選修一專題二[限時45分鐘；滿分100分]一、選擇題(每小題5分，滿分20分)1．制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的下列操作中，不正確的是A．操作流程是計算、稱量、溶化、滅菌和倒平板B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同倒入燒杯中再加水、去紙C．滅菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%瓊脂，并使其溶解D．將培育基冷卻到約50℃解析瓊脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中，溶化后再滅菌。答案C2．(2022·南通調研)下圖為試驗室培育和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯誤的是 A．①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行B．步驟①中待倒入的培育基冷卻后蓋上培育皿的皿蓋C．步驟③中，每次劃線前后都需對接種環進行灼燒處理D．劃線接種結束后，將圖④平板倒置后放入培育箱中培育解析①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行，防止被雜菌污染，A正確；倒完平板后馬上蓋上培育皿，冷卻后將平板倒過來放置，B錯誤；每次劃線前灼燒接種環是為了殺死上次劃線結束后，接種環上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環上的菌種直接來源干上次劃線的末端，從而通過劃線次數的增加，使每次劃線時菌種的數目漸漸削減，以便得到菌落，C正確；劃線接種結束后，將平板倒置后放入培育箱中培育，有利于表面的水分更好的揮發和防止皿蓋上的水珠落入培育基造成污染，D正確。答案B3．苯酚是工業生產排放的有毒污染物質，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，爭辯人員從土壤中篩選獲得了只能利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，①為土壤樣品。下列相關敘述錯誤的是A．圖中②培育目的菌株的選擇培育基中應加入苯酚作為碳源B．假如要測定②中活細菌數量，常接受稀釋涂布平板法C．若圖中④為對比試驗，則其中應以苯酚作為唯一碳源D．使用平板劃線法可以在⑥上獲得單菌落解析若④為對比試驗，則④中培育基應含除苯酚外的其他碳源，⑤中以苯酚作為唯一碳源。答案C4．用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數，在對應稀釋倍數為106的培育基中，得到以下幾種統計結果，正確的是A．涂布了一個平板，統計的菌落數是230B．涂布了兩個平板，統計的菌落數是215和260，取平均值238C．涂布了三個平板，統計的菌落數分別是21、212和256，取平均值163D．涂布了三個平板，統計的菌落數分別是210、240和250，取平均值233解析在設計試驗時，肯定要涂布至少3個平板作為重復組，才能增加試驗的說服力與精確?????性，所以A、B不正確。C項雖涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數結果與另兩個相差太遠，說明在操作過程中可能消滅了錯誤，此時，不能簡潔地將3個平板的計數值用來求平均值。答案D二、非選擇題(共80分，每小題20分)5．(2022·濰坊模擬)莠去津是一種含氮農藥，在土壤中不易降解，為修復被其污染的土壤，可按下面程序選育能降解莠去津的細菌(目的菌)。請據圖回答：(已知莠去津在水中溶解度低，含過量莠去津的固體培育基不透亮?????) (1)由圖推斷，從A瓶到C瓶液體培育的過程稱為__________________，目的是____________。(2)在將C瓶菌種接種到固體培育基之前通常要進行______________，將菌種接種到固體培育基的方法有平板劃線法和____________法，從圖中看本試驗接受的是____________(填“前者”或“后者”)。(3)一段時間后，培育基消滅無透亮?????帶和有透亮?????帶兩種菌落，我們篩選的目的菌是________________菌落中的細菌，該菌落生長所需的氮元素主要來源于____________________________________。(4)為弄清固體培育基中的非目的菌落來自C瓶菌種還是培育基，應如何設置對比組？______________________________________________________。答案(1)選擇培育初步選擇能降解莠去津的細菌(目的菌)并提高其密度(2)梯度稀釋稀釋涂布平板后者(3)有透亮?????帶莠去津(4)配制的培育基滅菌后不接種菌種，與試驗組放在相同條件下培育6．(2022·南京模擬)常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進行酒精發酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖產生酒精，但是對酒精的耐受力量差。科學家利用基因工程培育了能利用這兩種糖進行發酵且對酒精耐受力量強的釀酒酵母。請分析回答下列問題： (1)制備酵母菌培育基要進行倒平板操作，待平板冷凝后，要將平板倒置，其主要緣由是__________________________________。(2)取從自然界中采集的葡萄，用無菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中，然后按圖甲所示過程進行酵母菌的純化培育。圖乙是經過圖甲過程A純化培育的結果，在培育基上接種時劃線的挨次依次是________________(用編號表示)。