名詞解釋1、生物技術制藥：即采用現代生物技術,借助某些微生物、植物、動物生產醫藥物。2、基因工程制藥：指運用重組DNA技術生產蛋白質或多肽類藥物。3、細胞工程制藥：是運用動、植物細胞培養生產藥物的技術。4、酶工程制藥：是將酶或活細胞固定化後用于藥物生產的技術。5、發酵工程制藥：指運用微生物代謝過程生產藥物的技術。6、抗體工程制藥：運用抗原和抗體的特異性結合性質生產藥物的技術。7、先導化合物：通過優化藥用、減少毒性和副作用可以使其轉變為一種新藥的化合物。8、生物藥物的定義：是指運用微生物學、生物學、醫學、生物化學等的研究成果.從生物體、生物組織、細胞、體液等.綜合運用微生物學、化學、生物化學、生物技術、藥學等學科的原理和措施制造的一類用于防止、治療和診斷的制品。9貼壁細胞：生長須有貼附的支持物表面.依托貼附因子生長。10、懸浮細胞：生長不依賴支持物表面.在培養液中呈懸浮狀態生長。如血液淋巴細胞、生產干擾素的Namalwa(那馬瓦)細胞。11、兼性貼壁細胞：生長不嚴格依賴支持物。如中國地倉鼠卵巢細胞.小鼠L929細胞。12牛痘病毒：構建多價疫苗腺病毒、逆轉錄病毒：用于基因治療桿狀病毒：用于外源基因體現13、生物堿：含氮有機化合物14、生理活性物質：對細胞內生化代謝和生理活動起著調整作用。15、植物抗毒素（phytoalexins）是指在植物防御系統內能對抗微生物攻打的某些次級代謝產物.有些時候持續合成.有些時候在被刺激下才會產生抗毒素.或僅在被誘導下其產量才能增長。16、生物轉化定義（biotransformation,bioconversion）：也稱生物催化（biocatalysis）,是指運用生物離體培養細胞.固定化的植物（或微生物）細胞或從這些有機體中分離得到的酶等.對外源底物進行構造修飾而獲得更有價值產物的一種技術。17、抗體（antibody.Ab）：是B細胞在抗原的刺激下分化為漿細胞.產生具有與對應抗原發生特異性結合反應的免疫球蛋白。18、免疫球蛋白（immunoglobulin.Ig）：具有抗體活性或化學構造與抗體相似的球蛋白統稱為免疫球蛋白。19、多克隆抗體：由多種克隆細胞產生的針對多種抗原決定簇的混合抗體制劑。也稱第一代人工抗體20、基因工程抗體：是運用DNA重組技術.通過對抗體分子基因構造與功能理解.有目的地在基因水平上對抗體分子進行切割、拼接或修飾.或者直接合成基因序列.再將基因導入細胞體現產生的一類抗體.也稱第三代抗體21、藥用酶：指可用于防止和治療疾病的酶。22、酶法制藥：指運用酶的催化作用而將前體物質轉化為具有藥用功能的物質的過程。23、自然選育：在生產過程中.不通過人工誘變處理.根據菌種的自發突變而進行菌種篩選的過程.叫做自然選育或自然分離。填空1、生物藥物原料以天然的生物材料為主.包括人體、動物、植物、微生物和多種海洋生物等。2、注射用藥規定.對藥物制劑的均一性、安全性、穩定性、有效性等3、檢查上的特殊性由于生物藥物具有特殊的生理功能.（生物藥物的活性檢查）4、蛋白質類藥物的分離純化措施：（1）沉淀法蛋白質、酶的初步純化往往用沉淀法。其原理是使蛋白質膠體顆粒破碎.從而沉淀蛋白質。