微生物檢測領(lǐng)域設(shè)施和環(huán)境條件監(jiān)測指南2016-05-18發(fā)布2016-10-01實施四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I III 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14一般要求 45有要求的設(shè)施和環(huán)境條件識別 46有監(jiān)測要求的設(shè)施和環(huán)境條件識別 47設(shè)施和環(huán)境條件監(jiān)測 4附錄A(資料性附錄)潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境采樣布點方法 6附錄B(資料性附錄)潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境的監(jiān)測 8附錄C(資料性附錄)儀器和設(shè)備 附錄D(資料性附錄)培養(yǎng)基和試劑的配制 20參考文獻 21本標(biāo)準(zhǔn)為實驗室質(zhì)量管理和技術(shù)運作準(zhǔn)，建議實驗室將該標(biāo)準(zhǔn)與下列微生物實驗室質(zhì)量管理和技術(shù)運作系列標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合起來使用。微生物檢測實驗室安全管理指南微生物檢測實驗室廢棄物處置指南標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存與使用指南微生物檢測領(lǐng)域培養(yǎng)基和試劑管理指南微生物檢測領(lǐng)域培養(yǎng)基和試劑驗證指南本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1給出的規(guī)則進行起草。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢測院提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢測院負責(zé)解釋。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：四川省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢測院，成都市疾病預(yù)防控制中心，四川省食品藥品檢驗檢測院，成都市食品藥品監(jiān)督管理局本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：黃薇，鄭衛(wèi)東，時煒，孟建彤，黎明，劉楊。GB/T27025《檢測和校準(zhǔn)實驗室能力的通用要求》、國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(CNCA)發(fā)布的《檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》、中國合格坪定國家決可委員會(CNAS)發(fā)布的CNAS-CL09:2013《檢測和校準(zhǔn)實驗室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物檢測領(lǐng)域的應(yīng)用說明》,以及與微生物檢測相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范中都對微生物檢測實驗室設(shè)施和環(huán)境條件做出了要求。本標(biāo)準(zhǔn)提出微生物檢測領(lǐng)域設(shè)施和環(huán)境條件監(jiān)測指南，旨在為實驗室提供設(shè)施和環(huán)境管理的科學(xué)路徑，以滿足相關(guān)要求。GB/T27025中5.3.2和《檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》中提出：“……依據(jù)相關(guān)的規(guī)范、方法和程序有要求，當(dāng)影響檢驗檢測結(jié)果質(zhì)量時，應(yīng)監(jiān)測、控制和記錄環(huán)境條件……”的要求。首先，要求中講到“相關(guān)的規(guī)范、方法和程序有要求，或?qū)Y(jié)果的質(zhì)量有影響時”才需要“監(jiān)測、控制和記錄環(huán)境條件”。實驗室在具體應(yīng)用中，對相關(guān)的規(guī)范、方法和程序的要求中，哪些環(huán)境條件對結(jié)果的質(zhì)量會造成影響的識別有差異，有些實驗室甚至要求每個場所都要記錄溫度、濕度，因此會由于做很多無用功而大大影響工作效率。第二，對要求中“控制”的理解。當(dāng)相關(guān)的規(guī)范、方法和程序有要求，或?qū)Y(jié)果的質(zhì)量有影響時，實驗室應(yīng)通過布局、使用設(shè)施、設(shè)備來控制環(huán)境條件，使之滿足相關(guān)的規(guī)范、方法和程序的要求，確保對結(jié)果不會產(chǎn)生不良影響。