…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年滬教版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、分離土壤中分解尿素菌的實驗操作中，對于獲得純化的尿素分解菌的單菌落影響最大的是（）A.制備浸出液的土壤取自土壤的表層B.涂布前涂布器未在酒精燈外焰上灼燒滅菌C.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中添加尿素作為氮源D.接種操作者的雙手未用酒精棉進行消毒2、將特定藥物與單克隆抗體相結合制成的“生物導彈”；能夠用于殺死人類某些癌細胞，其過程如圖所示?！吧飳棥庇蓛刹糠纸M成，一是“瞄準裝置”，二是殺傷性“彈頭”。下列有關敘述錯誤的是（）

A.經①形成的細胞都能無限增殖并產生相應抗體B.②過程需要篩選并克隆單個雜交瘤細胞C.構成“彈頭”的化學藥物、細胞毒素等物質沒有選擇殺傷癌細胞的功能D.抗癌細胞的單克隆抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性3、下列關于轉基因技術的敘述中，錯誤的是（）A.科學家應科學地認識、評估和利用轉基因生物B.社會公眾在購買相關產品時應享有知情權C.轉基因病菌、病毒有可能被用于制造“生物武器”D.轉基因生物的研究和利用不會影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性4、下列關于試管嬰兒技術的敘述，正確的是（）A.在采集卵母細胞之前，需要給供卵者注射大量的性激素，促進排卵B.受精卵移入一定濃度的肝素溶液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力C.受精過程中，卵母細胞會發(fā)生透明帶反應和卵細胞膜反應，阻止多精入卵D.設計試管嬰兒技術，有利于生育健康的下一代，不會造成社會危害5、腐乳是我國古代勞動人民制造出的一種經過微生物發(fā)酵的大豆食品。下列相關敘述錯誤的是（）A.制作的腐乳比豆腐更容易保存B.酵母菌也參與腐乳的發(fā)酵過程C.腐乳制作過程中，有機物的種類增加D.微生物產生的酶將豆腐中的蛋白質分解為葡萄糖6、新冠病毒侵入人體細胞的過程：借助其表面的S蛋白與人體細胞膜表面的ACE2蛋白結合，以胞吞的方式進入肺部細胞，并在肺部細胞內完成增殖?？茖W家利用S蛋白研制抗新冠病毒單克隆抗體，并用于新冠患者的治療。下列有關敘述錯誤的是（）A.制備抗新冠病毒單克隆抗體時，應將S蛋白注入小鼠體內B.經過第一次篩選獲得的雜交瘤細胞即為制備成功的單克隆抗體C.制備的單克隆抗體可用于抗原檢測，原理是抗原與抗體的特異性結合D.若病毒S蛋白的部分結構發(fā)生改變，則原來的單克隆抗體的效應可能會降低7、下列與DNA粗提取與鑒定的敘述，錯誤的是（）A.兔血和雞血都可以作為提取DNA的材料B.DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同C.預冷的乙醇可用來進一步純化粗提的DNAD.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)8、胎牛血清(FBS)是天然的培養(yǎng)基；能夠在多種動物卵母細胞的成熟過程中提供足夠的營養(yǎng)物質，起到非常好的促進效果。下表是后期胚胎培養(yǎng)液(CR2后液）中添加不同濃度FBS對牛核移植胚胎發(fā)育的影響情況，下列敘述正確的是。

血清的不同濃度水平對牛核移植胚胎發(fā)育的影響。組別培養(yǎng)液卵裂率/%囊胚率/%對照組CR2前液+CR2后液59.17±1.3413.53±2.04試驗組1CR2前液+10%FBSCR2后液62.14+1.7813.78±2.77試驗組2CR2前液+20%FBSCR2后液68.95±4.1526.09±2.20試驗組3CR2前液+30%FBSCR2后液62.02±8.648.78±3.20A.囊胚中內細胞團發(fā)育成胎膜和胎盤B.添加20%FBS是促進核移植胚胎發(fā)育的最適濃度C.從卵巢采集的卵母細胞需在體外培育成熟D.添加不同濃度的FBS對卵裂率和囊胚率均有促進作用9、β-苯乙醇是賦予白酒特征風味的物質。從某酒廠采集并篩選到一株產β-苯乙醇的酵母菌應用于白酒生產。下列敘述正確的是（）A.所用培養(yǎng)基及接種工具分別采用濕熱滅菌和灼燒滅菌B.通過配制培養(yǎng)基、滅菌、分離和培養(yǎng)能獲得該酵母菌C.還需進行發(fā)酵實驗檢測該酵母菌產β-苯乙醇的能力D.該酵母菌的應用有利于白酒新產品的開發(fā)10、圖甲為培育轉基因生物時選用的載體，圖乙是含有目的基因的一段DNA序列，圖中標注了相關限制酶的酶切位點。下列敘述錯誤的是（）

A.若通過PCR技術提取該目的基因，應該選用引物a和引物cB.構建表達載體時應選用BamHⅠ和HindⅡ這兩種限制酶C.圖乙中一個DNA分子在PCR儀中經過四輪復制得到所需目的基因的分子數(shù)為8個D.只利用含四環(huán)素的培養(yǎng)基就可以直接篩選出成功導入表達載體的受體細胞11、體細胞核移植胚胎組的蛋白甲基化可導致克隆效率降低；毛殼素是組蛋白H3K9甲基化轉移酶SUV39H1/2的特異性化學抑制劑，使用毛殼素處理供體細胞，可降低SUV39H1/2在供體細胞和核移植胚胎中的表達水平，提高豬胚胎的發(fā)育率，如圖是利用不同濃度毛殼素處理對豬胚胎細胞核移植技術成功率的實驗流程示意圖，下列敘述正確的是（）