常用的有鹽析法、有機溶劑沉淀法、等電點沉淀法、與靶物質結合沉淀法（如抗原—抗體）等。（2）按分子大小分離的措施有超濾法和透析法（即膜分離法）、凝膠層析法、超速離心法等。其中膜分離法可用于生物大分子的濃縮、分級和脫鹽。（3）按分子所帶電荷進行分離的措施氨基酸、多肽、蛋白質、酶均為兩性電解質。根據它們的等電點不一樣.調整pH值進行互換、電泳、等電聚焦法等。（4）親和層析法大部分生物活性物質均有其作用的靶物質.如酶與底物（或克制劑）、抗原與抗體、激素與受體等。5、核酸類藥物的分離純化措施：提取法和發酵法6、糖類藥物的分離純化措施：非降解法、降解法。分離措施：沉淀法和離子互換層析法7、脂類藥物的分離純化措施：沉淀法和離子互換層析法8、氨基酸的生產措施：蛋白質水解法、發酵法、化學合成與酶促合成法9、氨基酸的分離措施：沉淀法、吸附法和離子互換法。10、基因工程菌的培養方式：分批培養、補料分批培養、持續培養、透析培養（運用膜的半透性）、固定化培養（對分泌型菌有利）基因工程菌培養原則11、⑴細胞搜集：離心法、膜分離法。⑵細胞破碎：機械破碎法、非機械破碎法物理、化學和生物學法12、貼壁細胞兩種形態：成纖維細胞型、上皮細胞型13、真核細胞基因體現載體種類：病毒載體、質粒載體14、培養基的種類：天然培養基、合成培養基、無血清培養基15、誘導子分類：內源性誘導子、外源性誘導子16、免疫法包括：體內免疫法、體外免疫法、脾內免疫法17突變分為：點突變和染色體畸變。點突變分為：堿基對置換和編碼組錯位突變（發生一種基因范圍內）染色體畸變（染色體構造的變化）包括缺失、倒位、反復、易位和染色體數目變化等構造變化.通過度離篩選.可獲得具有優良性狀的變異菌株。嘧啶與嘌呤嘧啶與嘧啶簡答1、基因工程制藥研究內容：答：（1）藥物品種的開發（2）基因工程疫苗（3）基因工程抗體（4）基因診斷與基因治療（5）建立新藥的篩選模型（6）改良菌種以產生新的微生物藥物（7）改善藥物生產工藝（8）轉基因動、植物生產蛋白質類藥物2、生物技術制藥的特性答：1、高技術2、高投入3、長周期4、高風險5、高收益3、藥理學特性（1）治療的針對性強治療的生理、生化機制合理.療效可靠。如細胞色素c為呼吸鏈的一種重要組員.用它治療因組織缺氧所引起的一系列疾病.效果明顯。（2）藥理活性高生物藥物是精制出來的高活性物質.因此具有高效的藥理活性（3）毒副作用小.營養價值高（4）生物副作用常有發生(5)用量少.價值高4、生物藥物按藥物的化學本質和化學特性來分；答：（1）氨基酸及其衍生物類藥物（2）多肽和蛋白質類藥物（3）酶和輔酶類藥物（4）核酸及其降解物和衍生物類藥物（5）糖類藥物（6）脂類藥物（7）細胞生長因子類（8）生物制品類5、生物藥物按原料的來源分類答：（1）人體組織來源的生物藥物：（2）動物組織來源的生物藥物：（3）植物組織來源的生物藥物（4）微生物來源的藥物（5）海洋生物來源的藥物；6、生物藥物按生理功能和用途分類答：（1）治療藥物（2）防止藥物（3）診斷藥物（4）其他生物醫藥用品7、生物藥物原料選擇選擇原則重要為答：有效成分含量高、原料來源豐富.易得；原料中雜質含量少；原料成本低等；此外植物原料采收具有季節性、微生物原料要注意微生物生長的對數期、動物原料有的要注意動物的年齡與性別。