典型的控制如潔凈實驗室及相關(guān)受控環(huán)境、涉及生物安全的實驗室等等。第三，對要求中“監(jiān)測”的理解。對設(shè)施和環(huán)境條件的要求，最重要的是持續(xù)滿足要求。所以，除了完成建設(shè)安裝設(shè)施設(shè)備后的驗收之外，持續(xù)的監(jiān)測必不可少，以證明在使用過程中設(shè)施和環(huán)境條件持續(xù)符合相關(guān)要求。然而，持續(xù)監(jiān)測對實驗室是較難的工作，不同類型的實驗室對環(huán)境條件要求不同，使得不同實驗室監(jiān)測的內(nèi)容也有較大的差異；相同類型的實驗室因使用目的不同，監(jiān)測的內(nèi)容也不盡相同，因此實驗室應(yīng)針對設(shè)施和環(huán)境條件有要求的區(qū)域，編制專門的作業(yè)指導(dǎo)書，用以指導(dǎo)對設(shè)施和環(huán)境條件的監(jiān)測。第四，對要求中“記錄”的正確理解包括三個方面，一是控制的記錄，即使用設(shè)施、設(shè)備控制后，環(huán)境條件達到要求的驗收證明記錄；二是檢測時，檢測人員對環(huán)境條件的記錄，用以表明環(huán)境條件滿足相關(guān)規(guī)范、方法和程序的要求，或?qū)Y(jié)果的質(zhì)量不會產(chǎn)生影響；三是定期監(jiān)測的記錄，用以表明環(huán)境條件能持續(xù)滿足相關(guān)規(guī)范、方法和程序的要求，或?qū)Y(jié)果的質(zhì)量不會產(chǎn)生影響。本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T27025《檢測和校準(zhǔn)實驗室能力的通用要求》、國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(CNCA)頒布的《檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》和其他有關(guān)準(zhǔn)則、規(guī)范的要求，從有要求的環(huán)境設(shè)施條件識別、有監(jiān)測要求的環(huán)境設(shè)施條件識別、環(huán)境設(shè)施條件監(jiān)測三個方面給出指南。本標(biāo)準(zhǔn)主要由范圍、術(shù)語和定義、一般要求、有要求的環(huán)境設(shè)施條件識別、有監(jiān)測要求的環(huán)境設(shè)施條件識別、環(huán)境設(shè)施條件監(jiān)測和四個資料性附錄構(gòu)成。1微生物檢測領(lǐng)域設(shè)施和環(huán)境條件監(jiān)測指南本標(biāo)準(zhǔn)提出了微生物檢測領(lǐng)域設(shè)施和環(huán)境條件監(jiān)測的指南。本標(biāo)準(zhǔn)適用于微生物檢測領(lǐng)域中有潔凈度要求的設(shè)施和環(huán)境條件監(jiān)測，并滿足GB/T27025《檢測和校準(zhǔn)實驗室能力的通用要求》、國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會《檢驗檢測機構(gòu)質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》、中國合格坪定國家決可委員會(CNAS)CL09-2013《實驗室認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物檢測領(lǐng)域中的應(yīng)用說明》的要本標(biāo)準(zhǔn)不涉及實驗室如何保護環(huán)境的要求，不涉及環(huán)境條件控制，不涉及控制和檢測過程中對環(huán)境條件的記錄。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T27025-2008檢測和校準(zhǔn)實驗室能力的通用要求JG170生物安全柜JG/T292潔凈工作臺國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會《檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》(2015版)3術(shù)語和定義和以下術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)，為方便使用，以下重復(fù)列出了GB/T25915.1、GB50073、GB50591中的某些術(shù)語和定義。潔凈室cleanroom空氣懸浮粒子濃度受控的專用空間，其建造和使用方式使房間內(nèi)進入的、產(chǎn)生的、滯留的粒子最少，房間內(nèi)溫度、濕度、壓力等其他相關(guān)參數(shù)按要求受控。空氣懸浮粒子濃度受控的專用空間，其建造和使用方式使區(qū)域內(nèi)進入的、產(chǎn)生的、滯留的粒子最少，區(qū)域內(nèi)溫度、濕度、壓力等其他相關(guān)參數(shù)按要求受控。注2:參見GB/T25915.1-2010,2.1.2。2潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境cleanroomandrelevantcontrolledenvironments潔凈室及其附屬的、輔助的、相聯(lián)系的開放或封閉的內(nèi)部或周邊空間，該空間空氣懸浮粒子濃度、溫度、壓力以及其它相關(guān)參數(shù)都能被控制在期望的范圍內(nèi)。為檢測設(shè)施或其部分性能而實施的規(guī)定程序。懸浮粒子airbornepartice用于空氣潔凈度分級的空氣中懸浮的固體和液體粒子，其粒徑在0.1μm~5μm。注2:參見GB50073-2013,2.0.7。給定的粒徑檢測儀所顯示的、與被測粒子的響應(yīng)量相當(dāng)?shù)那蛐误w直徑。以單位體積空氣中大于或等于某粒徑粒子的數(shù)量來區(qū)分的潔凈程度。潔凈度分級classification以ISON級表示的、潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境按空氣懸浮粒子濃度劃分的潔凈度水平(或規(guī)定確定該水平的過程)。氣流流型airflowpattern潔凈區(qū)域內(nèi)空氣的流動形態(tài)和分布。單向流潔凈室unidirectionalairflowcleanroom由方向單一、流線平行且速度均勻穩(wěn)定的水平或垂直單向流流過房間工作區(qū)整個截面的潔凈室。3浮游菌airbornebacteria空態(tài)as-built靜態(tài)at-rest動態(tài)operational44.1實驗室設(shè)施和環(huán)境條件管理應(yīng)滿足GB/T27025-2008中5.3,國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會《檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》中4.3的要求；4.2如檢驗方法對實驗室設(shè)施和環(huán)境條件有規(guī)定，實驗室應(yīng)滿足其要求；4.3實驗室設(shè)施和環(huán)境條件還應(yīng)滿足安全的要求；4.4此外，實驗室設(shè)施和環(huán)境條件管理還應(yīng)滿足政府法律法規(guī)及行業(yè)管理部門的要求。5.1從檢測方法文本中識別對所需環(huán)境條件的要求；示例：GB4789.1中3.1.4中規(guī)定，對食品微生物檢驗實驗室環(huán)境的基本要求為實驗室內(nèi)環(huán)境的溫度、濕度、照度、噪聲和潔凈度等應(yīng)符合工作要求。如醫(yī)療用品無菌檢驗時，需在ISO5級的潔凈室進行，實驗室應(yīng)識別所需要的環(huán)境并5.2從檢測儀器設(shè)備使用說明書中或檢測儀器設(shè)備制造商處，獲得運行檢測儀器設(shè)備對環(huán)境條件的要5.3還應(yīng)從實驗室安全方面識別對環(huán)境條件的要求，包括對實驗室布局及其營造的實驗室整體環(huán)境、人員、樣品、生物、財產(chǎn)等安全保護的要求。注：實驗室通過布局、安裝設(shè)施提供符合要求的環(huán)境條件，如在潔凈室內(nèi)設(shè)置與外部聯(lián)系的通外事故時可獲得及時的救助。6.1應(yīng)按照GB/T27025中5.3.2的要求，識別實驗室應(yīng)監(jiān)測的設(shè)施和環(huán)境條件；6.2當(dāng)實驗室的設(shè)施和環(huán)境條件發(fā)生了變化，可能會使結(jié)果無效或?qū)λ蟮臋z測質(zhì)量產(chǎn)生不良影響時，實驗室應(yīng)重新監(jiān)測這些設(shè)施和環(huán)境條件；6.3還應(yīng)關(guān)注影響實驗室安全的設(shè)施，定期檢查或監(jiān)測，確保其功能不會失效；示例：實驗室的緊急噴淋設(shè)施、洗眼器、消防設(shè)施等，確保其應(yīng)定期檢查或監(jiān)測其功能。7.1潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境在投入使用之前，應(yīng)進行綜合性能檢驗，合格后方可運行。綜合性能檢驗至少應(yīng)包括(但不限于)以下項目：送風(fēng)量、壓差、噪聲、照度、自凈時間、氣流流型、甲醛濃度、氨濃度、臭氧濃度和二氧化碳濃度、懸浮粒子或浮游菌、沉降菌等，如安裝了紫外線燈，還應(yīng)檢測紫外線燈輻射照度值；注：新紫外線燈輻射照度值應(yīng)不小于90μW/cm2(30W直管型紫外線燈),使用中紫外線燈紫外線燈輻射照度值應(yīng)不7.2潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境開始使用之后，應(yīng)定期進行監(jiān)測，以證明其持續(xù)符合相關(guān)要求。監(jiān)測指標(biāo)及要求參見附錄A、附錄B;57.3通常，實驗室應(yīng)具備相應(yīng)檢測能力，便于自行開展監(jiān)測。