可導(dǎo)致血型誤定。

②抗A抗B定型血清質(zhì)量差，對弱的A或B抗原漏檢（假陰性）。③受檢血清中存在不規(guī)則抗體。④紅細(xì)胞有多凝集現(xiàn)

象。⑤某些疾病，如低丙種球蛋白血癥等，導(dǎo)致反定型時血清中抗體漏檢（假陰性）

3.抗球蛋白配血法中，陽性對照、陰性對照和鹽水對照的操作步驟是什么?結(jié)果如何判定?（1）取試管2支，分別標(biāo)明

主側(cè)和次側(cè)，主側(cè)管加受血者血清2滴和供血者5%紅細(xì)胞鹽水懸液1滴；次側(cè)管加供血者血清2滴和受血者5%紅細(xì)

胞懸液1滴。（2）混和，置37℃水浴致敏lh,取出后用鹽水離心洗滌紅細(xì)胞3次，傾去上清液。（3）加最適稀釋度抗球

蛋白血清1滴，混勻，lOOOrpm離心Imin,觀察結(jié)果。（4）陽性對照：5%不完全抗D致敏的Rh陽性紅細(xì)胞懸液1滴，

加抗球蛋白血清1滴。陰性對照：5%0型紅細(xì)胞懸液1滴，加抗球蛋白血清1滴。鹽水對照：①供血者5%紅細(xì)胞鹽

水懸液1滴加生理鹽水1滴；②受血者5%紅細(xì)胞鹽水懸液1滴加生理鹽水1滴。（5）結(jié)果判定：如陽性對照管凝集，

陰性對照管、鹽水對照管不凝集，主側(cè)、次側(cè)配血管都不凝集，表示無輸血禁忌

1.簡述血糖的來源與去路。①肝糖原分解;②食物經(jīng)消化吸收的葡萄糖；③糖異生。血糖的去路：①氧化供能；②合

成糖原；③轉(zhuǎn)變?yōu)橹炯澳承┓潜匦璋被幔虎苻D(zhuǎn)變?yōu)槠渌穷愇镔|(zhì)

2.根據(jù)米一曼氏方程計(jì)算,當(dāng)［S］是Km的5倍時，反應(yīng)速度v相當(dāng)于最大速度Vgx的多少?根據(jù)公式v=Vmax［Sl

/（Km+［S］）,當(dāng)［S］=5Km時v=83%Vlllax?

3說明高氨血癥導(dǎo)致肝昏迷的生化基礎(chǔ)。高氨血癥時,腦中發(fā)生的反應(yīng)為：氨+a一酮戊二酸一谷氨酸氨+谷氨酸一

谷氨酰胺

腦內(nèi)a一酮戊二酸減少導(dǎo)致了三竣酸循環(huán)減弱，從而使ATP生成減少，腦組織供能缺乏表現(xiàn)昏迷

4.體內(nèi)膽紅素可來源于何種代謝途徑?①體內(nèi)膽紅素大部分由衰老紅細(xì)胞破壞降解而來。血紅蛋白破壞后亞鐵血紅素

經(jīng)代謝轉(zhuǎn)變成膽紅素，約占75%o②體內(nèi)膽紅素小部分來自組織（特別是肝細(xì)胞）中非血紅蛋白的血紅素蛋白質(zhì)（如細(xì)胞

色素P450、細(xì)胞色素b5,過氧化氫能等）的血紅素輔基的分解。③極小部分由造血過程中血紅素的少量分解，即無效

造血所產(chǎn)生

5.簡述肝功能檢查及其意義?①膽紅素代謝檢查了解其有無黃疸、黃疸的程度并鑒定其類型。②蛋白質(zhì)代謝檢查了解

肝細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的能力。③酶類測定了解肝細(xì)胞受損的程度。④反映肝內(nèi)外膽汁淤滯的檢查。⑤反映肝纖維化程度