8、原料的保留措施重要有答：（1）冷凍法（2）有機溶劑脫水法（3）防腐劑保鮮法9、生物藥物的提取措施答：（1）是磨切法.（2）是壓力法.（3）是反復凍融.（4）是超聲波振蕩破碎法.（5）是自溶法或酶解法10、人類來源的其他原料的運用答：人胎盤的應用：人胎盤丙種球蛋白、人胎盤白蛋白、人胎盤RNA酶克制劑；人尿的綜合運用：11、人血漿白蛋白制備工藝要點：答：（1）絡合（利凡諾（雷佛奴爾;利凡諾;乳酸依沙吖啶沉淀））：血漿在攪拌下用NaHCO3調整pH至8.6.加入等體積的2%利凡諾溶液.充足攪拌後靜置2~4h.分離上清與絡合物沉淀。（2）解離：在沉淀中加滅菌蒸餾水。用0.5mol/LHCl調整pH至弱酸性.加NaCl至0.15%~0.2%.攪拌下解離。加熱去雜蛋白：充足解離後.65℃恒溫1h.離心分離出上清液。（3）熱處理（60℃.10h）：滅活病毒（4）檢查措施：凍干品為白色疏松物體。白蛋白含量占95%以上.水分<1%.水溶後pH為6.6~7.2.硫酸銨殘留量<0.01%.細菌學和熱源質檢測合格。12、動物來源藥物的特點答：1、具有生物藥物的共同特點.2、來源豐富3、種屬間差異的考慮13、植物來源藥物的特點答：1種類多2構造復雜3小分子4大分子14、生物技術在海洋藥物研究與發展中的重要作用。答：1、細胞工程、基因工程、酶工程2、開發海洋生物基因工程藥物3、開發海洋生物細胞工程藥物4、加強海洋微生物藥物的開發5、住研究內容：用基因工程技術研究抗腫瘤藥物。15、基因工程藥物的發展趨勢答：1、研發新型生物藥物的新模式2、人類基因組計劃與基因工程新藥的研發3、藥物靶標天然配基的發現和新藥的研發4、構建生物分子庫以發現新藥5、蛋白質工程與新藥研究6、糖基化工程與新藥研究7、代謝工程—組合生物學與新藥研發8、新型生物藥物制劑的研究16：運用基因工程技術生產藥物的長處：答：1、大量生產過去難以獲得的生理活性蛋白和多肽.為臨床使用提供有效的保障；2、可以提供足夠數量的生理活性物質.以便對其生理、生化和構造進行深入的研究.從而擴大這些物質的應用范圍；3、可以發現、挖掘更多的內源性生理活性物質；4、內源生理活性物質在作為藥物使用時存在的局限性之處.可通過基因工程和蛋白質工程進行改造和清除5、可獲得新型化合物.擴大藥物篩選來源。17：集落刺激因子臨床應用答：1腫瘤化療輔助治療2骨髓移植3骨髓異常增生綜合癥及再生障礙性貧血4艾滋病18：表皮生長因子臨床應用：答：1消化管潰瘍和燒傷的治療；2增長皮膚和牙齒生長3角膜移植、角膜損傷修復、白內障外科手術4傷口愈合及皮膚潰瘍19：心鈉素及利鈉多肽家族作用；答：1使血液向血管外移動.減少心臟的負荷2增長腎血流量3協調中樞神經系統和外周的活動20：基因工程藥物制藥的重要程序答：⒈目的基因的克隆⒉構建DAN重組體⒊DAN重組體轉入宿主菌⒋構建工程菌⒌工程菌發酵⒍體現產物的分離純化⒎產品的檢查等21、最佳的基因體現體系：答：1.目的基因的體現產量高2.體現產物穩定3.生物活性高4.體現產物輕易分離純化22、體現特點答：1不存在信號肽.多為胞內產物.提取困難2分泌能力局限性.