如果實驗室自身不具備檢測能力，可委托外部有能力的技術(shù)機構(gòu)監(jiān)測；7.4自行開展設(shè)施和環(huán)境條件監(jiān)測的，檢測時所使用的儀器設(shè)備應(yīng)按GB/T27025中5.6的要求進行管7.5應(yīng)針對實驗室內(nèi)部開展監(jiān)測的環(huán)境條件項目編制作業(yè)指導(dǎo)書。作業(yè)指導(dǎo)書包含以下內(nèi)容：a)監(jiān)測目的；b)適用范圍；c)監(jiān)測項目及相關(guān)要求、監(jiān)測方法、評價監(jiān)測結(jié)果的方法；d)監(jiān)測周期；e)監(jiān)測結(jié)果不合格時的處置；f)監(jiān)測記錄或報告格式；g)記錄和報告保存規(guī)定。7.6如果監(jiān)測結(jié)果表明，設(shè)施和環(huán)境條件已發(fā)生偏移，應(yīng)在記錄或報告中說明，并分析原因。如可能影響檢測質(zhì)量，應(yīng)給出維修、調(diào)整的建議。7.7任何維修或調(diào)整之后，均應(yīng)對可能受到影響的項目進行監(jiān)測，合格后方能使用。7.8記錄和報告的保存監(jiān)測記錄和報告(如果有)應(yīng)一并存檔。相關(guān)管理部門應(yīng)在規(guī)定時間內(nèi)收集記錄原件和報告正本(如果有),按照實驗室檔案管理程序的要求進行管理。7.9當(dāng)使用潔凈工作臺時，應(yīng)根據(jù)實驗室實際情況，按JG/T292的要求監(jiān)測相應(yīng)指標(biāo)，以證明其持續(xù)符合相關(guān)要求。7.10當(dāng)使用生物安全柜時，應(yīng)根據(jù)實驗室實際情況，按JG170的要求監(jiān)測相應(yīng)指標(biāo)，以證明其持續(xù)符合相關(guān)要求。6(資料性附錄)潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境采樣布點方法A.1采樣點布置應(yīng)力求均勻，避免采樣點在局部區(qū)域過于稀疏，下列多點采樣的采樣點位置圖示可作為參考(見圖A.1)圖A.1平面采樣點布置圖A.2ISO5級單向流區(qū)域或局部空氣凈化設(shè)施的采樣點宜布置在正對氣流方向的工作面上，圖A.2和圖圖A.2水平單向流的氣流形式78(資料性附錄)潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境的監(jiān)測對潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境進行持續(xù)定期監(jiān)測，以此證明其持續(xù)符合規(guī)定的要求B.2監(jiān)測項目及技術(shù)要求B.2.1物理指標(biāo)表B.1給出了潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境應(yīng)監(jiān)測的物理指標(biāo)項目、技術(shù)要求、持續(xù)監(jiān)測周期等要求。表B.1潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境物理指標(biāo)監(jiān)測監(jiān)測項目溫度(℃)相對濕度(%)送風(fēng)量5級(class5)平均風(fēng)速(m/s)12個月單向流(靜態(tài))6級(class6)換氣次數(shù)n(h?)非單向流(靜態(tài))7級(class7)換氣次數(shù)(h?1)15~非單向流(靜態(tài))8級～9級(class換氣次數(shù)(h?1)10~非單向流(靜態(tài))不同等級之間不小于512個月不適用于非封閉潔凈區(qū)潔凈室與室外噪聲12個月照度24個月一照度均勻度24個月小照度與平均照度之比，適用時可測6個月如使用紫外燈(30W直管型)9B.2.2空氣潔凈度指標(biāo)B.2.2.1懸浮粒子表B.2給出了靜態(tài)測試不同潔凈度級別的潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境時，懸浮粒子最大允許數(shù)及證實持續(xù)符合要求的檢測周期。表B.2不同潔凈度級別的潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境懸浮粒子監(jiān)測要求潔凈度級別最大允許數(shù)(粒/m3)5級(class5)6個月6級(class6)12個月7級(class7)8級(class8)9級(class9)注：按測量方法相關(guān)不確定度要求，上述濃度數(shù)據(jù)的有效數(shù)字不超過3位。B.2.2.2沉降菌和浮游菌表B.3給出了不同潔凈度級別潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境對沉降菌和浮游菌監(jiān)測和證實持續(xù)符合要求的檢測周期。表B.3不同潔凈度級別潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境沉降菌和浮游菌監(jiān)測要求5級(class5)5浮游菌：6個月6級(class6)沉降菌：3個月浮游菌：12個月7級(class7)8級(class8) B.2.3表面染菌密度當(dāng)需對室內(nèi)微生物表面污染狀況做細致確認(rèn)時可測表面染菌密度。