的檢查。⑥反映肝占位性病變的檢查。⑦免疫功能檢查以確定肝炎類型。⑧輸血后肝炎檢查

6.試述ApoAI、ApoB測定的臨床意義?ADO作為脂類載體直接與脂類代謝ApoAI測定可直接反映HDL和LDL水平，

ApoAI含量與HDL含量正相關(guān)，與冠心病和動脈硬化的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)，ApoAI越高對人體越有益，而ApoB則相反，

其水平越高意味著LDL越高患冠心病危險越大，ApoAI下降和ApoB增高見于冠心病，還見于未控制的糖尿病、腎病

綜合征、活動肝炎、營養(yǎng)不良等，冠心病的優(yōu)選指標(biāo)是ApoB,其增高比HDL—CH降低和TCH升高更有意義，腦血

管病以HDL—CH,ApoAI下降更明顯

7.肌鈣蛋白是反映哪個器官損傷的標(biāo)志物?有何臨床意義?肌鈣蛋白（Tn）是心肌組織的一種特有的調(diào)節(jié)蛋白,嚴(yán)重心肌

缺損時釋放人血，是反映心肌損傷的血清標(biāo)志物。肌鈣蛋白以三種球型亞基組成，即TnT、Tnl和TnC,相對分子質(zhì)量

依次減小。其含量與年齡、性別、梗死部位及溶栓藥物種類等無關(guān)

8.尿中微量蛋白的檢測對診斷早期腎損傷有什么意義??蛋白尿是腎臟疾病的一個重要指標(biāo)。在某些腎臟病早期，尿常

規(guī)測定常為陰性，尿中蛋白質(zhì)含量實(shí)際已有微量的增加（20?200mg/L）o若早期發(fā)現(xiàn)腎臟損害疾病如糖尿病腎損害等,

必須做一些尿中微量蛋白的檢測，以監(jiān)測腎臟以及其他器官的功能狀態(tài)，提供可靠的生化指標(biāo)。

9.簡述電泳的工作原理。溶液中帶電粒子在直流電場中向電性相反的方向移動的現(xiàn)象稱為電泳。蛋白質(zhì)、核酸與生物

大分子具有兩性電離及各自等電點(diǎn)（pl）。在pH相同條件下這些生物分子將會有帶不同量的電荷。如果要分離一組等電

點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)，只要選擇一個合適pH,使多種蛋白質(zhì)在該pH的凈電荷差異最大，即可用此電泳方法檢查得到滿意

的分離效果

10.簡述光譜吸收法的原理和朗伯一比爾定律。光譜吸收法是指利用各種化學(xué)物質(zhì)所具有的吸收光譜的特性,來確定

其性質(zhì)、結(jié)構(gòu)和含量的方法。朗伯一比爾定律：A=kbc,其中k是吸光系數(shù)，b是比色杯光徑，c為溶液濃度。c為1

mol/L,b為1cm時，則系數(shù)k為摩爾吸光系數(shù)，以e表示，單位為L/（mol?cm）

11.何為連續(xù)監(jiān)測法?其特點(diǎn)是什么？連續(xù)測定酶促反應(yīng)過程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時間變化的多點(diǎn)數(shù)據(jù),求

出酶反應(yīng)初速度，間接計(jì)算酶活性濃度的方法稱連續(xù)監(jiān)測法

12.何為電極法?表示電極法的基本公式是什么？利用電極、電位和物質(zhì)濃度之間的關(guān)系來確定物質(zhì)含量的分析方法稱

為電極法。表示電極法的基本公式是能斯特方程式

13.自動生化分析儀性能評價指標(biāo)主要有哪些?精密度、波長準(zhǔn)確性、相關(guān)性、取樣量和最小反應(yīng)體積及攜帶污染情況

等

14.簡述干化學(xué)法原理。干化學(xué)法是以被測樣本中存在的液體為反應(yīng)介質(zhì)（液體中的水溶解了試紙條上的試劑）,被測成

分直接與固化于載體上的干試劑反應(yīng)的一種方式

1.細(xì)菌有那些特殊的結(jié)構(gòu)?它們在醫(yī)學(xué)上有何實(shí)際意義?①莢膜:許多細(xì)菌胞壁外圍繞一層較厚的黏性、膠凍樣物質(zhì)，