A.克隆豬的遺傳物質來自供體細胞和代孕母豬B.過程①使用的培養(yǎng)液需添加動物血清或血漿C.過程④采用滅活的病毒處理以促進精卵結合D.過程⑤成功與否與代孕母豬的生理狀態(tài)有關12、傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作需要各種各樣的微生物。下列相關敘述正確的是（）A.腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵B.制作腐乳利用了微生物產生的蛋白酶C.制作果酒利用了酵母菌在無氧條件下產生酒精D.制作果醋利用了醋酸菌在無氧條件下產生乙酸13、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設計品種乙組織培養(yǎng)實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進行預實驗。為確定品種乙的II階段的最適細胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設計5個濃度水平的實驗，其中細胞分裂素最高濃度設為M。下列有關敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導形成愈傷組織α1b1II誘導形成幼芽α2b2Ⅲ誘導生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素14、下列有關動物細胞培養(yǎng)的表述錯誤的是（）A.培養(yǎng)環(huán)境中需要O2，不需要CO2B.細胞要經過脫分化形成愈傷組織C.培養(yǎng)液通常含有糖類，氨基酸，無機鹽，維生素和動物血清D.培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)到一定階段后分瓶后才能繼續(xù)增殖15、甲、乙是嚴重危害某二倍體觀賞植物的病菌。研究者發(fā)現(xiàn)抗甲基因、抗乙基因可分別表達合成相應的蛋白質抑制甲、乙的細胞增殖，并獲得了抗甲、乙的轉基因植株，再將二者雜交后得到F1，結合單倍體育種技術，培育出同時抗甲、乙的植物新品種。以下相關敘述錯誤是（）A.分別導入不同受體細胞的抗甲、抗乙基因都能有效能編碼相應的蛋白質B.培育該植物新品種的過程利用了基因工程、雜交育種和單倍體育種技術C.該新品種的培育利用了基因重組、基因突變、染色體變異等生物學原理D.培育出的該植物新品種植株是四倍體，和原植物存在著明顯的生殖隔離評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)16、雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物質)、_________________(提供氮元素的物質)和__________________。17、PCR技術的DNA體外復制環(huán)境有DNA解旋酶、耐熱DNA聚合酶、DNA母鏈、4種脫氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能夠從引物的________端開始連接脫氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物長度通常為____個核苷酸。18、基因工程取得了突飛猛進的發(fā)展。_____、_____等技術的應用不僅使生命科學的研究發(fā)生了前所未有的變化，而且在實際應用領域，如____、_____、_____、______等方面也展示出美好的應用前景?？瓜x棉中的抗蟲基因來自_____，抗蟲基因作物的使用，不僅減少了_____，降低了____，而且還減少了_____。19、胚胎工程。

胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術，由______、______、______、胚胎冷凍保存技術和______技術等組成的現(xiàn)代生物技術。20、注意：a生理基礎：______，______

b植物細胞融合前需用______和______除去細胞壁21、應用分析與比較的方法，對生殖性克隆與治療性克隆進行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術__________目的__________22、不同國家的政府對待生殖性克隆人的態(tài)度是不同的?我們認同我國政府對待生殖性克隆人研究的態(tài)度嗎？為什么？_____。評卷人得分四、判斷題(共2題，共8分)23、蛋白質工程的基本思路是：從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤24、我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。（選擇性必修3P108）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共20分)25、在釀酒；釀醋、制作腐乳、酸奶過程中都要涉及各種微生物；請回答下列問題。

（1）釀酒利用的微生物是酵母菌，制作過程中，酵母菌先在有氧條件下大量繁殖，然后再進行酒精發(fā)酵，檢測酒精的原理是：橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與酒精發(fā)生化學反應，變成________________色。如果葡萄酒釀造過程中葡萄汁中含有醋酸菌，在酒精發(fā)酵旺盛時，醋酸菌不能將葡萄汁中的糖發(fā)酵為醋酸，原因是_______________________________________________________。

（2）醋酸發(fā)酵時溫度一般應控制為_______________。

（3）在臭豆腐的制備過程中，常用的微生物主要是________________，在此過程中，豆腐相當于微生物生長的______________________。

（4）民間制作腐乳時，豆腐塊上生長的微生物，在制作時一般要加鹽、酒，若加入的酒精濃度（含量）過低，會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？__________________________________。

（5）在腌制泡菜的過程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，用水封壇的作用是__________________________，欲檢測泡菜在腌制過程中產生的亞硝酸鹽含量，使用檢測試劑后顏色變?yōu)開____________。26、黃曲霉和寄生曲霉是常見的真菌，多見于發(fā)霉的糧食、糧制品及其它霉腐的有機物上。黃曲霉素是由黃曲霉和寄生曲霉等產生的代謝產物，具有極強的毒性和致癌性。科研人員用黃曲霉素Bl（AFB1）的結構類似物——豆香素（C9H6O2）篩選出能高效降解AFB1的菌株；具體過程如下圖所示，其中序號代表過程。