表B.4表面染菌密度要求物體表面平均菌落數(shù)(CFU/cm2)5級(class5)6級(class6)7級(class7)8～9級(class8～9)B.3檢測要求B.3.1溫濕度B.3.1.1檢測之前，空調(diào)已運轉(zhuǎn)，各項狀況如氣流等已穩(wěn)定；B.3.1.2溫度檢測儀的最小分度值不大于0.2℃,濕度檢測儀的測量精度為±3%;B.3.1.3每個溫控區(qū)域至少設(shè)置一個測點，并位于房間中間，應(yīng)在溫、濕度讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。B.3.2送風(fēng)量B.3.2.1單向流潔凈室應(yīng)采用平均風(fēng)速(m/s)、非單向流或混合流潔凈室宜采用換氣次數(shù)(n)表示，v—送風(fēng)面平均速度(m/s);B.3.2.2檢測室內(nèi)微風(fēng)速儀器的最小刻度不應(yīng)大于0.02m/s;一般可用熱球式風(fēng)速儀；B.3.2.3單向流潔凈室可采用室截面平均風(fēng)速和截面積的乘積的方法確定送風(fēng)量，測點位于高效過濾器出風(fēng)面約15cm~30cm的位置，截面上測點間為輔助風(fēng)管，連接于過濾器風(fēng)口外部，在套管出口平面上，均勻劃分小方格(邊長<200mm),在方格中心設(shè)測點。對于小風(fēng)口，最少測點數(shù)不少于6點。也可采用錐形套同或相近，下口面積不小于上口面積的一半，長度宜大于1.5倍風(fēng)口邊長，側(cè)壁與垂直面的傾斜角不宜大于7.5°(圖B.1)),以測定截面平均風(fēng)速，乘以測定截面凈面積，算出風(fēng)量。DB51/T2167—2016b)風(fēng)量罩法，選用帶流量計的風(fēng)量罩法時，可直接得出風(fēng)量。風(fēng)量罩面積應(yīng)接近風(fēng)口面積。測定時應(yīng)將風(fēng)量罩口完全罩住過濾器或出風(fēng)口，風(fēng)量罩邊與接觸面應(yīng)嚴(yán)密無泄漏。c)風(fēng)管法，如為矩形風(fēng)管，測定面積應(yīng)按奇數(shù)分成縱、橫列，再在每一列上分成若干個相等的小截面，每個小截面宜接近正方形，邊長不大于200mm,測點設(shè)于小截面中心。小管道截面上的測點數(shù)不宜少于6個。如為圓形風(fēng)管，則按等面積圓環(huán)法劃分測定截面和確定測定數(shù)。可在風(fēng)管外壁針對劃分的每行方格中心上開孔，便于插入熱球風(fēng)速儀測桿或畢托管。用畢托管時應(yīng)先測定動壓，然后由下式確定風(fēng)量： Q=1.29F√Pa上二式中：F—管道截面積(m3);Pi…Pin一各點動壓(Pa)。d)風(fēng)口法，測新風(fēng)量、回風(fēng)量等負壓風(fēng)量時，如受環(huán)境條件限制，無法采用套管或風(fēng)量罩，也不能在風(fēng)管上檢測時，則可用風(fēng)口法。風(fēng)口上有網(wǎng)、孔板、百葉等配件時，測定面應(yīng)距其約50mm,測定面積按風(fēng)口面積計算，測點數(shù)同套管法(B.3.2.4a))的規(guī)定。對百葉風(fēng)口，也可在每兩條百葉中間選不少于3點，并使測點正對葉片間的斜向氣流。測定面積應(yīng)按百葉風(fēng)口通過氣流的凈面積計算。B.3.3.1壓差檢測應(yīng)在所有房間的門關(guān)閉時進行；B.3.3.2有排風(fēng)時，檢測應(yīng)在最大排風(fēng)量時進行；B.3.3.3宜從平面最里面的房間依次向外檢測相鄰相通房間的壓差，直至測出潔凈區(qū)域與非潔凈區(qū)、室外環(huán)境(或向室外開口的房間)之間的壓差；B.3.3.4由于所測壓差很小，建議設(shè)置永久性測點，位于潔凈室中央，遠離可能影響測點局部壓力的送風(fēng)口和回風(fēng)口。B.3.4.1一般情況下可只檢測A聲級噪聲，聲級計技術(shù)要求見附錄C;B.3.4.2測點距地面高1.1m;面積在15m2以下的可只測室中心1點，15m2以上則除中心1點外，應(yīng)再測對角4點，距側(cè)墻各1m,測點朝向各角；B.3.4.3當(dāng)為混合流潔凈室時，應(yīng)分別檢測單向流區(qū)域、非單向流區(qū)域的噪聲；B.3.4.4需要時，宜檢測空調(diào)凈化系統(tǒng)停止運行時的本底噪聲，室內(nèi)噪聲與本底噪聲相差小于10dB(A)時應(yīng)對測點值進行如下修正：相差(6～9)dB(A)時減1dB(A)、相差(4~5)dB(A)時減2dB(A)、相差3dB(A)時減3dB(A)、相差小于3dB(A)時檢測值無效。B.3.5.1室內(nèi)照度應(yīng)為除局部照明外的一般照明的照度；B.3.5.2可采用便攜式照度計檢測，儀器技術(shù)要求見附錄C;B.3.5.3檢測必須在室溫趨于穩(wěn)定之后進行，如使用熒光燈，其使用時間已有100h以上，檢測前已開啟15min;如使用白熾燈，其使用時間已有10h以上，檢測前已開啟5min;B.3.5.4檢測距地面高0.8m,按1～2m間距布點，30m2以內(nèi)測點距墻面0.5m,超過30m2的，測點距墻面1m。