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文檔簡介
1.2.1微生物的培養技術及應用討論:應該先對制作用具和原料進行滅菌處理,再接種純的菌種,并控制發酵條件,避免雜菌進入。從社會中來1.什么是微生物?P9相關信息2.前提/重要基礎:3.基本要求:(1)提供微生物生長繁殖所需營養和環境條件(2)確保其它微生物無法混入(3)并將需要的微生物分離出來培養基無菌技術純化培養高壓蒸汽滅菌鍋一、微生物的培養技術(一)培養基的配制1.培養基?用途?2.培養基的種類?3.培養基的必備營養成分?4.舉例說明如何滿足不同微生物的特殊需求。閱讀教材P9-10完成以下問題:
需求→營養基質按物理性質分為:+凝固劑
(如瓊脂)1.概念:
2.用途:3.類型:(一)培養基的配制液體培養基固體培養基4.培養基的營養構成:組分含量提供的主要營養牛肉膏5g
蛋白胨10gNaCl5gH2O定容至1000ml某種常見的細菌培養基——1000ml牛肉膏蛋白胨培養基的營養構成碳源P10相關信息氮源維生素磷酸鹽無機鹽水④厭氧微生物:①乳酸桿菌:②霉菌:③細菌:維生素酸性中性或弱堿性無氧思考:所有微生物是否都可以用培養基進行培養?病毒獲得純凈的微生物培養物的關鍵是:防止雜菌污染。(二)無
菌
技
術操作的空間、操作者的衣著和手培養微生物的器皿、接種用具和培養基消毒滅菌①煮沸消毒法P10相關信息:
生物消毒法②巴氏消毒法③化學藥物消毒法④紫外線消毒①濕熱滅菌法培養基等②干熱滅菌法玻璃器皿金屬器具③灼燒滅菌法接種工具充分燃燒層1.培養物:3.純培養:2.純培養物:培養基內,特定種類微生物群體。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體。獲得純培養物的過程。(三)微生物的純培養【探究
實踐】酵母菌的純培養
菌落:原理:微生物群分散或稀釋單個細胞單個菌落繁殖念珠菌顯色培養基大腸桿菌培養基酵母菌培養基金黃色葡萄球菌和枯草桿菌培養基單菌落:概念:一般是由單個微生物繁殖形成的純培養物。鑒別菌種:菌落的大小、形狀、顏色、透明度、光澤度等是鑒定菌種的重要依據。方法:平板劃線法和稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法平板劃線法P19稱切過濾加葡萄糖、瓊脂定容實驗方法步驟:配制培養基1.制備培養基配制培養基滅菌分裝,塞包扎、勒緊滅菌培養皿滅菌實驗方法步驟:1.制備培養基冷卻到50℃左右酒精燈火焰附近配制培養基防止瓶口的微生物污染培養基滅菌倒平板不能完全打開,以免雜菌污染防止皿蓋上冷凝水落入培養基造成污染。實驗方法步驟:1.制備培養基1拔2過3倒4冷卻、倒置如果需要調節培養基的pH,應該在定容完成后,滅菌之前進行操作。1.培養基pH要適宜,調pH是在滅菌前還是滅菌后?思考2.怎么確定所倒平板未被雜菌污染?將所倒平板放入37℃的恒溫箱中培養12h~24,觀察是否有菌落存在以確定是否被污染或滅菌是否徹底。3.丙→乙→甲→丁連續劃線、逐步稀釋實驗方法步驟:2.接種和分離酵母菌平板劃線法1燒2冷卻、拔3過2取5過、塞7劃、重復6劃、蓋第1次劃線灼燒接種環滅菌第2次劃線灼燒接種環滅菌第3次劃線灼燒接種環滅菌灼燒接種環滅菌12345①取一次,連續劃線多次;②上一末端始,首尾不相接;③每次劃線前、劃線操作結束后灼燒接種環;平板劃線法注意事項酵母菌數隨著劃線次數的增加而逐步減少,最終得到由單細胞繁殖而來的菌落。殺死原有微生物殺死殘留菌種,使下一次劃線的菌種直接來源上次劃線的末端,從而使每次劃線時菌種數目逐漸減少,直至得到單個細胞。殺死殘留菌種,避免細菌污染環境和感染操作者。接種后的平板一個未接種的平板倒置,(空白對照)實驗方法步驟:3.培養酵母菌酵母菌的純培養2.接種和分離酵母菌1.制備培養基3.培養酵母菌①配制培養基(馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、水)②滅菌③倒平板(在
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