B41DB130DB1302/T315—20112011-11-01發(fā)布2011-12-01實施唐山市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB1302/T315—2011本標(biāo)準(zhǔn)由唐山市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：唐山市動物疫病預(yù)防控制中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：張軍劉乃強張進紅馬永興張子佳劉志勇楊艷周忠良李穎劉愛麗賈日東齊靜于冬梅劉潔孫璐。1DB1302/T315—2011狐貍?cè)斯な诰夹g(shù)規(guī)程1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了狐貍?cè)斯な诰蟹N公狐選擇、場地、人員和器械要求、采精、精液檢查及輸精等。本標(biāo)準(zhǔn)適用于唐山市行政區(qū)域內(nèi)狐貍?cè)斯な诰僮骷夹g(shù)。2術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。2.1人工授精用人工方法采取公狐精液，經(jīng)檢查處理后，輸入發(fā)情母狐子宮內(nèi)，使其受孕。2.2發(fā)情鑒定通過外部觀察或其他方式確定母狐發(fā)情程度。3種公狐選擇純種，品質(zhì)優(yōu)良,健康情況良好，食欲好，糞便正常，毛色順亮，無遺傳疾病。4場地和人員人工授精室內(nèi)保持衛(wèi)生，干凈、整潔，空氣新鮮；采精室、精液處理室和輸精室經(jīng)過紫外線燈（以10㎡一支40W紫外線燈照射1h-2h，并在關(guān)閉燈光后4h滅消毒液消毒；室外場地用1%-2%火堿水或20%生石灰水進行消毒待用。4.2人員具有相關(guān)專業(yè)技術(shù)知識。工作人員應(yīng)穿戴消毒過的工作服、工作帽、鞋進入工作室，工作室不允許無關(guān)人員隨意進入，也不允許工作人員穿著工作服走出工作室外。5器械清洗和消毒5.1器械種類頸鉗套子、保定架、集精杯、顯微鏡、載玻片、蓋玻片等。5.2清洗和消毒凡是接觸精液和母狐生殖道的輸精用具、場地都應(yīng)進行清洗和消毒。方法如下：a)玻璃器皿使用前用水浸泡和洗滌，有污物的宜用加洗滌劑的溫水或重鉻酸鉀洗滌液浸泡數(shù)小時后，用水洗凈，輸精針、集精杯等玻璃器皿用后消毒液浸泡1h，后蒸餾水反復(fù)沖洗3-4次，然后放入160℃烘干箱保持1h，自然冷卻后備用。2DB1302/T315—2011b)金屬器械金屬輸精器類洗凈后，置電熱干燥箱120℃保持1h，自然冷卻待用。c)橡膠、塑料制品玻璃輸精器或滴管上的橡膠頭用蒸汽浸泡消毒；塑料制品在清潔烘干后，可放置在距離紫外燈下60cm處照射0.5h以上。6采精6.1種公狐準(zhǔn)備用經(jīng)0.1％-0.2％新潔爾滅溶液浸泡的毛巾擦拭被采精狐的腹部和會陰部,再用清潔溫水擦拭一遍。6.2保定將公狐放在采精架上。無采精架時，可由一人保定頭部，一人保定尾部。6.3采精方法a)采精員輕輕按摩公狐的睪丸和會陰部，給狐一個采精的信號。b)藍(lán)狐：右手呈握筆式將陰莖輕輕握住（即拇指和食指在陰莖兩側(cè)，中指在腹面握住陰莖）開始擼壓包皮，速度由慢逐漸加快，通過反復(fù)擼壓刺激陰莖使其勃起，并繼續(xù)擼壓，待陰莖中部的球狀體海綿體膨大。把集精杯罩在龜頭上，準(zhǔn)備收集精液。