B.3.6紫外線燈輻射照度值B.3.6.1可使用儀器法(紫外線輻照計，其技術(shù)要求見附錄C)或指示卡法，并均在開啟紫外線燈5min后進行檢測，紫外線輻照計探頭或指示卡置于被檢紫外燈下垂直距離1m的中央處；B.3.6.2紫外線輻照計的檢測波長為253.7nm,應(yīng)在計量部門檢定的有效期內(nèi)使用。檢測時，待其穩(wěn)定后所示數(shù)據(jù)即為所測紫外線燈的輻射照度值。B.3.6.3紫外線檢測指示卡應(yīng)符合國家衛(wèi)生行政部門相關(guān)的資質(zhì)要求，并在產(chǎn)品有效期內(nèi)使用。檢測時，將經(jīng)被測紫外燈照射的指示卡色塊顏色與標(biāo)準(zhǔn)色塊比較。B.3.7懸浮粒子B.3.7.1室內(nèi)檢測人員應(yīng)控制在最低數(shù)量，不宜超過2人。穿潔凈服，應(yīng)位于檢測下風(fēng)側(cè)并遠離測點，盡量少走動；a)粒子計數(shù)器技術(shù)要求見附錄C,應(yīng)按所測粒徑進行標(biāo)定，符合國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T6167《塵埃粒子計數(shù)器性能試驗方法》的規(guī)定。b)測點數(shù)可按下式求出：nmin—最少測點數(shù)(小數(shù)一律進位為整數(shù));√A—被測對象的面積(m2);對于非單向流或混合流潔凈室，指房間面積；對于單向流潔凈室，指垂直于氣流的房間截面積；對于局部單向流潔凈區(qū)，指送風(fēng)面積。測點數(shù)也可按表B.5選用。表B.5測點數(shù)選用表面積(m2)7級2224322862242c)每一受控環(huán)境的采樣點不宜少于2點。對于潔凈度5級及優(yōu)于5級以上的潔凈室，應(yīng)適當(dāng)增加采樣點，并記錄在案。d)采樣點應(yīng)均勻分布于潔凈室或潔凈區(qū)的整個面積內(nèi)，并位于工作區(qū)高度(距地0.8m,或根據(jù)工藝確定),當(dāng)工作區(qū)分布于不同高度時，可以有1個以上檢測面。e)亂流潔凈室(區(qū))內(nèi)采樣點不得布置在送風(fēng)口正下方。f)每一測點上每次的采樣量必須滿足最小采樣量的要求，見表B.6。表B.6最小采樣量5級(class5)—6級(class6)27級(class7)28～9級(class8～9)22表中最小采樣量大于2.83L的，可用2.83L/min計數(shù)器采樣多于1min或用28.3L/min計數(shù)器采樣1min,其余類推。g)每點采樣次數(shù)應(yīng)滿足可連續(xù)記錄下3次穩(wěn)定的相近數(shù)值，3次平均值代表該點數(shù)值。h)當(dāng)懷疑現(xiàn)場計算出的檢測結(jié)果可能超標(biāo)時，可增加測點數(shù)。i)測單向流時，采樣頭應(yīng)對準(zhǔn)氣流；測非單向流時，采樣頭一律向上。j)當(dāng)要求0.5μm~5μm微粒在采樣管中的擴散沉積損失和沉降、碰撞沉積損失小于采樣濃度的5%時，28.3L/min粒子計數(shù)器水平采樣管長度不應(yīng)超過3m,2.83L/min粒子計數(shù)器水平采樣管長度不應(yīng)超過0.5m。k)若儀器采樣口流速與室內(nèi)氣流速度不相等，其比例應(yīng)在0.3:1~7:1之間。1)當(dāng)因檢測差錯或微粒濃度異常低下(空氣極為潔凈)造成單個非隨機的異常值，并影響計算結(jié)果時，允許將該異常值刪除，但在原始記錄中應(yīng)注明。m)每一檢測空間只允許刪除一次檢測值，并且保留的檢測值不少于3個。B.3.7.3結(jié)果計算假定某次檢測了m個點，每個點檢測了n次(各個點的檢測次數(shù)不一定相等)。結(jié)果及參數(shù)計算如A,-第i個采樣點的平均粒子濃度(i=1,2,…m),粒/m3;C,—第i個采樣點第j次采樣的粒子濃度(j=1,2,…n),粒/m3;n—某一采樣點上的采樣次數(shù)，次。b)平均值的均值M按式B.7計算：M-m個采樣點的平均粒子濃度的均值，即潔凈室(區(qū))的平均粒子濃度，粒/m3;A,-第i個采樣點的平均粒子濃度(i=1,2,…m),粒/m3;m—某一潔凈室(內(nèi))的總采樣點數(shù)，個。d)95%置信上限(UCL)按式(B.9)計算：t—95%置信上限的t分布系數(shù)，見表B.7。23456789tB.3.7.4結(jié)果判定(判斷懸浮粒子的潔凈度級別)應(yīng)同時滿足以下兩個條件：a)每個采樣點的平均懸浮粒子濃度不大于表B2.2.1規(guī)定的相應(yīng)級別要求，即Ai≤相應(yīng)級別懸浮b)全部采樣點的懸浮粒子濃度平均值均值的95%置信上限不大于表B.2規(guī)定的相應(yīng)級別要求，即UCL≤相應(yīng)級別懸浮粒子要求。B.3.8沉降菌和浮游菌B.3.8.1沉降菌和浮游菌的采樣裝置有以下兩類第一類：無源采樣裝置，如培養(yǎng)皿。第二類：有源采樣裝置，如撞擊采樣器(技術(shù)要求見附錄C)、離心采樣器、過濾采樣器。