稱為莢膜。②鞭毛：某些細(xì)菌體表面附著有細(xì)長呈波狀彎曲的絲狀物，稱為鞭毛，是細(xì)菌的運(yùn)動器官。③菌毛：一些

細(xì)菌菌體表面遍布著短而細(xì)直的蛋白質(zhì)絲狀物，稱為菌毛，與細(xì)菌的致病性有關(guān)。④芽抱：某些細(xì)菌在一定環(huán)境條件

下，細(xì)胞質(zhì)脫水濃縮，在菌體內(nèi)形成一個折光性強(qiáng)的圓形或卵圓形小體，稱為芽抱。芽抱對外界的抵抗力增強(qiáng)，不易

被殺滅。

2.常見的細(xì)菌變異現(xiàn)象有哪些?有何實(shí)際意義?常見的細(xì)菌變異現(xiàn)象有非遺傳性（表型性）改變和遺傳性（基因型）變異。

其意義為：表型性改變，是指當(dāng)外界環(huán)境條件發(fā)生改變時所引起的細(xì)菌某一性狀的改變。當(dāng)條件回復(fù)，可恢復(fù)原來的

性狀，不遺傳給后代。常見的有：形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變，細(xì)菌形態(tài)的改變，毒力的改變。基因型變異，是細(xì)菌自身遺傳物

質(zhì)（細(xì)菌染色體、質(zhì)粒）發(fā)生改變而引起的變異。新獲得的性狀可以穩(wěn)定地傳給后代

3外毒素和內(nèi)毒素有哪些主要的區(qū)別？外毒素是某些細(xì)菌在代謝過程中產(chǎn)生并分泌到菌體外的毒性物質(zhì).主要由革蘭

陽性菌產(chǎn)生，少數(shù)革蘭陰性菌也能產(chǎn)生。外毒素的化學(xué)成分是蛋白質(zhì)，性質(zhì)不穩(wěn)定，易被熱、酸及酶破壞；外毒素的

毒性作用強(qiáng)；不同細(xì)菌產(chǎn)生的外毒素對人體組織有選擇性的毒性作用，引起特殊病變。外毒素有較強(qiáng)的抗原性，經(jīng)甲

醛處理可脫去毒性，但仍保留抗原性，成為類毒素，類毒素可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗毒素，用于人工自動免疫；內(nèi)毒

素是革蘭陰性桿菌細(xì)胞壁中的脂多糖成分，只有當(dāng)菌體死亡裂解或用人工方法裂解細(xì)菌后才釋放出來。內(nèi)毒素對機(jī)體

組織的毒性作用選擇性不強(qiáng)，引起的病理變化和臨床癥狀基本相同

4.正常菌群一般不引起人體感染，請問在什么情況下可發(fā)生感染？當(dāng)病人免疫功能下降，體內(nèi)微生態(tài)環(huán)境失衡或發(fā)生

細(xì)菌易位時，即可發(fā)生感染。

5.頭抱菌素類抗生素，是否第四代頭抱就一定比第一代頭胞抗菌效果好，為什么？不一定,要看對什么細(xì)菌而言。如

第一代頭抱菌素對革蘭陽性菌抗菌效果要好于第四代頭抱菌素，而第四代頭抱菌素對革蘭陰性菌抗菌能力則強(qiáng)于第一

代頭泡菌素。

6.藥敏試驗(yàn)時常報(bào)告“中介”結(jié)果，你知道其臨床意義嗎？中介是介于敏感和耐藥之間的一個實(shí)驗(yàn)緩沖區(qū)域,有兩層