（1）為了篩選到AFB1降解菌，可選的采樣地點是_____。

（2）在篩選AFB1降解菌時，1號培養(yǎng)基的碳源是_____，過程③所需要的工具是_____。2號培養(yǎng)基加入瓊脂的目的是_____。

（3）在此過程中，鑒定不同菌落降解AFB1能力的方法是_____。

（4）菌體對有機物的降解途徑有胞外分泌物降解和菌體吸附降解兩種。對降解菌的發(fā)酵液進行離心，發(fā)現(xiàn)上清液中AFB1的殘留率明顯低于菌懸液的。經檢測發(fā)現(xiàn)上清液中存在多種蛋白質，為驗證蛋白質K是降解AFB1的有效成分，科研小組設計了實驗過程，如下表。表中①、②、③分別表示_____（用“+”或“-”表示）。如果驗證成功，則④與⑤的大小比較關系是_____。不同處理或測定試管甲試管乙培養(yǎng)過降解菌的上清液①②一段時間后，分別加入含AFB1的培養(yǎng)基蛋白質K水解酶+③測定培養(yǎng)基中AFB1含量④⑤

表中“＋”表示添加，“-”表示不添加，甲乙試管所加物質的量均相同。27、佩戴口罩是預防病原體感染的有效措施之一。使用過的口罩；如果沒有妥善處理會對生態(tài)環(huán)境造成巨大威脅。某科研團隊欲從不同環(huán)境的土壤中篩選出能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纖維）的細菌。請回答下列問題：

(1)該科研團隊設計了一個對照實驗；請將以下實驗步驟補充完整：

①采集來自不同環(huán)境的等量土壤，編號為A、B、C、D。將同型號等量的一次性口罩經___________處理后埋入各組土壤中。

②在相同且適宜條件下培養(yǎng)一段時間后；觀察各組中口罩的腐爛程度。

③從口罩腐爛程度_________的一組上采集細菌樣品。

(2)分離純化目的菌時，培養(yǎng)基以______________作為唯一的碳源。這樣的培養(yǎng)基按功能劃分，屬于_________培養(yǎng)基，其含義是指______________。

(3)若需進一步對土樣中的細菌計數(shù)，上圖所示微生物接種的方法是_____________，在3個平板上分別滴加0.1mL稀釋液，經適當培養(yǎng)后，3個平板上菌落數(shù)分別是65、66和67，則1g土壤中的活菌數(shù)約為__________個。該方法所得測量值一般比實際值偏低的原因是________________________。28、下圖是某同學設計的傳統(tǒng)發(fā)酵裝置示意圖。比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術與現(xiàn)代發(fā)酵工程；回答下列問題：

(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒的原理是______。請設計簡單的實驗驗證發(fā)酵過程中產生了酒精（不考慮發(fā)酵液中葡萄糖的影響），寫出實驗思路并預期實驗結果與結論______。

(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術一般以天然存在的______發(fā)酵，品質不一，現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵一般為單一菌種發(fā)酵，品質較高。自制的果酒并非商品意義上的產品，在實際生產中還需要經過______裝瓶等過程才能獲得成品酒。

(3)若要測定發(fā)酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發(fā)酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細胞計數(shù)板，觀察并統(tǒng)計到中方格中的酵母菌平均數(shù)為9個，則每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量約是______個。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時，操作上的最主要的區(qū)別是______。評卷人得分六、綜合題(共3題，共12分)29、草甘膦是一種非選擇性除草劑；殺死雜草的同時也殺死農作物。它與植物體內的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結構相似，可與PEP競爭結合EPSP合酶，阻止PEP轉化，影響植物細胞正常代謝。我國科學家從草甘膦施用土壤中的某微生物體內獲取GR79基因（草甘膦抗性基因），并將其導入植物體細胞中獲得抗草甘膦的轉基因植物。據(jù)圖回答下列問題：

(1)GR79基因發(fā)揮抗草甘膦作用的機理可能是______。從分離得到的某土壤微生物體內獲取含有GR79基因的質粒，并將其保存在某細菌群體（受體菌）中，各個受體菌分別含有該微生物的不同的基因，這些受體菌群中該微生物的所有DNA序列克隆的匯總，稱為______。

(2)據(jù)圖推測，利用PCR技術擴增GR79基因時，需設計能與該基因兩條模板鏈3’端______的引物；同時為構建該基因表達載體，需在引物1和引物2的______端加上限制酶______的識別序列。

(3)實驗中常采用______法將GR79基因表達載體導入植物受體細胞；為避免該基因在近緣農作物中傳播，可將其導入植物受體細胞的______；除溫度、酸堿度等環(huán)境因素外，影響該基因導入植物受體細胞成功率的因素有______。

(4)為檢測GR79基因是否導入植物體細胞，可在培養(yǎng)基中添加______篩選含該基因的受體細胞；也可利用______技術更加精準地進行檢測，若待檢DNA中含有該基因，則會發(fā)現(xiàn)硝酸纖維素膜上會出現(xiàn)______。

(5)經檢測，科研人員發(fā)現(xiàn)部分獲得GR79基因的植物幼苗不具有抗草甘膦的能力，原因可能是______。30、隨著科技的發(fā)展，生物降解有機化工物質已成為解決環(huán)境污染的一種重要手段。氯苯（C6H5Cl）是一種有機化工物質；不易降解，傳統(tǒng)手段一般會做土壤掩埋處理，但會污染環(huán)境。某實驗小組欲從土壤中分離高效降解氯苯的微生物，為解決氯苯的污染問題提供理論依據(jù)?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為了獲得能降解氯苯的微生物菌種，可在___________取樣，并應選_________的培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)。除此之外，培養(yǎng)基中一般還應含有__________；無機鹽和蒸餾水等。

