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文檔簡介
優(yōu)異精品課件文檔資料第1頁第十章
核酸生物合成第2頁第一節(jié)DNA生物合成(復(fù)制)一,DNA復(fù)制主要性二,DNA復(fù)制特征
1,DNA復(fù)制模式-自我復(fù)制一條鏈就是另一條鏈互補鏈,也正是這一點揭示了DNA分子是怎樣進行自我復(fù)制。復(fù)制之前氫鍵將斷裂,兩條鏈松展而分開。然后每條鏈都可做為模板為其本身形成一條搭檔鏈。第3頁2,半保留復(fù)制第4頁1958年,Meselson和Stahl試驗證實了半保留復(fù)制第5頁原核生物:單復(fù)制起點真核生物:多復(fù)制起點3,DNA復(fù)制開始于固定起點第6頁4,復(fù)制方向-雙向5,復(fù)制速度原核:105bp/min真核:5×102-5×103bp/min第7頁三,原核生物DNA復(fù)制1,DNA聚合酶特點*特征-底物(dNTP)*需要模板*方向-5‘-3’*需要引物第8頁第9頁2,大腸桿菌DNA聚合酶1型-109kDa,多功效第10頁2,3型-3型負責(zé)復(fù)制DNA聚合酶校對功效第11頁結(jié)構(gòu):10亞基(αβγδδ’εθτχψ)
2421122214輔基:鋅原子亞基功效:α:合成ε:外切θ:組建β:夾子γ:依賴DNAATP酶第12頁第13頁2,雙鏈打開*DNA旋轉(zhuǎn)酶(ATP)*DNA解螺旋酶(ATP)*單鏈結(jié)合蛋白-SSB第14頁3,岡崎片段(半不連續(xù)復(fù)制)*前導(dǎo)鏈與后隨鏈*岡崎片段合成引物合成酶+聚合酶3*岡崎片段連接聚合酶1+連接酶(NAD+)第15頁第16頁連接酶作用機理第17頁第18頁四,真核生物DNA復(fù)制1,特點-多起點第19頁-各種復(fù)制酶第20頁2,端粒復(fù)制-端粒酶(核酸蛋白復(fù)合體)第21頁六,反轉(zhuǎn)錄作用1,致癌
RNA病毒第22頁2,反轉(zhuǎn)錄酶*底物:dNTP*需要引物*方向:5‘-3’第23頁第24頁第二節(jié)DNA損傷、修復(fù)和重組一,DNA損傷1,概念-DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)任何改變2,原因-紫外線,電離輻射,化學(xué)試劑人皮膚暴露于紫外線下,每小時產(chǎn)生5×104嘧啶二聚體/細胞第25頁二,修復(fù)機制多樣性第26頁三,嘧啶二聚物修復(fù)1,直接修復(fù)-光復(fù)活酶2,切除修復(fù)
過程:尋找損傷-形成切口-切除,填補-連接第27頁第28頁四,細菌限制-修飾系統(tǒng)1,限制性內(nèi)切酶
*命名-EcoRI/HindII
*識別序列特征-4-6bp/二次旋轉(zhuǎn)對稱性
*切口特征-平末端/粘性末端第29頁2,修飾系統(tǒng)第30頁五,DNA重組1,概念
-DNA分子內(nèi)或分子間發(fā)生遺傳信息重新整合2,本質(zhì)-磷酸二酯鍵斷裂和連接第31頁第32頁3,人工重組第33頁第34頁第三節(jié)RNA轉(zhuǎn)錄一,概念-模板,底物,催化劑,產(chǎn)物第35頁二,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA-多順反子(原核)/單順反子(真核)
-非翻譯區(qū)(5‘,3’)-內(nèi)含子(真核)第36頁三,原核細胞轉(zhuǎn)錄1,RNA聚合酶-特征
*底物-NTP*輔基-Mg2+*方向-5‘-3’*無校對功效
第37頁-組成(關(guān)鍵酶,因子)-各亞基功效-速度25-50b/s(37攝氏度)亞基Mw(kD)功效
40組裝
155催化中心
’160
32-92識別開啟子(
)9未知第38頁反應(yīng)機理第39頁2,轉(zhuǎn)錄過程*識別“開啟子”(形成轉(zhuǎn)錄泡)*進行轉(zhuǎn)錄(
因子脫離)*識別“終止子”第40頁第41頁第42頁三,真核生物轉(zhuǎn)錄1,RNA聚合酶分類1型5.8/18/28SrRNA不敏感2型蛋白基因/snRNA10-9-10-8M3型5SrRNA/tRNA/sRNA10-3-10-4M第43頁2,RNA聚合酶抑制劑
-放線菌素D
-利福平-
-鵝膏蕈堿第44頁第四節(jié)轉(zhuǎn)錄后加工一,轉(zhuǎn)錄后加工普遍性和主要性二,rRNA加工1,原核*過程:-甲基化(堿基)-切割(30S-17,23,5S)-成熟第45頁2,真核生物*地點:核仁*過程:甲基化(核糖)-切割,成熟
45S-18,28,5.8S第46頁三,tRNA加工*從原初轉(zhuǎn)錄物釋放-切去附加序列-(加CCA)第47頁四,真核生物mRNA加工過程1,成熟mRNA結(jié)構(gòu)特征*單順反子,無內(nèi)含子,5‘端帽子,3’端尾巴第48頁2,加工過程*加帽-加尾-內(nèi)含子拼接第49頁3,內(nèi)含子拼接*核內(nèi)不均一RNA
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