意義：一是反映在操作中可能因控制不好出現(xiàn)的結(jié)果有誤，應(yīng)重復(fù)試驗(yàn)或改做MIC；二是提示高于正常給藥或在某些

生理藥物濃集的部位（如尿液中喳諾酮類）時細(xì)菌可被抑制

7.簡述用細(xì)菌制片和進(jìn)行革蘭染色的基本步驟。制片:取生理鹽水一滴，置玻片上，用接種環(huán)挑取菌落，將細(xì)菌放在

生理鹽水內(nèi)研勻成薄的菌膜后，自然干燥，并經(jīng)火焰固定。染色：①初染加結(jié)晶紫染于涂片上，染Imin后，用水洗去

染液。②媒染加碘液染Imin,水洗。③脫色加95%乙醇，不時搖動約30s,至無紫色脫落為止，水洗。④復(fù)染加稀釋

石炭酸復(fù)紅染30s,水洗，干后鏡檢。

8.簡述甲基紅試驗(yàn)的原理。某些細(xì)菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,并進(jìn)一步分解丙酮酸產(chǎn)生甲酸、乙酸、乳酸等使pH

下降至4.5以下，加入甲基紅試劑后呈紅色，為陽性。若分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步分解為其他非酸性

物質(zhì)，則pH在6.2以上，加入甲基紅試劑后呈黃色，為陰性

9.簡述金黃色葡萄球菌的最低鑒定特征。①革蘭陽性球菌,呈葡萄串狀排列；②血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán)；③觸酶試

驗(yàn)陽性；④血漿凝固酶試驗(yàn)陽性

10.簡述細(xì)菌鑒定的基本思路。是首先進(jìn)行革蘭染色以區(qū)分細(xì)菌的基本形態(tài)和革蘭染色性。根據(jù)形態(tài)和染色性的不同

做一些大的分類試驗(yàn)，如革蘭陰性桿菌做氧化酶試驗(yàn)，革蘭陽性球菌做觸酶試驗(yàn)，其后再進(jìn)行不同的生化試驗(yàn)，必要

時進(jìn)一步進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)

11.請敘述血液感染的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)程序無菌采集血液標(biāo)本一增菌培養(yǎng)（需氧或厭氧培養(yǎng)）f有菌生長取其菌落。具體步驟:

①涂片、染色、鏡檢。②直接藥敏試驗(yàn)一初級報(bào)告。③分離培養(yǎng)一觀察菌落，取菌落涂片、染色、鏡檢。純培養(yǎng)一血

清學(xué)鑒定、生化鑒定、藥敏試驗(yàn)一出示報(bào)告

2.補(bǔ)體的生物學(xué)活性是什么？補(bǔ)體的生物學(xué)活性是指補(bǔ)體活化過程的產(chǎn)物表現(xiàn)出的具有擴(kuò)大免疫效應(yīng)的多項(xiàng)生物學(xué)活

性，根據(jù)這些產(chǎn)物的活性特點(diǎn)可分為五類。（1）細(xì)胞溶解作用即膜攻擊作用新生的C5b可插入就近的細(xì)胞膜上，進(jìn)而有

C6、C7和C9與膜上有C5b組成膜攻擊單位C5b?67?8?9n,構(gòu)成可讓細(xì)胞膜內(nèi)外物質(zhì)自由出入的通道壁，造成細(xì)

胞或細(xì)菌的破裂死亡。（2）調(diào)理作用與病原體或免疫復(fù)合物共價鍵結(jié)合的C3b,還可與吞噬細(xì)胞表面的C3b受體（CR1）

結(jié)合，以促進(jìn)其吞噬過程，成為補(bǔ)體的調(diào)理作用。（3）引起炎癥反應(yīng)引起炎癥反應(yīng)（的物質(zhì)），C3a、C4a、C5a有過敏毒

素作用，C5a有對粒細(xì)胞的趨化作用，其綜合作用效果是導(dǎo)致組織充血、水腫及滲出等炎癥表現(xiàn)。（4）清除免疫復(fù)合物

即補(bǔ)體（C3b）的免疫粘連作用在替代活化途徑和經(jīng)典活化途徑新產(chǎn)生的C3b,都可以借其不穩(wěn)定的硫酯鍵斷裂，直接與

病原體（或其成分）或免疫復(fù)合物中的抗原成分共價性結(jié)合。和病原體或免疫復(fù)合物共價結(jié)合的C3b,可再與血小板或人

紅細(xì)胞表面的C3b受體（CR1）結(jié)合，使這些病原體或免疫復(fù)合物黏附于血小板或人的紅細(xì)胞上，成為免疫黏連作用。免

疫黏連作用不僅可減少血液中游離的免疫復(fù)合物及病原體，而且被黏附于血小板或紅細(xì)胞表面的免疫復(fù)合物或病原體

易被吞噬細(xì)胞捕捉吞噬，消除它們對機(jī)體的危害。（5）免疫調(diào)節(jié)作用補(bǔ)體可對免疫應(yīng)答的各個環(huán)節(jié)發(fā)揮調(diào)節(jié)作用：①C3

