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前言

某某省某某醫院臨床基因擴增檢驗實驗室建于2003年12月。實驗室的設置、

設備及人員配置均嚴格按照部、省臨床基因診斷實驗室規范化標準結合

自身條件而建立。各項管理制度、質量保證體系以及基本操作要求和標準操作程

序均已制定。

某某省某某醫院臨床基因擴增檢驗實驗室將面向全省衛生系統，開展臨床基

因診斷實驗和相關知識的培訓工作，使被培訓人員掌握臨床基因診斷基礎理論知

識、實驗室管理和質量保證措施、規范化操作方法以及了解基因診斷領域的進展。

同時還將開展基因（主要是遺傳基因方面）的臨床檢測及科學研究工作，為我省

臨床基因診斷事業的發展做出一份貢獻。

質量方針

臨床基因擴增檢驗實驗室是嚴格按照部、省臨床基因擴增實驗室規范化標準

進行管理與操作，始終遵循：

以病人為中心

以質量為核心

以科學為依據

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崗位職責

1.實驗室負責人崗位職責

（1）確定質量方針，編制質量手冊，并組織人員學習，統一思想。

（2）負責實驗室全面質量，包括試劑盒的質量檢驗；操作的質量檢查；

質量控制（室內室間質評）的結果檢查；實驗結果的核對、質檢和簽發報告；確

定人員培訓計劃；安排日常工作，確保及時發出質量合格的報告。

（3）定期審核和評審質量手冊的運行情況。

（4）對實驗室對內外發出的報告負責，并以簽名簽字形式表示。

2.技術人員崗位職責

（1）按時消毒、清潔實驗室，并記錄簽字。

（2）檢查儀器設備的維護狀況，記錄使用情況并簽字。

（3）按質量手冊規定的標準操作程序（SOP）操作試驗，并填寫報告簽字。

（4）按規定進行實驗的自主質控工作（每次試驗必須有室內質控措施），

并做好記錄簽字。

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人員培訓及成果

1.人員組成及技術檔案

本室有工作人員2人，其中1名中級，1名初級。

2.培訓記錄及專業文章發表情況

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實驗室設施環境及規章制度

1、實驗室分區管理平面圖：見圖示1。

2、實驗室基本設施：

分隔利面積：實驗室嚴格按照標準，分隔為三個獨立的工作室：試劑準備室、

樣品處理室、基因擴增室。

工作流程：從試劑準備一樣品處理一基因擴增，工作人員只能單向流動。進

入下一區域，必須更換工作服、手套。

通風：各室空氣流通性良好。

照明：室內有良好的照明度。

環境：潔凈、無菌；各室均配有紫外消毒設備。

各室的儀器、實驗和文具用具以及清潔物品均屬于各室專用。

3、實驗室消毒隔離及污物處理：

見實驗室廢棄物處理的標準操作程序。

4、實驗室規章制度：

4.1總則

4.1.1進入基因診斷實驗室的任何工作人員都必須遵守實驗室規則；非工作

人員未經允許不得入內，尤其不得為找人而逆向誤入PCR實驗室，以免造成不

應有的污染。

4.1.2臨床基因診斷實驗室分試劑準備、樣品處理、基因擴增室三個室，

各室擁有專用的儀器設備及實驗物品（含加樣器、試管架、吸頭、記錄紙、筆、

甚至清潔用品等），不得混用，須貼上不同顏色標簽予以區別；試劑準備室為白

色標識、樣品制備室為藍色標識、擴增室為綠色標識。

4.1.3臨床基因診斷實驗室工作人員應具備醫學檢驗、微生物學檢驗基本

知識、大中專以上學歷、并受過PCR實驗的基本知識和技能培訓。

4.2.1進入實驗室的工作人員必須遵守實驗室的唯一流向的規定，嚴禁反向

流動。

4.2.2進入實驗室，必須更換本室有顏色標識的工作服（含帽和鞋）。勤換

洗工作服。

4.2.3接收樣品時應檢查樣品是否符合要求、貼上標簽并做好登記。

4.2.4實驗室技術人員必須嚴格按照PCR實驗標準操作程序進行，包括實

驗室擦洗、臺面消毒，離心管、吸頭的無菌滅活準備，儀器使用和廢棄物處理等。

4.2.5進入PCR實驗室后區的物品不許帶進PCR實驗室前區。

4.2.6任何實驗操作包括儀器使用等情況均須做好記錄。

4.2.7檢測結果報告應完整（包括：檢驗項目、靶核酸類型及結果等），并

經專業負責人審核簽字后方可發出。

4.2.8每天實驗開始前，結束后均應按要求清潔、消毒地面和實驗臺面。

4.2.9保持臨床基因診斷實驗室內空氣唯一流向和空氣流通。

4.2.10定期校準和維修PCR儀、離心機、水浴箱、冰箱等儀器、設備。

4.2.11實驗室內不得從事與實驗無關事宜如聊天、飲食、吸煙等；室內禁用

電風扇。

4.2.12每天下班前處理好廢棄物品，關好水、電和門窗。

4.3試劑準備室

4.3.1實驗人員進入該室須穿本室專用白色工作服。實驗中須戴手套。

4.3.2每天實驗開始前，清潔實驗臺并應打開紫外線燈消毒30分鐘。

4.3.3取出當天實驗需配制和使用的試劑，其余試劑要立即收好，放回冰箱

內。

4.3.4試驗中使用的離心管、吸頭等應經過滅活無菌處理，（應在消毒的有效

期內）。

4.3.5其它室的用品不得帶入本室。

4.3.6每次試驗均有記錄；且使用本室專用的、帶有本室標識的記錄本、紙

筆。