B.3.8.2空氣潔凈環(huán)境中浮游菌的靜態(tài)或空態(tài)檢測前，應(yīng)對室內(nèi)各類表面進行擦拭消毒，但不得對室內(nèi)空氣進行熏蒸、噴灑或其他類似的消毒。若為動態(tài)檢測，所有表面和空氣均不得消毒。B.3.8.3用于檢測的培養(yǎng)基或培養(yǎng)條、稀釋液、棉拭子等每批均應(yīng)作空白對照，結(jié)果應(yīng)為陰性。同時每一間潔凈室或每一個控制區(qū)應(yīng)設(shè)1個陰性對照皿，即模擬操作過程，將培養(yǎng)皿或培養(yǎng)條打開后立即蓋上或封條，結(jié)果也應(yīng)為陰性。B.3.8.4沉降菌檢測應(yīng)符合下列要求：a)使用直徑90mm(Φ90)的培養(yǎng)皿采樣。當(dāng)采用其他直徑培養(yǎng)皿時，應(yīng)使其總面積和Φ90皿總面積相當(dāng)。b)檢測菌落總數(shù)應(yīng)使用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(TSA),檢測真菌總數(shù)應(yīng)使用沙氏瓊脂培養(yǎng)基(參見附錄D)。c)培養(yǎng)皿表面應(yīng)經(jīng)適當(dāng)消毒清潔處理后，布置在有代表性且氣流擾動極小的位置。在亂流潔凈室內(nèi)培養(yǎng)皿不應(yīng)布置在送風(fēng)口正下方。d)無特定要求時，培養(yǎng)皿應(yīng)布置在地面及其以上0.8m之內(nèi)的任意高度。e)動態(tài)監(jiān)測時也可根據(jù)具體情況合理確定布點位置和高度。f)采樣點數(shù)應(yīng)不少于B.5中對測點數(shù)的規(guī)定，并同時滿足表B.8中的最少培養(yǎng)皿數(shù)。表B.8最小培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級別5級(class5)6級(class6)47級(class7)38～9級(class8～9)2h)培養(yǎng)皿應(yīng)從內(nèi)向外布置，從外向內(nèi)收皿。i)每布置完1個皿，皿蓋只允許斜放在皿邊上，對照皿蓋挪開即蓋上。j)布皿前和收皿后，均應(yīng)用雙層包裝保護培養(yǎng)皿，以防污染。k)收皿后應(yīng)倒置擺放，并應(yīng)及時(2h之內(nèi))放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。檢測菌落總數(shù)的培養(yǎng)溫度為(35~37)℃,培養(yǎng)時間為(24～48)h;檢測真菌的培養(yǎng)溫度(27～29)℃,培養(yǎng)時間為3d。1)布皿和收皿的檢測人員必須穿無菌服、戴口罩，但不得穿大褂。頭、手均不得裸露，褲管應(yīng)塞在襪套內(nèi)，并不得穿拖鞋。m)對培養(yǎng)后的皿上菌落計數(shù)時，應(yīng)采用5～10倍放大鏡查看，若有2個或更多的菌落重疊，可分辨時則以2個或多個菌落計數(shù)。n)當(dāng)單皿菌落數(shù)太大受到質(zhì)疑時，可按以下原則之一進行處理并做好詳細記錄。——作為壞點剔除；——重測，如結(jié)果仍大，以兩次平均值為準(zhǔn)；如結(jié)果很小，可再測；——重測該處微粒濃度，參考此結(jié)果作出判斷。o)每個測點平均菌落數(shù)取到小數(shù)點后1位。p)計數(shù)各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)M按式B.10計算：M—沉降菌平均菌落數(shù)，CFU/30min;M?…M;—1號到i號測點平皿菌落數(shù)(多個測點時為其平均值),CFU/30min;i—培養(yǎng)皿總數(shù)。q)每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)應(yīng)符合表B.3的要求。在靜態(tài)測試時，若某測點的沉降菌平均菌落數(shù)超過判定要求，則應(yīng)重新采樣2次，2次測試結(jié)果均合格才能判為合格。B.3.8.5浮游菌檢測應(yīng)符合以下要求a)使用單級或多級撞擊式采樣器、離心采樣器或過濾采樣器，采樣必須按所用儀器說明書的步驟進行，特別要注意檢測之前對儀器消毒滅菌。b)檢測菌落總數(shù)應(yīng)使用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基，檢測真菌總數(shù)應(yīng)使用沙氏瓊脂培養(yǎng)基(參見附錄c)采樣點數(shù)應(yīng)不少于表B.5中對測點數(shù)的規(guī)定。d)采樣點應(yīng)在離地0.8m高平面上均勻布置。亂流潔凈室內(nèi)不得在送風(fēng)口正下方布點。靜態(tài)或空態(tài)檢測前對室內(nèi)各種表面應(yīng)作擦拭消毒。e)每點采樣1次，如無特殊要求，每次采樣量應(yīng)大于等于表B.9推薦的浮游菌最小采樣量。當(dāng)預(yù)期含菌濃度可能很低時，采樣量應(yīng)大于最小采樣量很多，以滿足減少計數(shù)誤差的要求。