常形成不溶性的包括體3蛋白質不能糖基化4產物蛋白質氮端多一種甲硫氨酸殘基5內毒素及蛋白酶的破壞6體現水平高7培養周期短8抗污染能力強23、影響目的基因在酵母菌中體現的原因答：（1）外源基因的拷貝數（2）外源基因的體現效率—啟動子（3）外源蛋白的糖基化（4）宿主菌株的影響24、質粒不穩定產生的原因答：⑴含質粒菌產生不含質粒子代菌的頻率和質粒丟失率⑵這兩種菌比生長速率差異的大小。25、提高質粒穩定性的措施答：1、選擇合適的宿主菌2、選擇合適的載體3、選擇壓力抗菌素克制質粒丟失菌的生長.提高質粒穩定性。4、分階段控制培養5、控制培養條件溫度、pH、培養基組分和溶解氧濃度6、固定化26、重組工程菌培養過程包括:答：⑴搖瓶操作基因工程菌生長的基礎條件。⑵培養罐操作確定培養參數和控制方案以及次序。27、影響發酵的重要原因：答：⒈培養基的影響⒉接種量的影響⒊溫度的影響⒋溶解氧的影響⒌誘導時機的影響⒍pH的影響28、基因工程藥物的分離純化特點：答：①體現產物在初始料中含量較低；②具有大量細胞及代謝產物；③體現產物穩定性差.易失活變性；④體現產物的種類繁多、構造不一、活性各異；⑤對其質量規定純度高、無菌、無熱原。29、建立分離純化工藝需理解的多種原因答：1、含目的產物的起始料的特點包括：①菌種的類型及其代謝特性。②原材料培養基的來源及其質量。③生產工藝及條件。④初始物料的物理、化學和生物學特性。⒉物料中雜質的種類和性質⒊目的產物特性⒋產品質量的規定30、基因工程藥物的質量控制理化性質鑒定答：（1）非特異性鑒別（2）特異性鑒別（3）相對分子質量測定（4）等電點測定（5）肽圖分析（6）氨基酸構成分析（7）部分氨基酸序列分析（8）蛋白質二硫鍵分析31、雜質檢測答：（1）蛋白質雜質（2）非蛋白類雜質32、動物細胞的生理特點答：⒈細胞的分裂周期長⒉細胞生長需貼附于基質,并有接觸克制現象。⒊正常二倍體細胞的生長壽命是有限的⒋動物細胞對周圍環境拾分敏感⒌動物細胞對培養基規定高⒍動物細胞蛋白質的合成途徑和修飾功能與細菌不一樣。33、病毒作為載體的長處：答：①雙鏈DNA.易重組②插入7～8kbDNA不影響正常病毒粒子的形成。③多角體蛋白和病毒粒子的形成無直接關系④多角體蛋白基因有非常強的啟動子⑤用光學顯微鏡可看到多角體.可以此作為標識物.選陽性克隆。⑥如用家蠶桿狀病毒.還可在蠶體體現外源基因34、小牛血清的作用答：⑴提供生長因子和激素⑵提供貼附因子和伸展因子⑶提供結合蛋白⑷提供必需脂肪酸和微量元素35、無血清培養基長處答:①提高反復性②減少微生物污染③供應充足穩定④產品易純化⑤防止血清原因對細胞的毒性⑥減少血清中蛋白對生物測定的干擾36、細胞體外培養基本條件:答：①無菌②營養充足,防止有害物質③氧氣④隨時清除代謝有害物質⑤良好的生存外環境pH:7.2-7.4滲透壓:290-300mOsm/Kg（毫滲透摩爾）溫度:37+0.5℃⑥及時分種37、植物組織培養過程再分化答：離體的植物器官、組織或細胞脫分化愈傷組織再分化根、芽植物體38、影響植物次級代謝產物累積的原因答;1、生物條件：外植體、季節、休眠、分化等；2、物理條件：溫度、光（光照時間、光強、光質）、通氣（氧氣）、酸度和滲透壓；3、化學條件：無機鹽、碳源、物質生長調整劑、維生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物質和前體等4、工業培養條件：培養罐類型、通氣、攪拌和培養方式。