(2)在對目的微生物分離純化時，所用接種方法必須使用接種環(huán)的是__________法。若用該方法進行接種，則一般在___________處獲取目的菌的單菌落。

(3)在用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)降解氯苯的微生物時，需要設置對照組驗證培養(yǎng)基是否滅菌合格，則對照組的設置操作為_________。培養(yǎng)基的滅菌方法般為__________。31、研究發(fā)現(xiàn)，實體腫瘤內部通常是缺氧的環(huán)境，蓖麻毒素蛋白（RTA）可作用于核糖體，使蛋白合成受阻，從而引起細胞死亡。TAT是一種短肽，可轉導蛋白進入細胞，含有氧依賴性降解區(qū)域ODD（多肽）的融合蛋白可以適應低氧條件穩(wěn)定存在，但在常氧條件下會被蛋白酶降解?？蒲腥藛T以RTA作為抑制腫瘤細胞增殖的活性分子，利用TAT的作用將融合蛋白轉運進入腫瘤細胞，并利用ODD的作用減輕RTA對正常細胞的毒性，分別構建了含TAT-RTA（660bp）和TAT-RTA-ODD（870bp）融合基因的表達載體；并成功得到相關融合蛋白。

(1)可采用PCR的方法獲取融合基因TAT-RTA，需要根據(jù)TAT和RTA基因設計引物，引物的作用是____________。已知RTA基因和欲得到的TAT-RTA融合基因的結構如圖1所示，TAT基因編碼鏈序列5'ATGAGCTACGGCCGTAAAAAGAGACGCCAACGTAGA3′，為順利構建表達載體，需要在引物1的5′端加入____________酶切位點，引物2的5′端加入____________酶切位點，利用TAT和RTA核酸序列設計引物時，要求在RTA蛋白的前端引人TAT短肽，請根據(jù)要求寫出引物1____________（寫出引物5′端的12個堿基即可）。

(2)載體的部分結構如圖2所示，His標簽由連續(xù)的6個組氨酸構成，可用于對重組融合蛋白進行分離純化，將PCR得到的TAT-RTA融合基因和載體雙酶切后，再用____________酶連接。但是在研究時，發(fā)現(xiàn)融合蛋白中沒有His標簽蛋白，據(jù)圖分析原因是____________?？赏ㄟ^引物2的特殊設計使His標簽正常表達，請結合圖1和圖2寫出引物2____________（引物中如需添加堿基補足對應的密碼子；可以添加任意堿基）。

(3)科研人員將得到的重組融合蛋白經腹腔給藥荷瘤小鼠（患實體腫瘤的小鼠稱為荷瘤小鼠）；研究荷瘤小鼠腫瘤體積變化，結果如圖3所示；

請寫出本實驗的結果____________。

產生該實驗結果的原因是____________。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、C【分析】【分析】

1；實驗流程：土壤取樣→樣品的稀釋→將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上→挑選能生長的菌落→鑒定。

2；實驗室中目的菌株的篩選：

①原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)；溫度、pH等）；同時抑制或阻止其他微生物生長。

培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素；只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。

②方法：能合成脲酶的細菌才能分解尿素；配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，能夠生長的細菌就是能分解尿素的細菌。

【詳解】

A；取樣一般取距離地表約3～8cm的土壤層；而土壤的表層中微生物數(shù)量也很大，因此該操作對獲得純化的尿素分解菌的單菌落影響不大，A錯誤；

B；涂布前涂布器未在酒精燈外焰上灼燒滅菌；這會導致雜菌污染，可能影響微生物計數(shù)，但對獲得純化的尿素分解菌的單菌落影響不大，B錯誤；

C；該培養(yǎng)基必須以尿素為唯一的氮源；不能使用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或在其中添加尿素作為氮源，該操作對實驗影響最大，C正確；

D；接種操作者的雙手未用酒精棉進行消毒；可能會造成污染，但與純化的尿素分解菌的單菌落有關但影響不大，D錯誤。

故選C2、A【分析】【分析】

1.單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體;

2.單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準確；高效、簡易、快速的優(yōu)點．②用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療癌癥；可制成“生物導彈”。

【詳解】

A；經①誘導融合過程形成的細胞不都能無限增殖并產生相應抗體的細胞；還需要經過兩次篩選才能獲得無限增殖并產生相應抗體的雜交瘤細胞，A錯誤；

B；②過程需要篩選出既能無限增殖又能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞并克隆單個雜交瘤細胞；獲得單克隆抗體，B正確；

C；用以治療癌癥的“生物導彈”就是以單克隆抗體的定位導向作用將藥物定向帶到癌細胞；在原位殺死癌細胞，其中，構成“彈頭”的化學藥物、細胞毒素等物質沒有選擇殺傷癌細胞的功能，而單克隆抗體能將這種殺傷功能定位，C正確；

D；過程③中由于單克隆抗體具有高度特異性；使其靶向作用非常準確，D正確。

故選A。

【點睛】3、D【分析】1；轉基因生物的安全性問題包括：食物安全（滯后效應、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；

2；生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經過基因重組的致病菌等。

【詳解】

A；科學家應科學地認識、評估和利用轉基因生物；A正確；

B；社會公眾在購買相關產品時應享有知情權；B正確；

C；轉基因生物有可能被用于制造“生物武器”；C正確；

D；轉基因生物的研究和利用會影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性；比如造成基因污染，D錯誤。