同時有節(jié)奏地擼壓球狀體及其后部的陰莖，促使公狐射精。銀狐：一手呈握筆式將陰莖根部輕輕握住，另一手拇指有節(jié)奏的捋龜頭尖部，待陰莖勃起，把集精杯傾斜罩在龜頭邊緣，準(zhǔn)備收集精液，同時有節(jié)奏地繼續(xù)捋龜頭尖部，促使公狐射精。c)射出的乳白色液體為精液，含有大量精子，收集好備用。d)公狐射精后陰莖很快蔫萎，將其送回包皮內(nèi)。6.4采精頻率每天采精1次，連續(xù)2天后，休息一天。7精液的檢查7.1一般性狀檢查c)氣味：無味或略帶腥味。d)狀態(tài)：稀釋后的精液在光亮處能看到云霧狀。7.2實驗室檢查f)畸形精子檢查：畸形精子率11％以下。g)密度在三級（400倍顯微鏡下，每個視野有70-80個有效精子）以上。3DB1302/T315—20118精液稀釋方法先將溫度在25℃-28℃的稀釋液吸入注射器或滴管內(nèi)，左手拿裝有精液的集精杯（試管保持適當(dāng)?shù)膬A斜度，把稀釋液沿著管壁緩緩加入，邊加邊輕輕搖動集精杯（試管），加完稀釋液后集精杯（試管）放在手心內(nèi)輕輕搖動，使之充分混合均勻。若稀釋倍數(shù)超過3倍以上者，稀釋液應(yīng)分2-3次加入。釋后每毫升精液中保持直線運動的精子數(shù)1億-2億。9精液的異地使用精液應(yīng)分裝在專用瓶中，外用棉花和紗布包好，存放時間不超過6h。10母狐發(fā)情鑒定10.1發(fā)情鑒定方法10.1.1外陰觀察結(jié)合鏡檢細(xì)胞法母狐發(fā)情表現(xiàn)如下：a)發(fā)情前期：陰毛分開，顯露陰門，陰門腫脹，陰蒂增大，陰道涂片多數(shù)為白細(xì)胞，少量有核細(xì)胞，持續(xù)時間為4-6天.b)發(fā)情期：陰門腫脹明顯，幾乎呈圓形，有彈性，陰蒂更大，粉紅色，陰道涂片中的無核細(xì)胞與有核細(xì)胞數(shù)量相近，持續(xù)時間為2-3天。c)發(fā)情盛期（排卵期）：陰門腫脹呈圓形，陰蒂外翻，彈性變小，顏色變淺，有乳白色粘液分泌，陰道涂片中的白細(xì)胞和有核細(xì)胞數(shù)量較少，角化無核細(xì)胞最多，持續(xù)時間為3-5天。d)發(fā)情后期：陰門逐漸恢復(fù)正常，當(dāng)公狐靠近時，搖頭尖叫，拒絕接近。在發(fā)情期把發(fā)情母狐放到試情公狐籠內(nèi)，母狐接授公狐聞、嗅等活動，公狐爬跨時母狐站立不動，將尾歪向一側(cè)，這是發(fā)情的象征，可以輸精。10.2輸精最佳期在發(fā)情盛期微晚些是輸精的最佳時期，即：當(dāng)發(fā)情母狐外陰腫脹開始消退，陰裂上部出現(xiàn)柔軟有彈性褶皺，外陰流出有特殊氣味的陰道分泌物，分泌物由白變清澈透明時，是輸精的最佳時機。11輸精每只狐貍使用1份的經(jīng)消毒的輸精針、陰道擴張管。11.2輸精方法4DB1302/T315—2011助手將母狐保定在輸精臺（架）上，把尾巴稍提起。輸精員一手拇指、食指、中指固定子宮頸位置，一手握持輸精器末端把擴張管緩緩插入陰道內(nèi)，直抵子宮頸處，再把輸精針放入擴張管內(nèi)，并使其彎頭向上，一手托住母狐的腹部，沿著擴張管下端尋找子宮頸，并用拇指和食指捏住，把輸精針輕輕插入子宮頸1cm-2cm處（如已插入子宮頸內(nèi)，一般感到?jīng)]有阻力，并有向內(nèi)吸的感覺），另一助手將事先吸好的1.0ml精液注射器迅速安在輸精針上，緩緩將精液推入子宮頸內(nèi)，取下注射器，輸精員用手指輕彈幾下輸精針，把殘留在輸精針內(nèi)的精液彈入子宮內(nèi)，然后同擴張管一起取出。保定的助手把母狐取下，提起尾巴使其頭向下