可參與捕捉、固定抗原，使抗原被APC處理與提呈；②補(bǔ)體成分可與多種免疫細(xì)胞相互作用，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖分化例

如C3b與B細(xì)胞表面CR1結(jié)合，可使B細(xì)胞增殖分化為漿細(xì)胞。CR2能結(jié)合C3d、iC3b及C3Dg,助B細(xì)胞活化；

③補(bǔ)體參與調(diào)節(jié)多種免疫細(xì)胞效應(yīng)功能，如殺傷細(xì)胞結(jié)合C3b后可增強(qiáng)對靶細(xì)胞的ADCC作用。

3細(xì)胞因子的生物學(xué)作用特點(diǎn)是什么？（1）細(xì)胞因子的作用高效性:極微量（pg水平）即可發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。細(xì)胞因子的

旁泌和自泌作用自產(chǎn)生分泌出來后作用于附近的細(xì)胞或自身產(chǎn)生細(xì)胞。（2）細(xì)胞因子作用的一時性：只在局部短時間發(fā)

揮作用，臨床上細(xì)胞因子作為藥物治療時，在藥理劑量下也可隨血流分部全身發(fā)揮作用。（3）細(xì)胞因子作用的多效性：

一種細(xì)胞因子可作用于多種靶細(xì)胞，發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)如促進(jìn)靶細(xì)胞增殖分化，增強(qiáng)抗感染和殺傷效應(yīng)，促進(jìn)或抑

制其他細(xì)胞因子的產(chǎn)生和細(xì)胞膜表面分子的表達(dá)。（4）細(xì)胞因子作用的網(wǎng)絡(luò)性：不同的細(xì)胞因子之間有相互協(xié)同或相互

制約的作用，由此構(gòu)成了復(fù)雜的細(xì)胞因子免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，如IL-1又到產(chǎn)生IL-2,IL-10抑制丫干擾素產(chǎn)生。

4.試論MHC在醫(yī)學(xué)上的意義。（1）器官移植:移植排斥反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是免疫應(yīng)答，故移植成敗的關(guān)鍵是供受者間MHC

的相容程度。（2）免疫調(diào)節(jié)：①抗原提呈：無論外源性抗原還是內(nèi)源性抗原大多需經(jīng)細(xì)胞加工處理后形成抗原肽段，再

與HLA-I、II類分子結(jié)合，HLA-抗原肽復(fù)合物共同表達(dá)于細(xì)胞膜表面，才能被CD8'T細(xì)胞或CD4T細(xì)胞所識別；

②MHC限制性：在免疫應(yīng)答過程中各種免疫細(xì)胞如Th、M4＞、B及TC細(xì)胞間的相互作用I均受到不同的MHC分子的

調(diào)控或嚴(yán)格的約束。例如，TC細(xì)胞識別病毒抗原或腫瘤抗原時必須識別自身MHC-I類分子；而Th細(xì)胞識別的抗原

肽必須是與自身MHC-II類分子結(jié)合者。這種特定T細(xì)胞識別特定類別自身MHC分子而發(fā)揮效應(yīng)的現(xiàn)象稱MHC限制

性；③決定免疫應(yīng)答能力：在HLA-H類基因區(qū)有一免疫應(yīng)答基因Ir可對免疫應(yīng)答進(jìn)行調(diào)節(jié)，包括增進(jìn)免疫應(yīng)答或抑

制免疫應(yīng)答。（3）HLA與疾病的關(guān)系：人類MHC即HLA復(fù)合體是目前已知的最復(fù)雜多態(tài)性的人類基因系統(tǒng)，在人類