故選D。

【點睛】4、C【分析】【分析】

1；采集的卵母細胞需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才可受精；

2；可用一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液誘導精子獲能；

3；需在獲能溶液中或專用受精溶液中受精。

【詳解】

A；在采集卵母細胞之前；需要給供卵者注射適量的促性腺激素，促進超數(shù)排卵，A錯誤；

B；受精卵需移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)；以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力，B錯誤；

C；受精過程中；卵母細胞會發(fā)生透明帶反應和卵細胞反應，這是防止多精入卵的兩道屏障，C正確；

D；以治療為目的的設計試管嬰兒技術；是救治患者最好、最快捷的辦法之一，不是有利于生育健康的下一代，并且存在倫理問題，D錯誤。

故選C。5、D【分析】【分析】

腐乳的制作原理：參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多種；其中起主要作用的是毛霉，其代謝類型為異養(yǎng)需氧型，適宜溫度為15～18℃；毛霉能夠產生蛋白酶和脂肪酶，將蛋白質和脂肪分別水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；相比豆腐；腐乳中氨基酸、脂肪酸增多，營養(yǎng)價值比豆腐高，且腐乳容易保存，A正確；

B；參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種微生物；其中起主要作用的是毛霉，故酵母菌液曾參與腐乳的發(fā)酵，B正確；

C；腐乳制作過程中；毛霉產生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐中的蛋白質、脂肪分解成小分子有機物并利用其中一部分能量，因此腐乳制作過程中有機物種類增多，但有機物的干重減少，含有的能量減少，C正確；

D；蛋白質分解產物為氨基酸和小分子的肽；D錯誤。

故選D。6、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；制備抗新冠病毒單克隆抗體時；應將S蛋白注入小鼠體內，以激發(fā)小鼠產生相應的B細胞，A正確；

B；制備成功的單克隆抗體需要經過兩次篩選過程；經過第一次篩選獲得的只是雜交瘤細胞，B錯誤；

C；抗原與抗體的結合具有特異性；故制備的單克隆抗體可用于抗原檢測，C正確；

D；分析題意可知；新冠病毒借助其表面的S蛋白與人體細胞膜表面的ACE2蛋白結合，故若病毒S蛋白的部分結構發(fā)生改變，則原來的單克隆抗體的效應可能會降低，D正確。

故選B。7、A【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質溶于酒精；DNA對酶；高溫和洗滌劑的耐受性。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。

【詳解】

A；兔屬于哺乳動物；其成熟的紅細胞沒有細胞核及各種細胞器，提取不到DNA，而雞屬于鳥類，其紅細胞內含有細胞核與各種細胞器，DNA含量較多，A錯誤；

B；由于DNA在不同氯化鈉溶液中的溶解度不同；因此可以采用不同濃度的NaCl溶液反復溶解與析出DNA的方法去除部分雜質，B正確；

C；在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低；DNA的沉淀量最大，故預冷的乙醇可用來進一步純化粗提的DNA，C正確；

D；將析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中；加入二苯胺試劑后需要水浴加熱才會呈現(xiàn)藍色，D正確。

故選A。二、多選題(共8題，共16分)8、C【分析】囊胚中內細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤，A錯誤；表中信息顯示：添加20%FBS的試驗組2，其卵裂率和囊胚率都高于對照組和其它試驗組，說明促進核移植胚胎發(fā)育的最適濃度范圍在為20%FBS左右，但20%FBS不一定是最適濃度，B錯誤；從卵巢采集的卵母細胞不具有受精能力，需在體外培育成熟后，才能與獲能的精子受精，C正確；表中信息顯示：各試驗組的卵裂率均高于對照組，說明添加不同濃度的FBS對卵裂率均有促進作用，試驗組1、2的囊胚率高于對照組，試驗組3的囊胚率低于對照組，說明在一定濃度范圍內，隨添加的FBS濃度的升高對囊胚率均有促進作用，但超過該濃度范圍卻起抑制作用，D錯誤。9、A:C:D【分析】【分析】

選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學；物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基；使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率。

【詳解】

A；培養(yǎng)基一般選擇高壓蒸汽滅菌；接種工具一般用灼燒滅菌，A正確；

B；分離純化酵母菌；操作如下：配制培養(yǎng)基→滅菌→接種→培養(yǎng)→挑選菌落，B錯誤；

C；為了篩選的到目的菌；應該進行發(fā)酵實驗檢測該酵母菌產β-苯乙醇的能力，C正確；

D；篩選到一株產β-苯乙醇的酵母菌可應用于白酒新產品的開發(fā)；D正確。

故選ACD。10、B:D【分析】【分析】

分析題圖：構建表達載體時；不能選用限制酶BamHⅠ，否則會導致兩種抗性基因都被破壞，因此應該選擇Bc1I和HindⅢ這兩種限制酶，根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c。

【詳解】

A；PCR技術要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結合；根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c，A正確；

B；根據(jù)圖甲可知；BamHⅠ會導致兩種抗性基因都被破壞，同時為防止目的基因自身環(huán)化，因此只能選BclI和HindⅢ兩種限制酶切割，B錯誤；

C；圖乙中一個DNA分子在PCR儀中經過四輪復制可得到16個DNA片段；其中所需目的基因的分子數(shù)為8個，C正確；

D；由于選擇BclI和HindⅢ這兩種限制酶；破壞了氨芐青霉素抗性基因，但沒有破壞四環(huán)素抗性基因，因此應該先用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出含有基因表達載體和普通質粒的大腸桿菌，再用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基加氨芐青霉素含普通質粒的大腸桿菌能生存，而含重組質粒的不能生存，從而篩選出成功導入表達載體的受體細胞，D錯誤。