39、誘導子的作用機制答：1、膜脂超氧化和膜構造功能的變化2、形成和積累抗微生物的低相對分子質量植保素3、蛋白酶克制物的積累保護機體4、合成和分泌降解微生物細胞壁的酶.從而克制微生物生長40、植物生物轉化的意義答：（1）在植物細胞培養中.某些重要的次生代謝產物并不形成和累積。不過.這樣的培養物卻保留了將外源底物轉化為有用產物的能力。（2）生物轉化既可產生新的化合物、又可改造已經有的化合物、增長目的產物的產量以及克服化學合成的缺陷。（3）植物細胞和器官培養由于催化多步反應常常會產生中間體代謝產物.有助于我們闡明化合物的生物合成途徑。（4）催化反應可以在比較溫和環境下進行.副產物較少、耗能少.安全以及減少開支等。（5）植物生物轉化系統可以與有機合成結合使用而相得益彰。41、抗體藥物的特異性答：1、與有關抗原的特異性結合2、對腫瘤靶細胞的選擇性殺傷作用3、在動物體內的靶向性分布4、對有關的腫瘤顯示更強的療效5、在臨床使用獲得確定的療效42、抗體作為治療劑的作用答：(1)直接使抗原失去活性(2)使免疫效應細胞將其吞噬并加以破壞(3)使抗原表面弱化而易于受補體破壞43、單克隆抗體特點答：高特異性:均一性:來源穩定：44、藥用酶生產細胞的選擇答：1、選擇條件：（1）酶的產量高.可通過篩選、誘變、或采用基因工程、細胞工程等技術獲得。（2）輕易培養和管理（3）產酶穩定性好（4）有助于酶的分離純化（5）安全可靠2、生產菌的來源（1）菌種保藏機構和有關部門獲得（2）自然界篩選.土壤、深海、溫泉、火山、森林等菌種采集地3、產酶菌的篩選（1）菌種采集（2）菌種的分離初篩（3）純化（4）復篩（5）生產性能鑒定等45、菌種選育目的答：1防止菌種退化2處理生產實際問題3提高生產能力4提高產品質量5開發新產品46、自然選育的目的：答：1淘汰衰弱菌；2保留優良菌；3可純化菌種；4防止菌種衰退；5穩定生產和提高產量；47、種子擴培的目的答：1接種量的需要；2菌種的馴化；3縮短發酵時間；4保證生產水平。48、種子的選用條件答：1菌種細胞的生長活力強.移種至發酵罐後能迅速生長.緩慢期短；2生理形狀穩定；3菌體總量及濃度能滿足大容量發酵罐的規定；4無雜菌污染；5保持穩定的生產能力。49、工業微生物的培養類型答：①酶制劑兩步：第一步：菌體培養基+葡萄糖→菌體生長↑→酶合成↓→通氣↑微生物生長↑酶合成↓克制[菌體生長條件（營養期）]第二步：大量繁殖的菌種→搜集菌體濃縮物→洗滌→放入產酶培養基中（添加誘導物）→菌體產酶↑[產酶條件（自我繁殖期）]酶制劑兩步法特點：將菌體生長條件（營養期）與產酶條件（自我繁殖期）辨別開來。50、菌種保藏基本原理答：根據菌種的生理、生化特性.人為地發明條件使菌種的代謝活動處在不活潑狀態。51、配制工業發酵培養基的一般規定：答：1、營養物構成較豐富.濃度合適.能滿足菌絲體菌種發芽和生長繁殖成大量具有生理功能的需要（產物合成潛力提高）2、在一定條件下.