證實(shí)強(qiáng)直性脊柱炎與B27有強(qiáng)相關(guān)性后，通過群體的流行病學(xué)調(diào)查和家系調(diào)查發(fā)現(xiàn)許多內(nèi)分泌疾病、類風(fēng)濕性疾病、

自身免疫性疾病、腫瘤和感染性疾病等與HLA有關(guān)。HLA與疾病易感染相關(guān)的主要位點(diǎn)是DR3DR4和B27等。

5.參與體液免疫應(yīng)答的細(xì)胞有哪些?如何發(fā)揮作用?胸腺依賴抗原（TD-Ag）次級B細(xì)胞產(chǎn)生抗體有下述細(xì)胞參加反應(yīng)。

（1）抗原呈遞細(xì)胞（APC）：主要是單核-巨噬細(xì)胞類將處理的抗原提呈給Th細(xì)胞并分泌IL-1,IL-6活化T細(xì)胞。（2）Th細(xì)

胞：經(jīng)抗原刺激活化后分泌細(xì)胞因子，特別是Th2細(xì)胞分泌IL-4、IL-5、IL-10等，除輔助B細(xì)胞活化分化變成漿細(xì)胞

產(chǎn)生抗體，還有調(diào)節(jié)抗體產(chǎn)生的作用。（3）B細(xì)胞：經(jīng)抗原次級后變成漿細(xì)胞合成并分泌抗體，在對應(yīng)抗原再次應(yīng)答時

B細(xì)胞是主要的抗原提呈細(xì)胞（APC）,可處理并提呈抗原給Th細(xì)胞，使之活化。（4）非胸腺依賴抗原（TI-Ag）直接刺激B

細(xì)胞產(chǎn)生IgM類抗體，如脂多糖或肺炎球菌莢膜多糖抗原可直接與B細(xì)胞表面的Ig結(jié)合，刺激其分化為漿細(xì)胞。

6.什么是自身抗原?它是怎樣產(chǎn)生的?有何臨床意義?一般來說,自身物質(zhì)對自身沒有抗原性。在一定條件下，自身物

質(zhì)對自身發(fā)揮抗原作用，引起免疫應(yīng)答，稱之為自身抗原。自身抗原產(chǎn)生的原因：（1）隱蔽的自身抗原：某些自身物質(zhì)

在正常條件下與血流和免疫系統(tǒng)相對隔絕，稱為隱蔽的自身抗原。外傷、感染或手術(shù)不甚等原因，使這些物質(zhì)進(jìn)入血

流，引起自身免疫應(yīng)答。例如眼外傷后，眼葡萄膜色素和眼晶體蛋白釋放可引起交感性眼炎和過敏性眼炎；精子抗原

釋放引起男性不育癥；甲狀腺球蛋白釋放引起變態(tài)反應(yīng)性甲狀腺炎；腦脊液和周圍神經(jīng)的髓鞘蛋白的釋放引起脫髓鞘

腦脊髓炎和外周神經(jīng)炎。（2）修飾的自身抗原：在病原微生物感染、電離輻射或藥物等影響下，自身組織分子改變，形

成新的抗原決定簇或暴露出內(nèi)部的隱蔽的決定簇，成為自身抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，引起自身免疫疾病。例如，

服用氨基比林或甲基多巴，可改變粒細(xì)胞或紅細(xì)胞表面的化學(xué)結(jié)構(gòu)，出現(xiàn)新的抗原決定簇，從而引起粒細(xì)胞減少癥或

自身免疫性溶血性貧血。

7.試述抗原抗體反應(yīng)的基本原理。抗體能夠特異性結(jié)合是基于兩種分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性,這兩種特性是由抗

原與抗體分子的一級結(jié)構(gòu)決定的。抗原抗體反應(yīng)分為兩個階段：第一階段為抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合階段，此階段

反應(yīng)快，僅需幾秒鐘至幾分鐘，但不出現(xiàn)可見反應(yīng)。第二階段為可見反應(yīng)階段，抗原抗體復(fù)合物在環(huán)境因素（如電解質(zhì)、

pH、溫度、補(bǔ)體）的影響下，進(jìn)一步交聯(lián)和聚集，表現(xiàn)為凝集、沉淀、溶解、補(bǔ)體結(jié)合介導(dǎo)的生物現(xiàn)象等肉眼可見的反