故選BD。11、B:D【分析】【分析】

細胞核移植是指通過顯微操作將一個細胞的細胞核移植到一個去核的卵母細胞內的技術過程。體細胞核移植技術包括核供體細胞與受體細胞的準備；細胞核移植、重構胚的融合、激活、培養(yǎng)和移植等過程。

【詳解】

A；克隆豬的細胞核遺傳物質來自提供細胞核的胎豬成纖維細胞；克隆豬的細胞質遺傳物質來自去核的卵母細胞，A錯誤；

B；過程①不僅需要在培養(yǎng)液中添加毛殼素；還需要在培養(yǎng)液中添加動物血清或者血漿，提供一個類似生物體內的環(huán)境，B正確；

C；過程④使用顯微操作技術使胎豬成纖維細胞與去核卵母細胞融合；C錯誤；

D；過程⑤是胚胎移植；胚胎移植時供體與受體的生理狀態(tài)要相同，否則無法成功妊娠，D正確。

故選BD。12、A:B:C【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

4；泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。

【詳解】

A；在無氧條件下；乳酸菌能將葡萄糖分解成乳酸，腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵，A正確；

B；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；制作腐乳利用了毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，B正確；

C；酵母菌在無氧條件下；可通過無氧呼吸產生酒精和二氧化碳，制作果酒利用了酵母菌在無氧條件下產生酒精，C正確；

D；醋酸菌是好氧型生物；制作果醋利用了醋酸菌在有氧條件下產生醋酸，D錯誤。

故選ABC。13、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發(fā)生基因的選擇性表達，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設計5個濃度水平的實驗，則細胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細胞分裂素的最高濃度M應設為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素；D正確。

故選ABD。14、A:B【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度：適宜溫度。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A、動物細胞培養(yǎng)中，培養(yǎng)環(huán)境中需要O2，也需要CO2（用來維持培養(yǎng)液的pH）；A錯誤；

B；動物細胞培養(yǎng)不需要脫分化；植物細胞要經過脫分化才形成愈傷組織，B錯誤；

C；動物細胞培養(yǎng)中常用含糖類、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清的液體培養(yǎng)基；C正確；

D；動物細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象而停止分裂增殖；故培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)到一定階段后要用胰蛋白酶處理，分瓶后才能繼續(xù)增殖，D正確。

故選AB。15、A:C:D【分析】【分析】

1；單倍體：體細胞中具有本物種配子染色體數(shù)的個體；個體發(fā)育的起點是配子。獲取方法是花藥離體培養(yǎng)。單倍體育種的方法：花藥離體培養(yǎng)和用秋水仙素處理幼苗。

2；基因工程的步驟：獲取目的基因、構建基因表達載體、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；目的基因導入受體細胞不一定能表達；A錯誤；

B；該品種的培育利用了基因工程、雜交育種、單倍體育種技術；B正確；

C；該品種的培育涉及基因工程、雜交育種、單倍體育種等操作；培育過程利用了基因重組、染色體變異等原理，沒有利用基因突變，C錯誤；

D；該新品種依然是二倍體；沒有證據(jù)表明其是一個新物種，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】三、填空題(共7題，共14分)16、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.無機鹽17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2種引物DNA或RNA20—3018、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因轉移基因擴增醫(yī)藥衛(wèi)生農牧業(yè)、食品工業(yè)環(huán)境保護蘇云金桿菌農藥的用量生產成本農藥對環(huán)境的污染。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】體外受精技術、胚胎移植技術、胚胎分割技術性別控制20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細胞膜流動性植物細胞全能性纖維素酶果膠酶21、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術，其目的是用于生育，獲得人的復制品；治療性克隆是指利用克隆技術產生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術，其目的是用于醫(yī)學研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會用到的技術有體細胞核移植技術、動物細胞培養(yǎng)技術、早期胚胎培養(yǎng)技術、胚胎移植技術等；治療性克隆在獲取胚胎干細胞后，根據(jù)治療目的誘導干細胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會應用到的技術為干細胞培養(yǎng)技術?！窘馕觥可承钥寺≈咐每寺〖夹g獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術治療性克隆是指利用克隆技術產生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術體細胞核移植技術、動物細胞培養(yǎng)技術、早期胚胎培養(yǎng)技術、胚胎移植技術等體細胞核移植技術，早期胚胎培養(yǎng)技術、動物細胞培養(yǎng)技術、胚胎移植技術、干細胞培養(yǎng)技術等用于生育，獲得人的復制品用于醫(yī)學研究和疾病的治療22、略

【分析】【詳解】

對待生殖性克隆人的研究，我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。因為生殖性克?。ㄒ簿褪强寺∪耍?，違反人類繁衍的自然法則，損害人類作為自然人的尊嚴，會引起嚴重的道德、倫理、社會和法律問題。所以，現(xiàn)階段生殖性克隆絕對不可以應用于人類本身。【解析】認同。因為生殖性克隆（也就是克隆人），違反人類繁衍的自然法則，損害人類作為自然人的尊嚴，會引起嚴重的道德、倫理、社會和法律問題。所以，現(xiàn)階段生殖性克隆絕對不可以應用于人類本身。四、判斷題(共2題，共8分)23、A【分析】【詳解】

蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需求。蛋白質工程的基本思路是：從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質。

故正確。24、A【分析】【詳解】

生殖性克隆存在倫理道德等方面的問題，我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。本說法正確。五、實驗題(共4題，共20分)25、略

