ICS65.080GXAFDeterminationofGammaaminobutyricacidinwatersolublefertilizers—High-performanceliquidchromatographymethodIT/GXAF0018—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由廣西壯族自治區(qū)分析測試研究中心提出。本文件由廣西肥料協(xié)會歸口并宣貫。本文件起草單位：廣西壯族自治區(qū)分析測試研究中心、南寧漢和生物科技股份有限公司、新勝利工業(yè)集團有限公司、廣西壯族自治區(qū)地質礦產測試研究中心、廣西壯族自治區(qū)環(huán)境保護科學研究院、廣西南環(huán)檢測科技有限公司、平南縣公共檢驗檢測中心、廣西壯族自治區(qū)欽州生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心、廣西交科集團有限公司、廣西高林肥業(yè)有限責任公司、廣西東亞撒陽肥料有限公司。本文件主要起草人：陳桂鸞、劉程、鄧藝萍、班雁華、黃一帆、韋英亮、潘揚昌、張思敏、吳瓊婧、韋猛、梁杰、梁鑫佳、劉輝庭、鄒源、謝敏蓉、黃孜祺、班書浩、韋樹燕、陸云、劉洋、李創(chuàng)、覃柳妹、覃保林、余義發(fā)、潘能良、潘巨武、梁承、白雪、胡瓊、梁豐收、李福信、韓幸、覃飛妮、農東紅、謝基靜、王潔、覃榕耐、高信雄、鐘華慶、李輝寧、閉仁耀、陳艷。1T/GXAF0018—2024水溶肥料中γ-氨基丁酸的測定高效液相色譜法本文件描述了水溶肥料中γ-氨基丁酸測定的高效液相色譜法。本文件適用于水溶肥料中γ-氨基丁酸含量的測定。本方法檢出限為0.02μg/mL，定量限為0.08μg/mL。2規(guī)范性引用下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法QB/T5633.7—2022氨基酸、氨基酸鹽及其類似物第7部分：γ-氨基丁酸3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1γ-氨基丁酸γ-aminobutyricacid具有生物活性功能的四碳非蛋白質氨基酸，可以促進植物營養(yǎng)生長、提高植物抗逆性、促進植物對中微量元素的吸收。結構見附錄A。4原理按照QB/T5633.7—2022規(guī)定執(zhí)行。5試劑與材料除非另有說明,本方法所用試劑分析純以上試劑,水應符合GB/T6682一級水的規(guī)定。5.1γ-氨基丁酸標準品：含量≥99.0％。5.2碳酸氫鈉。5.32,4-二硝基氟苯。5.4乙腈：色譜純。5.5三水合乙酸鈉。6儀器和設備6.1配有紫外檢測器和數據處理系統(tǒng)的高效液相色譜儀。6.2電子天平：感量為0.0001g。6.3恒溫水浴鍋。7參考色譜條件7.1色譜柱：C18柱，5μm,4.6mm×250mm(或可以選用性能相當的色譜柱)。2T/GXAF0018—20247.2流動相：乙酸鈉溶液-乙腈（80∶20）。7.3檢測波長：360nm。7.4流速：1.0mL/min。7.5柱溫：30℃。7.6進樣量：10μL。8參考色譜條件8.1衍生緩沖溶液的制備稱量4.2g碳酸氫鈉，將其溶解于水中，并將溶液定容至100mL容量瓶中，混合均勻。溶液需現配即用。8.2衍生試劑溶液的制備2,4-二硝基氟苯乙腈溶液（1移取2,4-二硝基氟苯1.00mL，用乙腈溶解并定容至100mL容量瓶中，混勻。8.3標準溶液的制備稱取γ-氨基丁酸標準品0.025g（精確至0.0001g），用水溶解定容至100mL容量瓶中，混勻。移取1.00mL置于10mL容量瓶中，加入0.50mL衍生緩沖溶液（8.1），隨后再加入1.00mL衍生試劑溶液（8.2混勻。60℃±2℃水浴恒溫1h，冷卻至室溫后加水定容至10mL，混勻。用0.22μm濾膜過濾，濾液作為標準溶液。8.4試樣的制備8.4.1固體樣品經多次縮分后取100g，研磨后過0.50mm試驗篩（潮濕時先過1.00mm試驗篩），混合均勻后置于干燥容器中。8.4.2液體樣品經充分搖勻后取200mL，置于干燥容器中。8.5試樣溶液的制備稱取適量試樣約含γ-氨基丁酸0.025g，用水溶解定容至100mL容量瓶中，混勻。稱取1.00mL置于10mL容量瓶中，加入0.50mL衍生緩沖溶液（8.1隨后再加入1.00mL衍生試劑溶液（8.2混勻。60℃±2℃水浴恒溫1h，冷卻至室溫后加水定容至10mL，混勻。用0.22μm濾膜過濾，濾液作為試樣溶液。8.6流動相的制備8.6.1乙酸鈉溶液的制備稱取6.8g三水合乙酸鈉，將其溶解于適量水中，隨后稀釋至1000mL，混勻，過濾。8.6.2乙酸鈉溶液-乙腈（80∶20）量取乙酸鈉溶液（8.6.1）800mL和過濾超聲后的乙腈200mL，混勻。9測定將標準溶液（8.3）及試樣溶液（8.5）分別注入高效液相色譜儀中，并記錄下各自的色譜圖。根據色譜峰的峰面積，以外標法計算出相應的γ-氨基丁酸的濃度。3T/GXAF0018—202410結果計算γ-氨基丁酸的校正因子f，按照公式（1）進行計算：式中：m標——標準品稱樣質量，單位為克（gP——標準品的純度，%;D標——標準品的稀釋倍數；A標——標準品溶液的峰面積。γ-氨基丁酸含量W以百分比質量分數的形式表示，按照公式（2）進行計算：式中：f——校正因子；m樣——試樣的稱樣質量，單位為克（gA樣——試樣溶液的峰面積；D樣——試樣的稀釋倍數。計算結果保留三位有效數字。11精密度11.1重復性在重復測試條件下，兩次獨立測定結果的絕對差值與算術平均值之比（以百分比表示）應符合表1的規(guī)定。表1實驗室內重復性要求≤0.1%10%>0.1%5%11.2再現性在再現性測試條件下，兩次獨立測定結果的絕對差值與算術平均值之比（以百分比表示）應符合表表2實驗室間再現性要求≤0.1%12%>0.1%