




版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
2014-02-28發布2014-04-30實施吉林省質量技術監督局發布I本標準按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001給出的規則起草。本標準由吉林省質量技術監督局提出并歸口。本標準主要起草單位:吉林省產品質量監督檢驗院、國家農業深加工產品質量監督檢驗中心、中華人民共和國吉林出入境檢驗檢疫局、中華人民共和國順德出入境檢驗檢疫局。本標準主要起草人:史艷宇、劉金華、邵秋榮、劉斌、周亮、劉曉暉、王瀟、任明月。1件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T27403實驗室質量控制規范食品分子生物學檢測3術語和定義5.1引物:見表1。2表1引物序列目標菌類型引物序列上游引物:5'-GTGATACAACCAGATGGTAGTTATAG-3’下游引物:5'-AAAAAACAAGTCCCAATTATTAACTTT-3’上游引物:5'-GAGATGTTTGTGAATATTATGATCCAG-3'下游引物:5'-GTTCATGCATTAATATCAAGGCTGG-3'上游引物:5'-CCAGGCGGTTGTCAAGAATTTTAT-3'下游引物:5'-TCAAATAAATCAGGCTCTGCTCCC-3'上游引物:5'-GCTTCATTAAAGAACGGAAGCAGTGCT-3'下游引物:5'-GTGGCGCCTTTGTACCTTTTCTAGG-3'5.2皰肉培養基:見附錄A.1章。5.3胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯(TPGY):見附錄A.2章。5.4厭氧卵黃瓊脂:見附錄A.3章。5.5細菌基因組DNA提取純化試劑盒。5.7dNTP:dATP(deoxyadenosinetriphosp脫氧鳥苷三磷酸)、dCTP(deoxycytidinetriphosphate,脫氧胞苷三磷酸)、dTTP(deoxythymidinetriphosphate,脫氧胸苷三磷酸)。5.9蛋白酶K。5.11十二烷基硫酸鈉(SDS)。5.12蔗糖。5.13三羥甲基氨基甲烷(Tris)。5.14乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA-Na?·2H?O)。5.1510×PCR緩沖液:含200mmol/LTris-HCI(pH8.4),200mmol/L氯化鉀(KC1),15mmol/L氯化鎂(MgCl?)。5.19EDTA溶液,0.5mol/L,pH8.0:稱取186.1gEDTA-Na?·2H?O,加入700mL去離子水中,在磁力攪拌器上劇烈攪拌,用10mol/L氫氧化鈉調pH值至8.0,用水定容到1L,分裝后高壓滅菌。5.20Tris-HCl,1mol/L,pH8.0:在800mL溶液的pH值至8.0,加水定容至1L,分裝后高壓滅菌。5.21TE緩沖液(pH8.0):在800mL水中,依次加入10mL的1mol/LTris-HCI(pH8.0)和2mL的0.5mol/LEDTA(pH8.0),用水定容到1L,分裝后高壓滅菌。5.22溶菌酶溶液:用TE配制,使用濃度為10mg/mL。5.2420%SDS溶液:將20gSDS溶解在100mL去離子水中。3DB22/T2051—20145.2550×TAE電泳緩沖液(儲備液):稱取484gTris,量取114.2mL冰醋酸,200mL0.5mol/LEDTA溶液(pH8.0),溶于水中,定容至2L。分裝后高壓滅菌備用。使用前稀釋成1×TAE電泳緩沖液(工作液)。用10mL水溶解;稱取蔗糖50g,用30mL水溶解,合并三種溶液,用水定容至100mL,在4℃保存。5.27陽性對照:含有擴增片段的質粒或A、B、E、6.3恒溫培養箱:35℃±1℃和28℃±1℃。6.11天平:感量0.1g。7檢測培養基中的氧,并迅速冷卻,切勿搖動。每15mL增菌肉湯中接種1g~2g樣品,接種時將接種物慢慢接入肉湯液面以下。每份樣品接種兩管皰肉培養基,置35℃±1℃,同時接種兩管TPGY培養基,置28℃±1℃,厭氧培養5d。檢查培養物的濁度、產氣、肉粒的消化和產生的氣味。若有生長,按7.2分用接種環取1環~2環經乙醇或加熱處理的培養物在厭氧卵黃瓊脂上劃線接種,置厭氧條件下35℃±1℃培養48h。47.3DNA提取7.4DNA濃度測定…7.5PCR檢驗7.5.1PCR反應體系7.5.2反應條件7.5.3擴增產物電泳檢測8結果判定511.1檢驗過程中的廢棄物需經121℃高壓滅菌處理至少30min后再棄置。6A.1皰肉培養基a)新鮮牛肉500.0gb)蛋白胨30.0gc)酵母浸膏5.0ge)葡萄糖3.0gA.1.2制法a)胰酪胨(trypticase)b)蛋白胨c)酵母浸膏d)葡萄糖e)硫乙醇酸納7a)酵母浸膏50.0gc)蛋白胨20.0g分混合,存于4℃備用。A.3.3制法每500mL瓊脂基礎液(48℃~50℃)加80mL卵黃乳狀液,充分混合,制成平板。室溫放置2d,8B.1試劑B.1.1明膠磷酸鹽緩沖液:明膠2g,磷酸氫二鈉4g,蒸餾水1000mL。將上述成分加熱溶解,調pH至6.2,121℃高壓滅菌15
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業或盈利用途。
- 5. 人人文庫網僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 金融基礎理論課程知識體系優化
- 堿溶處理對硅藻土保水滲透性能的作用機制探討
- 餐飲業新店開業策劃全攻略
- 高校心理危機干預機制建設與實施研究
- 晉江市封控區管理辦法
- 文化傳播視角下的學術探討
- 大學校園外立面改造設計與施工組織優化研究
- 傳輸協議優化-洞察及研究
- 保密員工作總結個人總結
- 信訪主要工作職責
- 糧食的形態與化學組成第二節糧食的主要化學成分下64課件
- 中國農田水利行業發展前景及發展策略與投資風險研究報告2025-2028版
- 余料使用管理制度
- 農業面源防治課件
- 2025至2030中國氨基吡啶行業項目調研及市場前景預測評估報告
- 2025-2030中國商業展示道具市場應用前景及投資價值評估報告
- 2025年甘肅省武威市民勤縣西渠鎮人民政府選聘專業化管理村文書筆試參考題庫及1套完整答案詳解
- 防洪防汛安全知識試題及答案
- T/CCMA 0137-2022防撞緩沖車
- 江蘇省2025年中職職教高考文化統考數學試題答案
- 產科促宮縮藥
評論
0/150
提交評論