【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。在有氧條件下可生產二氧化碳和水，無氧條件下可生產酒精和二氧化碳。

2；腐乳制作中用鹽腌制的目的：①鹽能抑制微生物的生長；避免豆腐塊腐敗變質；②加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，在后期制作過程中不會過早酥爛；③有調味作用。

（1）

檢測酒精的原理是：橙色的重鉻酸鉀溶液；在酸性條件下與酒精發(fā)生化學反應，變成灰綠色。醋酸菌是好氧型細菌，而果酒發(fā)酵是無氧環(huán)境(或醋酸菌需要在有氧且溫度是30～35℃條件下，才能將糖轉化為醋酸或因為酒精發(fā)酵時的缺氧環(huán)境能抑制醋酸菌生長，且醋酸菌的發(fā)酵需要充足的氧氣），所以在酒精發(fā)酵旺盛時，醋酸菌不能將葡萄汁中的糖發(fā)酵為醋酸；

（2）

酵母菌的異化作用類型為兼性厭氧型；即在有氧條件下可生成水和二氧化碳，在無氧條件下生成酒精和二氧化碳；醋酸發(fā)酵的主要菌種是醋酸菌，醋酸菌的最適宜溫度是30-35℃，故醋酸發(fā)酵時溫度一般應控制為30～35℃；

（3）

豆腐的發(fā)酵中參與的微生物很多如青霉；酵母、曲霉、毛霉等；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物將豆腐中的營養(yǎng)基質如蛋白質、脂肪等分解；豆腐相當于培養(yǎng)基，能提供毛霉等菌種生長的條件；

（4）

民間制作腐乳時；豆腐塊上生長的微生物，在制作時一般要加鹽；酒（酒的含量一般控制在12%左右），若加入的酒精濃度（含量）過低，會出現(xiàn)不足以抑制微生物的生長，導致豆腐腐敗變質的現(xiàn)象；

（5）

泡菜的制作的菌種是乳酸菌；屬于厭氧型細菌，用水封壇的作用是隔絕空氣，制造無氧環(huán)境，為乳酸菌的發(fā)酵提供無氧環(huán)境；在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮反應生成重氮鹽，重氮鹽與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料。

【點睛】

本題主要考查果酒的制作、腐乳的制作、腌制泡菜等知識點，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結構的能力；能運用所學知識，準確判斷問題的能力。【解析】（1）灰綠醋酸菌是好氧型細菌；而果酒發(fā)酵是無氧環(huán)境(或醋酸菌需要在有氧且溫度是30～35℃條件下，才能將糖轉化為醋酸或因為酒精發(fā)酵時的缺氧環(huán)境能抑制醋酸菌生長，且醋酸菌的發(fā)酵需要充足的氧氣）

（2）30—35℃

（3）毛霉培養(yǎng)基。

（4）不足以抑制微生物生長；使豆腐腐敗變質。

（5）制造無氧環(huán)境玫瑰紅色26、略

【分析】【分析】

篩選能高效降解AFB1的菌株的一般步驟是：取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。篩選時需要使用以香豆素（C9H6O2）為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

（1）黃曲霉素Bl（AFB1）一般來自發(fā)霉的糧食；糧制品及其它霉腐的有機物上；在霉爛的食品中富含AFB1，其中可能含有較多的AFB1降解菌，因此為了篩選到AFB1降解菌，可以從霉變的玉米或糧食采樣。

（2）豆香素（C9H6O2）可以為AFB1降解菌提供碳源；所以1號培養(yǎng)基的碳源是豆香素，篩選微生物的培養(yǎng)基一般是固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中需要加入一定量的瓊脂，目的是作為凝固劑，以制備固體培養(yǎng)基。篩選微生物可以采用稀釋涂布平板法，因此過程③所需要的工具是涂布器（無菌玻璃刮鏟）。

（3）鑒定不同菌落降解AFB1能力的方法是準備含有等量黃曲霉素的液體培養(yǎng)基若干瓶；將挑取不同菌落放置在不同的瓶子中，一段時間后，測量剩余黃曲霉素的量。通過比較各瓶中黃曲霉素的剩余量得出結論。

（4）根據(jù)題意試管甲；乙分別作為實驗組和對照組；自變量是有無蛋白質K，可以通過在兩試管中加入或不加蛋白質K水解酶來控制自變量，故③表示不添加（－）。兩組實驗的無關變量要一致，①、②都表示添加（+）培養(yǎng)過降解菌的上清液（含有降解菌的分泌物）。由于試管甲中蛋白質K被加入的蛋白質K水解酶分解，因此試管甲對應的培養(yǎng)基中AFB1不能被降解，含量高，而試管乙中培養(yǎng)基中AFB1被蛋白質K降解，含量低，即④大于⑤。

【點睛】

本題主要考查微生物的培養(yǎng)和應用，解題關鍵是掌握微生物的培養(yǎng)、篩選、分離的方法，能夠根據(jù)題目提供的信息回答問題?！窘馕觥棵棺兊挠衩谆蚣Z食豆香素涂布器（無菌玻璃刮鏟）形成固體培養(yǎng)基，形成菌落準備含有等量黃曲霉素的液體培養(yǎng)基若干瓶，將挑取不同菌落放置在不同的瓶子中，一段時間后，測量剩余黃曲霉素的量++-④大于⑤27、略