多種原材料彼此不產生化學反應.理化性相對穩定。3、粘度適中.滲透壓合適。4、原材料品種及濃度對代謝產物生物合成過程要有助于主產物的生物合成.高產率維持時間長.副產物合成率要降至最低。5、不影響發酵過程的通氣和攪拌.便于產物的分離純化。6、原材料盡量選質優價廉、成本低。52、發酵染菌的危害答：發酵染菌能給生產帶來嚴重危害.防止雜菌污染是任何發酵工廠的一項重要工作內容。尤其是無菌程度規定高的液體深層發酵.污染防止工作的重要性更為突出。53工業常用的滅菌措施答：1化學物質滅菌2熱滅菌3輻射滅菌4過濾介質除菌54、菌種保藏所用的基質答：1）

斜面：C/N比例少些.營養成分貧乏些→防止產酸+代謝活動↑+保藏時間↓2）砂土：洗凈→防止具有機物→影響菌代謝→滅菌後產毒3）冷凍干燥：保護劑不能過度加熱→防止產生有毒物（變性+分解）名詞：1.基因體現：是指構造基因在生物體中的轉錄、翻譯以及所有的加工。2．融合蛋白：原核多肽和真核蛋白結合在一起稱融合蛋白3.比生長速率:菌體繁殖速率與培養基中菌體濃度之比4.對數生長期:細菌以最大比生長速率生長,是一種常數。5.“嚴緊反應”是當氨酰tRNA局限性時,核糖體在密碼子上停留,并合成被稱為魔點的ppGpp的成果。6.細胞因子：由一類重要由免疫細胞產生的、在體內含量極低的.但具有多種生物學活性的小分子蛋白多肽或糖蛋白。10.白細胞介素（IL）：是可以介導白細胞間及其他細胞間互相作用的細胞因子。13．腫瘤壞死因子：是一類能直接導致腫瘤細胞死亡的細胞因子。14.促血小板生成素：用于癌癥化療或放療引起的血小板減少癥15．集落刺激因子：選擇性刺激造血干細胞分化發育成某一細胞譜系的細胞因子的統稱16.激素：是由機體的特殊腺體合成和釋放.通過循環系統.作用于靶細胞受體的微量信息因子。18.外植體：用于植物組織培養的器官或組織.植物的部位如根、莖、葉、花、果、穗、胚珠、胚乳、花藥和花粉等均可作為外植體進行組織培養。

19.突變體：細胞自身發生遺傳變異或應用誘變處剪發生的遺傳變異所得的新細胞21.誘導子：是在植物抗病生理過程中誘發植物產生植物抗毒素和引起植物過敏反應的因子22.內源性誘導子：來自植物細胞的分子.多為植物細胞壁在微生物作用下的降解產物及沉積在細胞壁上的木質素。23.外源性誘導子：又稱真誘導子.指病原微生物在入侵植物時自身被降解的產物及其代謝產物27.誘變劑：可以提高生物體突變頻率的物質稱為誘變劑。28雜交育種：一般指兩個不一樣基因型的菌株通過接合或原生質體的融合使遺傳物質重新組合.再從中分離和篩選出具有新性狀的菌株。29.生長因子：從廣義上講.但凡微生物生長不可缺乏的微量的有機物質.如氨基酸、嘌呤、嘧啶、維生素等均稱生長因子。30.前體：在產物的生物合成過程中.被菌體直接用于產物合成而自身構造無明顯變化的物質稱為前體。31.產物增進劑：是指那些非細胞生長所必須的營養物.又非前體.但加入後卻能提高產量的添加劑。32.滅菌：指用化學的或物理學的措施殺滅或除掉物料或設備中所有的有生命的有機體的技術或工藝過程。33.消毒：用物理或化學措施殺死物料、容器、器具內外的病原微生物。35.