表B.9浮游菌最小采樣量潔凈度級別最小采樣量(L)5級及以上(class5及以上)6級(class6)7級(class7)8～9級(class8～9)注：每次采樣時間不宜超過15min,不應(yīng)超過30min。f)采樣器應(yīng)用支架固定，采樣時檢測人員應(yīng)退出(手持離心式采樣器除外)。檢測人員的穿戴滿足B.3.8.41)的要求。必須手持采樣器時，應(yīng)將手臂伸直，站于下風(fēng)向。g)采樣后宜在2h之內(nèi)將采樣器中的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條送入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。h)每個測點的結(jié)果以平均值表示時，保留小數(shù)點后1位。i)動態(tài)監(jiān)測的測點位置、數(shù)量和高度根據(jù)工藝確定。每間潔凈室或每一個獨立受控環(huán)境中各點總采樣量，不分級別，均應(yīng)大于1m3。每點可用多臺采樣器。j)單點菌落數(shù)太大時，應(yīng)按B.3.8.4n)的規(guī)定處理。k)計數(shù)各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。每個測點的浮游菌平均菌落數(shù)N按式B.11)計算：式中：N—浮游菌平均菌落數(shù)，CFU/m3;n—測點菌落數(shù)(多個測點時為其平均值),CFU;B.3.8.6表面染菌密度檢測要求a)對于潔凈室內(nèi)圍護結(jié)構(gòu)、設(shè)備等表面的微生物采樣，應(yīng)采用無菌棉拭子擦抹法；如果表面很大，硬且平時，也可采用接觸皿法。b)用規(guī)格板標(biāo)定出面積25cm2的區(qū)塊，對于圍護結(jié)構(gòu)，每面結(jié)構(gòu)不少于4塊，對于設(shè)備，每件不少于2塊，取樣地點視具體情況確定。c)用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液稀釋菌懸液，檢測菌落總數(shù)應(yīng)使用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(配制方法見附錄D)。d)將無菌棉拭于含10ml稀釋液試管中浸濕，于管壁上擠干后，對一區(qū)塊擦抹采樣，橫豎往返8次。每一區(qū)塊使用1根無菌棉拭。采樣后，以無菌操作方式將棉拭采樣端剪入原稀釋液試管中，經(jīng)電動混勻器震蕩20s或在手掌振打200次。e)取含菌液體1.0ml,以傾注法接種平皿，每個樣本接種2個平皿，于(35～37)℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(24～48)h后計數(shù)。f)對于適用接觸皿采樣的表面，以無菌操作方式，先將培養(yǎng)基注入硬質(zhì)或軟質(zhì)55mm(Φ55)平皿，使培養(yǎng)基表面高出培養(yǎng)皿周邊，測試時，將培養(yǎng)皿倒過來，使培養(yǎng)基表面均勻牢固地按壓住整個區(qū)域5s,不得有環(huán)形或線性運動。g)對于圍護結(jié)構(gòu)，每面結(jié)構(gòu)應(yīng)用不少于4個培養(yǎng)皿按壓，對于設(shè)備，每件用不少于2個培養(yǎng)皿按h)按壓取樣后的培養(yǎng)皿，應(yīng)在2h之內(nèi)，于(35～37)℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(24～48)h后計數(shù)。i)菌數(shù)平均數(shù)取到小數(shù)點后1位。j)每個測點的表面染菌平均菌落數(shù)應(yīng)符合表B.4的要求。(資料性附錄)儀器和設(shè)備C.1微生物實驗室常規(guī)設(shè)備C.1.1恒溫培養(yǎng)箱：36℃±1℃。C.1.3天平：感量0.1g。C.1.4恒溫水浴箱：46℃±1℃。C.1.5高壓滅菌器：根據(jù)需要配備體積和滅菌溫度適合的儀器。C.2物理指標(biāo)監(jiān)測儀器C.2.1玻璃液體溫度計或數(shù)顯溫度計測量范圍0℃~50℃,測量精度±0.5℃;玻璃液體溫度計刻度最小分度值≤0.2℃,數(shù)顯溫度計的最小分辨率為0.1℃,校準(zhǔn)周期≤12個月。C.2.2機械通風(fēng)干濕表或電動通風(fēng)干濕表在-10℃~45℃條件下測量范圍為10%～100%,測量精度±3%,校準(zhǔn)周期≤12個月。C.2.3熱球式風(fēng)速儀測量由電加熱的微型傳感器上熱傳導(dǎo)的變化來測量風(fēng)速。熱球式風(fēng)速儀的技術(shù)要求見表C.1。表C.1熱球式風(fēng)速儀技術(shù)要求項目設(shè)施檢測為0.1m/s~1.0m/s,風(fēng)管檢測為0.靈敏度/分辨率讀數(shù)+0.1m/s的±(5%)響應(yīng)時間滿刻度的90%時小于1s校準(zhǔn)周期≤12個月C.2.4電子微壓計以膜片位移所產(chǎn)生的靜電電容或電阻的變化，測定一個空間與其周圍環(huán)境間的壓差值，并