應(yīng)。此階段反應(yīng)慢，往往需要數(shù)分鐘至數(shù)小時。

8.簡述HVGR和GVHR的主要區(qū)另hHVGR是由宿主體內(nèi)致敏的免疫效應(yīng)細(xì)胞和抗體對移植物進(jìn)行攻擊，導(dǎo)致移植

物排斥；而GVHR是由移植物中的抗原特異性淋巴細(xì)胞，即“過路”淋巴細(xì)胞識別宿主抗原而發(fā)生的一種排斥反應(yīng)。

這種反應(yīng)不僅導(dǎo)致移植失敗，而且還能給受者造成嚴(yán)重后果。

9.T細(xì)胞亞群檢測有何臨床意義?T細(xì)胞亞群檢測已作為臨床輔助診斷與研究的一種重要手段，對各種疾病如自身免

疫病、免疫缺陷病、病毒感染、惡性腫瘤等的發(fā)生、發(fā)展、臨床療效考核和預(yù)后估計(jì)都具有極其重要的意義；對了解

機(jī)體的免疫狀態(tài)也有十分重要的意義。

10.簡述ELISA的基本原理。①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種

酶連接成酶標(biāo)抗原或酶標(biāo)抗體，這種酶標(biāo)抗原或酶標(biāo)抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，令受檢標(biāo)

本（測定其中的抗原或抗體）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相

載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例.

加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化形成有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的

深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度。

11.試述直接Coomb's試驗(yàn)與間接Coomb's試驗(yàn)的共同點(diǎn)與不同點(diǎn)。直接Coomb's試驗(yàn)主要用于檢查已吸附在

紅細(xì)胞上的不完全抗體。此試驗(yàn)常用于新生兒溶血癥、自身免疫性溶血癥及特發(fā)性自身免疫性貧血等檢查。間接Coomb'

s試驗(yàn)主要用于檢查血清中游離的不完全抗體。此試驗(yàn)多用于檢測母體Rh（D）抗體，可及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的

發(fā)生。亦可對紅細(xì)胞抗原不相容性輸血所產(chǎn)生的血型抗體進(jìn)行檢測。

12.簡述ELISA雙抗體夾心法的操作步驟。（1）特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體：洗滌除去未結(jié)合的抗體及

雜質(zhì)。（2）加受檢標(biāo)本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時間，讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合，形成固相抗原

抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。（3）加酶抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合

的酶標(biāo)抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈正相關(guān)。（4）加底物：夾心復(fù)合物中的酶催化底物成

為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。

13.ELISA操作的注意事項(xiàng)有哪些,?（1）加樣:在ELISA中除了包被外，一般需進(jìn)行4?5次加樣。在定性測定中有時不

強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性，例如規(guī)定為加樣1滴。此時應(yīng)該使用相同口徑的滴管，保持準(zhǔn)確的加樣姿勢，使每滴液體的體

積基本相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時應(yīng)將液體加在孔底，

避免加在孔壁上部，并注意不可出現(xiàn)氣泡。（2）孵育：在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加結(jié)合物后，

此時反應(yīng)的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定的要求，保溫容器最好是水浴箱，可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為

避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)⑵桨宸旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應(yīng)該是金屬的，傳熱容易。如用保溫箱，空濕

盒應(yīng)預(yù)先放在其中，以平衡溫度，這一步驟在室溫較低時更為重要。加入底物后，反應(yīng)時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。

（3）洗滌：洗滌在ELISA過程中雖不是反應(yīng)步驟，但卻是決定成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應(yīng)中沒有與固相抗原或

抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。（4）顯色及終止反應(yīng)：顯色是酶促反應(yīng)，應(yīng)按

規(guī)定的溫度和時間操作，用酸終止。（5）結(jié)果判斷：用比色計(jì)測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度和比

色計(jì)的質(zhì)量。

14.試述流式細(xì)胞術(shù)（