單克隆抗體：僅識別抗原分子上同一抗原表位區的由同一克隆細胞產生的抗體填空：1.菌種保藏措施：定期保藏法、液體石蠟法、液體石蠟法、砂土管保藏法、冷凍干燥保藏法、液氮保藏法2、鏈霉菌長處：不致病、使用安全、分泌能力強、體現產物可糖基化。3.酵母菌長處：其基因組小.世代時間短.有單倍體雙倍體兩種形式.繁殖迅速.無毒性。能外分泌.產物可糖基化。4.單克隆抗體特點：高特異性、均一性、來源穩定5.重要基因工程體現體系比較：體現體系產物產生部位培養方式提純產物活性潛在危險大腸桿菌多肽、蛋白質、融合蛋白質菌體內輕易部分高產一般對原核好對真核差不大酵母多肽、蛋白質、糖基化蛋白菌體內外分泌輕易可高產菌體內稍復雜真核的靠近天然產物不大哺乳動物完整糖基化蛋白外分泌較難成本高、可高產簡樸可達天然產物需注意致癌6.某些比較重要的生物轉化類型:（1）羥基化（2）糖基化（3）醇和酮的氧化還原反應（4）、水解反應（5）環氧化反應6、羰基還原反應7、C-C雙鍵的還原反應8.硝基還原反應簡答：1、生物藥物按生理功能和用途分類（1）治療藥物（2）防止藥物（3）診斷藥物（4）其他生物醫藥用品2、生物藥物原料的選擇、預處理與保留措施（1）原料選擇選擇原則重要為：有效成分含量高、原料來源豐富.易得；原料中雜質含量少；原料成本低等；此外植物原料采收具有季節性、微生物原料要注意微生物生長的對數期、動物原料有的要注意動物的年齡與性別。（2）原料的預處理與保留：動物原料采集後要立即處理.清除結締組織、脂肪組織等.并迅速冷凍貯存。植物原料確定後.要擇時采集并就地清除不用的的部分.有用部分保鮮處理.搜集微生物時要及時將菌細胞與培養液分開.進行保鮮處理。3.生物藥物原料的保留措施重要有：（1）冷凍法（2）有機溶劑脫水法（3）防腐劑保鮮生物組織和細胞的破碎常用的破碎措施一是磨切法、二是壓力法；三是反復凍融法.四是超聲波振蕩破碎法4、蛋白質類藥物的分離純化措施（1）沉淀法常用的有鹽析法、有機溶劑沉淀法、等電點沉淀法、與靶物質結合沉淀法（2）按分子大小分離的措施有超濾法和透析法、凝膠層析法、超速離心法等。（3）按分子所帶電荷進行分離的措施.根據它們的等電點不一樣.調整pH值進行互換、電泳、等電聚焦法等。(4）親和層析法5、人體來源的生物藥物特點：（1）安全性好（2）效價高.療效可靠（3）穩定性好人體來源的生物藥物的研究意義（1）資源的有限性：人體來源是有限的（2）意義：從藥學角度研究清晰人體來源的構造和功能.對于使用現代生物技術生產藥物具有重大意義.如胰島素的生產。6.基因工程藥物制藥的重要程序⒈目的基因的克隆⒉構建DAN重組體⒊DAN重組體轉入宿主菌⒋構建工程菌⒌工程菌發酵⒍體現產物的分離純化⒎產品的檢查等★7.逆轉錄法1、mRNA的純化2、cDNA第一鏈的合成3、cDNA第二鏈的合成4、cDNA克隆5、將重組體導入宿主細胞6、cDNA文庫的鑒定7、目的cDNA克隆的分離和鑒定8、大腸桿菌體現特點：①不存在信號肽.多為胞內產物.提取困難②分泌能力局限性.常形成不溶性的包括體③蛋白質不能糖基化④產物蛋白質氮端多一種甲硫氨酸殘基⑤內毒素及蛋白酶的破壞⑥體現水平高⑦培養周期短⑧抗污染能力強9、真核基因在大腸桿菌中的體現形式：①以融合蛋白的形式體現藥物基因②以非融合蛋白的形式體現藥物基因③分泌型體現藥物基因10、枯草芽胞桿菌：①分泌能力強.