爭辯者在圖甲過程C的操作培育過程中，得到了一個經培育后菌落分布如圖丙所示的平板，推想接種時可能的操作失誤是______________________。(3)將培育基上的酵母菌菌株轉接到僅以____________為碳源的培育基中，無氧條件下培育一周后，有些酵母菌死亡，說明這些酵母菌不能利用木糖發酵。(4)從以上篩選得到的活酵母菌中提取DNA，利用PCR技術大量擴增獲得目的基因。若將1個目的基因分子復制10次，則需要在緩沖液中至少加入__________個引物。將目的基因連接到具有尿嘧啶合成酶基因作為標記基因的質粒上，然后將所得的重組質粒導入酵母菌時，應選擇缺乏____________力量的釀酒酵母作為受體菌。(5)將經上述流程培育獲得的轉基因釀酒酵母接種在含______________的培育基中進行酒精發酵力量測試。隨著發酵的持續進行，若該釀酒酵母能夠存活，說明它能__________________，即說明所需菌株培育成功。解析(1)待平板冷凝后，要將平板倒置，其主要緣由是防止培育皿蓋的冷凝水落入培育基造成污染。(2)在培育基上接種劃線的挨次依次是每一區的劃線應從前一區劃線的末端位置開頭劃線，從而能將菌種逐區削減，所以劃線挨次是①③②；培育后菌落分布不均勻可能是接種時涂布不均勻造成的。(3)利用選擇培育基選擇培育時，培育基中若僅以木糖為碳源，無氧條件下培育一周后，有些酵母菌死亡，說明這些酵母菌不能利用木糖發酵。(4)PCR技術大量擴增目的基因時，緩沖液中需要加入的引物個數計算公式為2n＋1－2，所以若將1個目的基因分子復制10次，則需要在緩沖液中至少加入211－2個引物，質粒中的標記基因作用是用于篩選含目的基因的受體細胞，將目的基因連接到具有尿嘧啶合成酶基因作為標記基因的質粒上，然后將所得的重組質粒導入酵母菌時，應選擇缺乏尿嘧啶合成力量的釀酒酵母作為受體菌。若選擇培育基中的酵母菌能合成尿嘧啶，則說明目的基因導入受體酵母菌中。(5)基因工程是為了培育能利用這兩種糖進行發酵且對酒精耐受力量強的釀酒酵母，所以檢測時應將培育獲得的轉基因釀酒酵母接種在含葡萄糖和木糖的培育基中進行酒精發酵力量測試，隨著發酵的持續進行，若該釀酒酵母能夠存活，說明它能利用葡萄糖和木糖產生酒精，且對酒精的難過力量強，即說明所需菌株培育成功。答案(1)防止皿蓋上的冷凝水落入培育基造成污染(2)①③②涂布不均勻(3)木糖(4)211－2尿嘧啶合成(5)葡萄糖和木糖利用葡萄糖和木糖產生酒精，且對酒精的耐受力量強(合理即可)7．(2022·合肥二模)纖維素酶是一種復合酶，能將纖維素分解為葡萄糖，剛果紅能夠和纖維素結合形成一種紅色的復合物，當纖維素被分解時，紅色物質消逝，形成透亮?????圈，過程如圖甲所示。據此，某試驗小組為了爭辯pH對纖維素分解菌產生的纖維素酶活性的影響，將纖維素分解菌分別接種在pH不同的剛果紅—纖維素培育基中，通過觀看消滅透亮?????圈的最早時間和24h后透亮?????圈直徑的大小來推斷纖維素酶活性的凹凸，試驗流程如圖乙所示： eq\b\lc\\rc\}(\a\vs4\al\co1(剛果紅,纖維素))紅色復合物eq\o(→,\s\up7(纖維素酶),\s\do5())紅色消逝，形成透亮?????圈甲乙依據題意，回答下列問題：(1)試驗流程中，選擇培育的目的是________________________________。選擇培育基中應當加入______________________作為唯一的碳源，另外還要加入的基本養分物質有__________________________________。(2)為了說明選擇培育基對纖維素分解菌起到了選擇的作用，應怎樣設置對比試驗？______________________。(3)依據流程圖可知，將纖維素分解菌接種到培育基上所用的方法為______________________。本試驗中該接種方法所用的培育基從物理狀態看，屬于________________________________培育基。(4)該試驗小組設置了pH分別為6、7、8的三組試驗進行觀看，得到了如下的試驗結果：pH消滅透亮?????圈的最早時間(h)24h后透亮?????圈的直徑(cm)664.427103.668241.33通過上述結果可知，該試驗的自變量是______________________，因變量是______________，纖維素分解菌更適合在偏______________________(填“酸”、“堿”或“中”)性環境下生長。答案(1)增加纖維素分解菌的數量纖維素氮源、水和無機鹽(2)將培育基中纖維素改為葡萄糖，其他條件都相同(3)稀釋涂布平板法固體(4)pH消滅透亮?????圈的最早時間以及24h后透亮?????圈的直徑大小酸8．(2022·孝感統考)某同學在做微生物試驗時，不當心把圓褐固氮菌(可利用空氣中N2合成含氮有機物)和酵母菌混合在一起，得到混合菌。請你完成得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌的分別試驗步驟，并回答有關問題：(1)主要步驟：①制備兩種培育基：一種是____________培育基，另一種是加__________________的培育基。分別分成兩份，依次標上A，A′和B，B′，備用。②分別向A、B培育基中接種______________________。③接種后，放在恒溫箱中培育3～4天。④分別從A、B培育基生長良好的菌落中挑取菌種，依據A→A′，B→B′的方式進行接種。⑤接種后，把A′、B′培育基放入恒溫箱中培育3～4天。(2)回答問題：在步驟①中，為保證無雜菌污染，試驗中應接受的主要措施有：對培育基進行__________________；將______________在酒精燈火焰上滅菌；接種過程在__________________四周進行。第④⑤兩個步驟的目的是獲得________________________________。解析(1)將微生物進行分別一般接受選擇培育基。選擇培育基是在培育基中加入某種化學物質，以抑制不需要的微生物的生長，促進