組織學與胚胎學

HistologyandEmbryology華中科技大學同濟醫學院解剖學系組織胚胎學室彭挺(pengting@)組織學的定義、基本研究內容和意義組織學基本研究方法和技術學習組織學的方法緒論學習重點Studyemphases組織學(Histology)研究正常人體微細結構及其相關功能的科學光鏡結構(lightmicroscopicstructure,LM)電鏡(超微)結構(electronmicroscopicstructure,EM)光鏡結構(μm)電鏡結構(nm)一、組織學的研究內容人體結構層次(從宏觀到微觀)整體/個體系統器官組織細胞分子一、組織學的研究內容一、組織學的研究內容組織(tissue)：由形態相似、功能相近的細胞和細胞外基質組成細胞(cell)：組織的結構和功能單位細胞外基質(extracellularmatrix)：由細胞產生的非細胞物質，構成細胞生存的微環境纖維、基質、體液類型上皮組織、結締組織、肌組織、神經組織一、組織學的研究內容器官(organ)幾種組織按照一定方式有機組合構成，執行特定的功能空腔性器官：心、胃、膀胱、子宮等實質性器官：肝、脾、肺、腎等系統(system)由結構上連續或功能上相關的器官組成，完成連續的生理活動神經系統、循環系統、免疫系統、內分泌系統等生物醫學科學的基礎學科與基礎醫學和臨床醫學各學科關系密切是解剖學從宏觀向微觀發展的結果是細胞生物學的姐妹學科多個學科以組織學作為形態學基礎生理學的基礎：在解剖學的基礎上，從宏觀到微觀，全面掌握人體的形態結構，探索生命現象的物質基礎，理解生理過程病理學的基礎：識別病理形態變化的正常標準組織學的最新理論和技術直接促進臨床醫學的發展組織學研究層次深入到分子水平組織學研究領域從單純的形態學描述擴展到重大前沿領域二、學習組織學的意義現代組織學是一門學術思想極為活躍、充滿研究熱點的前沿學科不僅為學習其他基礎課程和臨床各學科打下基礎，組織學的研究熱點和進展也在擴展科學研究視野、活躍學術思想、啟發創新等方面提供有用的啟示二、學習組織學的意義光學顯微鏡技術電子顯微鏡技術組織化學術同位素放射自顯影術細胞／組織／器官培養術形態學定量術三、組織學的研究方法與技術基本過程標本制備標本染色標本的顯微鏡觀察分類一般光學顯微鏡術特殊光學顯微鏡術光學顯微鏡技術標本制備切片法石蠟切片法冰凍切片法火棉膠切片法振蕩切片法非切片法一般光學顯微鏡術標本制備取材固定：常用固定劑—福爾馬林(甲醛水溶液)脫水、透明：酒精、二甲苯包埋：石蠟（包埋劑：熔點60℃~65℃）切片：石蠟切片機（5~10μm）石蠟切片機刀片石蠟切片法染色切片脫蠟、入水染料染色常用HE染色法堿性染料：蘇木素(hematoxylin)

酸性染料：伊紅(eosin)脫水、透明、封片石蠟切片法光學顯微鏡分辨率：0.2μm放大倍數：1000~1500倍組織學、病理學：400倍細胞生物學、病原生物學：1000倍一般光學顯微鏡觀察H-E染色嗜堿性嗜酸性中性嗜堿性嗜酸性一般光學顯微鏡觀察其他組織學染色銀染法(silverstain)：硝酸銀（AgNO3）親銀性(argentaffin)Ag+Ag嗜銀性（argyrophilia)Ag+Ag還原反應還原反應還原劑神經組織銀染一般光學顯微鏡觀察其他組織學染色異染性(metachromasia)甲苯胺藍使肥大細胞顆粒呈紫紅色一般光學顯微鏡觀察涂片(Smear)：血液、體液、培養細胞鋪片(Strechedpreparation)：疏松結締組織、腸系膜磨片(Groundsection)：骨、牙等非切片法熒光顯微鏡術(Fluorescencemicroscopy)相差顯微鏡術(phasecontrastmicroscopy)暗視野顯微鏡術(darkfieldmicroscopy)激光掃描共聚焦顯微鏡術(laserscanningconfocalmicroscopy)特殊光學顯微鏡術電子顯微鏡(electronmicroscope，EM)的特性以電子束代替可見光以電磁場代替玻璃透鏡分辨率：0.1~0.2nm放大倍數：數十萬倍分類透射電鏡(transmissionEM,TEM)掃描電鏡(scanningEM,SEM)電子顯微鏡術觀察細胞內部超微二維結構透射電子顯微鏡transmissionelectronmicroscope,TEM電子束穿透樣品超薄切片(60nm)電子密度與圖像電子染色電子密度高(electron-dense)電子密度低(electron-lucent)觀察表面三維立體結構細電子束在鍍有碳膜或金膜的樣品表面掃描，使樣品表面產生二次電子分辨率為2.5nm掃描電子顯微鏡scanningelectronmicroscope,SEM定義利用物理、化學、生物化學、免疫學或分子生物學原理和技術，與組織學技術相結合，定性、定位顯示組織細胞內特定的化學成分主要類型一般組織/細胞化學術免疫組織/細胞化學術原位雜交組織/化學術組織化學術定義：利用物理和化學反應原理，使組織細胞內的特定化學成分形成有色沉淀，對其進行定性、定位及定量研究過碘酸-希夫反應(PAS反應)顯示多糖和蛋白多糖一般組織化學術定義：利用抗原-抗體特異性結合的免疫學原理，檢測組織細胞內的多肽、蛋白質等抗原分子標記的第二抗體組織中的抗原第一抗體免疫組織化學技術定義：根據分子生物學堿基互補配對原理，用標記的核酸探針(已知堿基序列的核酸片段)與細胞內待檢測的核酸進行特異性結合(雜交)，對待測核酸進行定性、定位和定量觀察雜交體原位雜交組織化學技術理論結合實踐：理論課學習的知識，在實驗課中觀察、驗證，加強對理論的理解觀察組織切片、顯微圖片、電鏡照片，貫穿理論－實踐－再理論的過程眼、腦、手并用教育部愛課網/mooc/數字切片

5/dssweb/四、組織學的學習方法組織學與胚胎學精品課程組織學數字切片注冊與登錄進入數字切片庫數字切片庫目錄選擇切片切片全貌20倍觀察移動視野40倍觀察移動視野結構與功能的聯系任何組織、細胞的結構都有相應的功能，任何組織、細胞的功能都有與之相適應的結構基礎豐富的粗面內質網合成肽、蛋白質功能旺盛HE染色嗜堿性溶酶體、吞噬體(泡)發達：吞噬功能神經細胞的突起：有利于形成網絡……四、組織學的學習方法建立動態變化概念以辯證、發展的觀點作指導，動態、全面、準確觀察肝細胞中糖原顆粒的多少和分布因進食和饑餓而不同甲狀腺濾泡上皮細胞的形態因功能狀態不同而異子宮內膜結構隨月經周期的變化……四、組織學的學習方法發揮空間思維和想象力，建立由平面到立體的概念四、組織學的學習方法組織切片