蛋白質不形成包括體②產物蛋白質不能糖基化③有很強的胞外蛋白酶對產物降解。11.體現用的酵母宿主菌株應具有下列規定：①菌體生長力強；②菌體內源蛋白酶要較弱；③菌株性能穩定.常用的幾乎是突變株.防止使用答復突變率高的不穩定體系；最佳使用二倍體或多倍體菌株；④分泌能力強。12、絲狀真菌：分泌能力強.能對的進行翻譯後加工,有成熟的發酵和後處理工藝。13、哺乳動物細胞長處：體現產物可由重組轉化細胞分泌到培養液中.純化輕易。產物是糖基化的靠近天然物。缺陷：生長慢.生產率低.培養條件苛刻.費用高.培養液濃度稀。14.菌體生長的控制:①合適提高pH②分批培養中選擇不一樣的碳源③補料培養中控制補料速度④持續培養中控制稀釋速率等★15.質粒不穩定產生的兩個原因：⑴含質粒菌產生不含質粒子代菌的頻率和質粒丟失率⑵這兩種菌比生長速率差異的大小。16.影響發酵的重要原因：⒈培養基的影響⒉接種量的影響⒊溫度的影響⒋溶解氧的影響⒌誘導時機的影響⒍pH的影響17、建立分離純化工藝需理解的多種原因1.含目的產物的起始料的特點：（①菌種的類型及其代謝特性。②原材料培養基的來源及其質量。③生產工藝及條件。④初始物料的物理、化學和生物學特性。）⒉物料中雜質的種類和性質⒊目的產物特性⒋產品質量的規定18、細胞破碎措施：物理破碎法：高壓勻漿高速珠磨法超聲破碎法高壓擠壓法化學破碎法：滲透沖擊增溶法脂溶法生物破碎法：19、基因工程藥物目的產物的質量控制：1、生物學活性測定2、理化性質鑒定3、蛋白質含量測定4、蛋白質純度分析5、雜質檢測6.穩定性考察7.產品一致性的保證20.動物細胞制藥特點：缺陷:培養條件高、成本貴、產量低。長處:多半分泌在胞外.搜集純化以便；得到了較完善的翻譯後修飾.尤其是糖基化.故與天然產品一致.更適于臨床。21.真核細胞基因體現使用的載體有兩類：毒載體㈡質粒載體22、細胞體外培養基本條件:①無菌②營養充足,防止有害物質③氧氣④隨時清除代謝有害物質⑤良好的生存外環境⑥及時分種★23.添加小牛血清的作用：⑴提供生長因子和激素⑵提供貼附因子和伸展因⑶提供結合蛋白⑷提供必需脂肪酸和微量元素24.無血清培養基長處：①提高反復性②減少微生物污染③供應充足穩定④產品易純化⑤防止血清原因對細胞的毒性⑥減少血清中蛋白對生物測定的干擾25.外源性誘導子分類：多糖類、糖蛋白類、蛋白類、不飽和脂肪酸類★26.誘變劑：物理：紫外.快中子.等離子等化學：硫酸二乙酯.亞硝基胍等★27.菌種保藏目的：提高菌種存活率和減少菌種的變異.盡量使菌種保持原有的優良生產性能。隨時為生產、科研提供優良菌種。28.菌種保藏基本原理：根據菌種的生理、生化特性.人為地發明條件使菌種的代謝活動處在不活潑狀態。29.冷凍干燥時.凍結速度↓→細胞內形成冰晶→細胞構造機械損傷→菌種死亡率↑→導致菌種變異↑→菌種性能衰退↑30.影響培養基質量的原因：原材料質量的影響、水質的影響、滅菌的影響、其他影響原因★31.工業常用的滅菌措施：化學物質滅菌熱滅菌輻射滅菌過濾介質除菌★32.發酵雜菌污染途徑及防治：種子帶菌的原因及防止、設備滅菌