4.3.7實驗完畢后要整理、清潔工作臺面。

4.4樣品準備室

4.4.1實驗人員進入該室須穿本室專用蘭色工作服。實驗中須戴手套，手套

需常更換。

4.4.2每天實驗開始前,清潔實驗室和實驗臺，并應打開紫外燈消毒30分鐘。

4.4.3樣品的接受，登記，保存和提取按標準操作程序及試劑盒要求進行。

4.4.4使用本室專用的，經滅菌處理的加樣器和帶濾心的吸頭。

4.4.5做好實驗記錄，并使用本室專用的記錄本和筆。

4.4.6PCR擴增后區的物品不得帶入本室。

4.4.7實驗完畢清潔實驗室和實驗臺，并打開紫外燈消毒。

4.5基因擴增室

4.5.1實驗人員進入該室須穿本室專用綠色工作服.實驗中須戴手套，手套

需常更換。

4.5.2每天實驗開始前，清潔實驗室和實驗臺，并應打開紫外燈消毒30分

453使用本室專用的，經滅菌處理的加樣器和帶濾心的吸頭。

4.5.4需在此進行操作的，如巢式擴增，第一次擴增的模板必須在本室內從

反應管中取出，并加入另一只反應管中，此操作不可返回擴增前區進行。

4.5.5非全封閉操作（即須開啟反應管），應打開排風扇24小時排氣，保持

室內負壓狀態。

4.5.6做好實驗記錄，且使用本室專用的記錄本和筆。

4.5.7PCR擴增室的物品不得帶入擴增前區。

4.5.8實驗完畢清潔實驗室和實驗臺，并打開紫外燈消毒。

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儀器設備和標準物質

1.儀器設備的配置

L1試劑準備室內配置的設備：

紫外燈、普通高速臺式離心機、旋渦振蕩器、一套連續可調式移液槍和無菌

過濾咀型移液器槍頭、冰箱、各種規格的無菌備用的離心管、PCR反應管和玻

璃器皿、實驗臺及本室專用的文具、紙張；

本室專用的白色隔離服、一次性手套、污物桶及清潔用品。

1.2樣品制備室內配置的設備：

紫外燈、臺式高速冷凍離心機、旋渦振蕩器、恒溫水浴鍋、二套連續可調式

移液槍、無菌過濾咀型移液器槍頭、冰箱、各種規格的無菌備用的離心管和玻璃

器皿、實驗臺及本室專用的樣品登記本、文具、紙張；

本室專用的藍色隔離服、一次性手套、污物桶及清潔用品。

1.3基因擴增室內配置的設備：

紫外燈、PCR擴增儀、實驗臺及本室專用的文具、紙張；

本室專用的綠色隔離服、一次性手套、污物桶及清潔用品。

2.儀器設備的使用、維護及校準

見儀器使用、維護及校準標準操作程序。

3.儀器設備的記錄和標識

所有有關基因診斷實驗室儀器使用、維護及校準的操作均記錄備案。校準后

的儀器貼上標識，說明校準E期和狀態。

4.標準物質

陽性、陰性對照：來源于相應的檢測試劑盒。

室內質控物、室間質評物：來源于衛生部和省臨檢中心C

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校準

1.移液器、擴增儀、離心機等對檢測結果有效性、準確性有影響的檢驗

設備，投入使用前必須進行校準，并每年校準1次。

2.參加衛生部組織的室間質評。

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檢驗方法

1.檢驗項目及方法

項目：乙型肝炎病毒DNA定量檢測、丙型肝炎病毒RNA定量檢測

方法：TaqMan熒光定量PCR法乙型肝炎病毒DNA定量檢測

TaqMan熒光定量PCR法丙型肝炎病毒RNA定量檢測

2.操作手冊

儀器使用、維護及校準標準操作程序

樣品采集、保存及運輸標準操作程序

實驗過程標準操作程序（包括：試劑準備、樣品制備、基因擴增和產物檢測

SOP）

各檢測項目標準操作程序

實驗室消毒及污物處理標準操作程序

3.質量保證措施

室內質控

3.1核酸提取質控在核酸提取中，帶一份弱陽性質控樣本和一份陰性質

控樣本（基質與待測樣本相同），分別判定核酸提取的有效性和核酸提取過程中

是否發生污染。

3.2核酸擴增質控靶核酸為DNA：帶一份弱陽性靶DNA質控和一份陰

性質控，以判定DNA擴增的有效性；

靶核酸為RNA：一份弱陽性cDNA質控、一份弱陽性RNA質控和一份陰性對照

以判定轉錄和DNA擴增的有效性

3.3產物檢測質控一份靶DNA或已稀釋的擴增靶DNA陽性質控、一份

陰性質控以及一份試劑空白質控與待測的擴增樣本同步檢測，以判定產物檢測中

核酸雜交及顯色測定的有效性。

室間質控

參加由衛生部臨床檢驗中心組織的全國臨床基因擴增項目的室間質

量評價。

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文件編號__________________________版UU本-Jr-第AA,一版lUX

樣品處置

1.樣本的標識：標識由三部分構成一標本采集日期、該檢測批次的標本序

號和標本類型，三部分間無間隔符號，例如：絲竺魚魚也分別表示年、月、

日、序號和血液標本，序號(01-99),整個標識為8Tl位；

2.樣本的采集、保存和運輸：見樣品采集、保存及運輸標準操作程序。

3.樣本的接收、記錄：樣品接收后，立即貼上本室設計的樣品標識，并在

接收標本記錄表上按要求進行登記。

無簽、遲送的樣品、樣品量不足、溶血的樣品及其它未按規定采集的樣品，

拒絕接收并記錄于拒收標本登記表。

4.樣本的處理：見樣品制備標準操