T/ZNZchromatography-tandemspectrometr浙江省農產品質量安全學會發(fā)布IT/ZNZ279—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由浙江省農產品質量安全學會提出并歸口。本文件起草單位：綠城農科檢測技術有限公司、金華市婺城區(qū)植物保護和耕肥管理站、浙江方圓檢測集團股份有限公司。本文件主要起草人：孫文閃、吳思遠、丁懿、段曉婷、胡陵、葉文容、周婷婷、周敏、章路、邢麗麗、鄭劍峰、董葉箐、余鵬飛、沈雄雅、倪娟楨。1T/ZNZ279—2024土壤中唑蟲酰胺殘留量的測定液相色譜-質譜聯(lián)用法本文件規(guī)定了土壤中唑蟲酰胺殘留量的液相色譜-質譜聯(lián)用檢測方法。本文件適用于土壤中唑蟲酰胺殘留量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法NY/T52土壤水分測定法NY/T395農田土壤環(huán)境質量監(jiān)測技術規(guī)范3術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。4原理試樣用乙腈提取，提取液經(jīng)分散固相萃取凈化，液相色譜-質譜聯(lián)用儀檢測，外標法定量。5試劑與材料除另有說明外，均使用分析純試劑，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。5.1試劑5.1.1乙腈（CH3CN，CAS號：75-05-8）:色譜純。5.1.2甲酸（HCOOH，CAS號：64-18-6）：色譜純。5.1.3無水硫酸鎂（MgSO4，CAS號：7487-88-9）。5.1.4檸檬酸鈉二水合物（C6H5Na3O7·2H2O，CAS號：6132-04-3）。5.1.5檸檬酸二鈉鹽倍半水合物（C6H6Na2O7·1.5H2O，CAS號：6132-05-4）。5.1.6氯化鈉（NaCl，CAS號：7647-14-5）。5.1.7甲酸銨（HCOONH4，CAS號：540-69-2）：色譜純。5.1.8提取劑：4g無水硫酸鎂、1g氯化鈉、1g檸檬酸鈉二水合物、0.5g檸檬酸二鈉鹽倍半水合物。5.1.9凈化劑：含有600mg硫酸鎂、100mgC18和100mgPSA。5.2溶液配制5.2.1流動相A：稱取0.1261g甲酸銨，加水溶解，再加入1mL甲酸后用水稀釋至1000mL，混勻。5.2.2流動相B：準確量取1mL甲酸，用乙腈稀釋至1000mL，混勻。2T/ZNZ279—20245.3標準品唑蟲酰胺（C21H22ClN3O2，CAS號：129558-76-5）純度≥98%。5.4標準溶液配制5.4.1標準儲備溶液（1000mg/L）：準確稱取約10mg（精確到0.01mg）的唑蟲酰胺標準品，用乙腈溶解并定容至10mL，密封避光-18℃保存，有效期6個月。5.4.2中間標準溶液（10mg/L）：準確吸取1mL標準儲備溶液（5.4.1），用乙腈定容至100mL，密封避光-18℃保存，有效期1個月。5.5材料5.5.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（PSA）：粒徑40μm～60μm。5.5.2十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18粒徑40μm～60μm。5.5.3微孔濾膜（有機相）：13mm×0.22μm。5.5.4陶瓷勻質子：長2cm，外徑1cm。6儀器設備6.1液相色譜—三重四極桿質譜聯(lián)用儀：配有電噴霧離子源（ESI）。6.2分析天平：感量0.01mg和0.01g。6.3離心機：轉速≥4000r/min。6.4渦旋混勻儀。7樣品制備與保存按照NY/T395的要求進行樣品制備，在晾干室將濕樣晾干，進行樣品粗磨，全部過20目尼龍篩，將樣品混勻后，用四分法分成兩份，取其中一份進行樣品細磨，全部過60目尼龍篩，將樣品混勻后分成兩份，其中一份為檢樣，一份為備樣，放置棕色玻璃瓶，15°C以下干燥保存。