【分析】【分析】

篩選目的菌株的原理：在尋找目的菌株時；要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應的環(huán)境中去尋找。實驗室中微生物菌株的篩選，也應用了同樣的原理，即人為提供有利于目的菌株生長的條件（營養(yǎng)；溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。而在篩選菌株的時候，常用到選擇培養(yǎng)基。在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

（1）①不同類型土壤中微生物的種類和數(shù)量不同；可采集來自不同環(huán)境（不同地區(qū)）的等量土壤，編號為A；B、C、D。本實驗要篩選能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纖維）的細菌，可人為制造有利于該菌生長的環(huán)境，因此將同型號的等量一次性口罩經滅菌處理后埋入各組土壤中。

②一段時間后；觀察各組中口罩的腐爛程度。

③從口罩腐爛程度最大的一組上采集細菌樣品；該樣品即含有較強分解口罩能力的菌體。

（2）該目的菌是能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纖維）的細菌；因此培養(yǎng)基以聚丙烯纖維作為唯一的碳源。這樣的培養(yǎng)基按功能劃分，屬于選擇培養(yǎng)基，在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。

（3）據(jù)圖可知，上述需要對土樣中的細菌計數(shù)，先將菌液梯度稀釋，然后涂布在平板上，該接種的方法是稀釋涂布平板法。據(jù)圖可知，1g土樣加入到99mL無菌水，稀釋了100倍，隨后取1mL的菌液分別加入9mL的無菌水，稀釋10倍，因此最后被稀釋了106倍，根據(jù)公式每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M=（65+66+67）÷3÷0.1×106=6.6×108個。稀釋涂布平板法常用菌落數(shù)表示菌液中細胞數(shù)，當兩個或多個細胞連在一起時平板上觀察到的只是一個菌落，因此該方法所得測量值一般比實際值偏低?！窘馕觥?1)滅菌最大。

(2)聚丙烯纖維選擇在微生物學中；將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。

(3)稀釋涂布平板法6.6×108當兩個或多個細胞連在一起時平板上觀察到的只是一個菌落28、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無氧的環(huán)境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過程中檢測發(fā)酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說明發(fā)酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒都是利用了酵母菌的無氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類型是兼性厭氧型，在有氧條件下進行大量增殖，在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發(fā)生化學反應；變成灰綠色，該實驗目的是驗證發(fā)酵過程中產生了酒精，因此實驗自變量是是否加入發(fā)酵液，因變量為溶液顏色變化。對照組中應加入酒精作為陽性對照。實驗過程中應遵循等量原則；單一變量原則等，因此實驗思路是：取兩支試管分別標號A、B，A試管中各加入2ml發(fā)酵液，作為實驗組，B試管中各加入2ml酒精，作為對照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變?yōu)榛揖G色，即可驗證發(fā)酵過程中產生了酒精。

（2）傳統(tǒng)發(fā)酵技術一般不進行嚴格滅菌操作；因此其發(fā)酵菌種為天然的混合菌種?，F(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經過沉淀；過濾、滅菌、裝瓶等過程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細胞計數(shù)板計算公式：酵母細胞個數(shù)/1mL=1個中方格中酵母菌數(shù)×25×10000×稀釋倍數(shù)，因此該實驗中每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無氧呼吸，需要關閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無菌空氣?！窘馕觥?1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精實驗思路：取兩支試管分別標號A；B，向A試管中各加入2ml發(fā)酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時需關閉充氣口，釀醋時則需向充氣孔中充入無菌空氣六、綜合題(共3題，共12分)29、略

【分析】【分析】

分析題意可知；草甘膦是一種非選擇性除草劑，殺死雜草的同時也殺死農作物。它與植物體內的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結構相似，可與PEP競爭結合EPSP合酶，阻止PEP轉化，影響植物細胞正常代謝。

【詳解】

（1）草甘膦與植物體內的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結構相似；會與PEP競爭結合EPSP合酶，影響細胞正常代謝，由此推測，GR79基因表達的產物能阻止草甘膦與PEP競爭結合EPSP合酶，從而發(fā)揮抗草甘膦作用；基因文庫能夠儲存一種生物的全部或者部分基因。

（2）據(jù)圖推測；利用PCR技術擴增GR79基因時，需設計能與該基因兩條模板鏈3’端堿基互補配對的引物；由題圖可知，擴增目的基因時，應在引物的5′端添加相應的限制酶識別序列；由題圖中質粒結構可知，限制酶BamHⅠ的識別序列位于標記基因中，不能選用，且為防止目的基因自身環(huán)化和反向插入，應選擇兩種不同的限制酶，即PstⅠ和XhoⅠ，將它們的識別序列分別加在引物1和引物2的5′端；

（3）實驗中常采用農桿菌轉化法將GR79基因表達載體導入植物受體細胞；為避免該基因在近緣農作物中傳播；可將其導入植物受體細胞的細胞質DNA上(或葉綠體DNA或線粒體DNA或葉綠體和線粒體DNA上)；除溫度；酸堿度等環(huán)境因素外，影響該基因導入植物受體細胞成功率的因素有農桿菌的種類和活性、受體細胞的基因型和活性等。

（4）為檢測GR79基因是否導入植物體細胞；可在培養(yǎng)基中添加草甘膦篩選含該基因的受體細胞；也可利用核酸分子雜交技術(或PCR和核酸分子雜交技術)更加精準地進行檢測，若待檢DNA中含有該基因，則會發(fā)現(xiàn)硝酸纖維素膜上會出現(xiàn)放射性或熒光條帶。

（5）獲得GR79基因的植物幼苗通過基因表達可