8分析步驟8.1試樣水分測定按照NY/T52的規(guī)定執(zhí)行。8.2提取稱取5g試樣（精確至0.01g）于50mL塑料離心管中，加入10mL水，渦旋混勻，靜置30min。加入10mL乙腈，放入一顆陶瓷勻質子（5.5.4加入提取劑（5.1.8渦旋振蕩3min后4000r/min離心3min，取上清液備用。8.3凈化移取4.0mL上清液至15mL離心管，加入凈化劑（5.1.9）1份，渦旋混勻1min。4000r/min離心3min，吸取上清液過微孔濾膜（5.5.3），待測定。8.4測定8.4.1液相色譜參考條件3T/ZNZ279—2024a）色譜柱：T3柱，50mm×2.1mm（內徑），1.8μm（粒徑），或相當者；b）流動相梯度條件見表1；c）流速：0.25mL/min;d）柱溫：40℃;e）進樣量：2μL。表1流動相及其梯度條件0228.4.2質譜參考條件a）離子源類型：電噴霧離子源；b）掃描方式：正離子掃描；c）霧化氣流速：3.0L/min；d）加熱氣流速：10L/min；e）干燥氣流速：10L/min；f）檢測方式：多反應監(jiān)測（MRM），監(jiān)測條件見表2。表2多反應監(jiān)測（MRM）的測定條件注：*為定量離子對8.4.3基質匹配標準工作曲線選擇與被測樣品性質相同或相似的空白樣品按照8.2～8.3部分進行前處理，得到空白基質溶液。精確吸取一定量的中間標準溶液，逐級用空白基質溶液稀釋成質量濃度為0.002mg/L、0.005mg/L、0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L的基質匹配標準工作溶液，根據(jù)儀器性能和檢測需要不少于5個濃度點，供液相色譜-質譜聯(lián)用儀測定。以唑蟲酰胺定量子離子的質量色譜峰面積為縱坐標，相對應的基質匹配標準工作溶液質量濃度為橫坐標，繪制基質匹配標準工作曲線。8.4.4定性測定被測試樣中唑蟲酰胺色譜峰的保留時間與相應標準色譜峰的保留時間相比較，相差應在±0.1min之在相同實驗條件下進行樣品測定時，如果檢出的色譜峰的保留時間與標準樣品相一致，并且在扣除背景后的樣品質譜圖中，唑蟲酰胺選擇的子離子均出現(xiàn)，而且同一檢測批次，樣品中唑蟲酰胺的離子豐4T/ZNZ279—2024度比與質量濃度相當?shù)幕|標準溶液相比，其允許偏差不超過表3規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在唑蟲酰胺殘留。表3定性時離子豐度比的最大允許偏差±20%±25%±50%8.4.5定量測定外標法定量。將試樣溶液注入液相色譜-質譜聯(lián)用儀中，測得定量子離子的色譜峰面積，通過標準工作曲線（8.4.3）計算其濃度，待測樣液中唑蟲酰胺的濃度應在標準工作曲線線性范圍之內，超過線性范圍時應根據(jù)測定濃度進行適當稀釋后再進樣分析。8.5空白試驗除不加試料外，按照8.2、8.3的規(guī)定進行操作。9結果計算試樣中唑蟲酰胺殘留量以毫克每千克（mg/kg）表示，按下面公式進行計算。式中：ω——試樣中被測唑蟲酰胺殘留量的結果，單位為毫克每千克（mg/kg）;c——從基質匹配標準工作曲線中得到的試樣溶液中唑蟲酰胺的質量濃度，單位為毫克每升（mg/L）；V——提取溶劑總體積，單位為毫升（mLm——土壤試樣的質量，單位為克（g）；f——土壤試樣的質量含水量，單位為（%）。計算結果以2次測定值的平均值表示，保留2位有效數(shù)字，當結果大于1mg/kg時保留3位有效數(shù)字。10精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的15%。11準確度本方法在0.005~0.05mg/kg添加濃度水平上的回收率在70%~100%之間