課時驗收評價（四十八）微生物的培育技術及應用1．下列關于微生物培育的說法，錯誤的是()A．倒平板時，培育基倒入培育皿后要馬上倒置放置B．試驗中錐形瓶、培育皿常用干熱滅菌法滅菌C．用記號筆標記培育皿中菌落時應標記在皿底D．純化培育時，培育皿應倒置培育在恒溫培育箱中解析：選A倒平板時，培育基倒入培育皿后須要等培育基凝固后，才能倒置放置，A錯誤。2．(2024·湖北高考)滅菌、消毒、無菌操作是生物學試驗中常見的操作。下列敘述正確的是()A．動、植物細胞DNA的提取必需在無菌條件下進行B．微生物、動物細胞培育基中需添加肯定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培育基進行滅菌D．可用濕熱滅菌法對試驗中所運用的微量離心管、細胞培育瓶等進行滅菌解析：選D動、植物細胞DNA的提取不須要在無菌條件下進行，A錯誤；動物細胞培育基中需添加肯定量的抗生素以防止污染，保證無菌環(huán)境，而微生物的培育不能運用抗生素，B錯誤；一般用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培育基進行滅菌，以防止雜菌污染，C錯誤；可用濕熱滅菌法對試驗中所運用的微量離心管、細胞培育瓶等進行滅菌，以防止雜菌污染，D正確。3．平板劃線法和稀釋涂布平板法是常用的獲得純培育物的方法。下列相關敘述錯誤的是()A．兩種純化方法的核心都是要防止雜菌污染，保證培育物的純度B．用稀釋涂布平板法進行微生物計數時，所得數據往往比實際值偏小C．獲得純培育物的過程中，應依據微生物的種類調整培育基的pHD．對10mL土樣樣液稀釋106倍后，取0.1mL稀釋液涂布，測得的菌落數分別為218、266、305，則該10mL土樣中目的菌數為2.63×1010個解析：選D用稀釋涂布平板法統(tǒng)計微生物的數量時，一般選擇菌落數在30～300的至少3個平板進行重復計數，求出平均值，D錯誤。4．在分別、純化大腸桿菌試驗中，劃線接種(甲)、培育結果(乙)如圖。下列有關敘述錯誤的是()A．甲中a區(qū)域為劃線的起始位置B．接種前應對培育基進行高壓蒸汽滅菌C．連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落D．接種過程中至少須要對接種環(huán)灼燒5次解析：選A每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端，因此劃線的起始區(qū)域菌落最多。由圖乙可知，圖甲中的d區(qū)域菌落多，為劃線的起始位置，A錯誤。5．牛奶消毒及細菌檢測試驗的過程如圖所示，下列相關敘述不正確的是()A．步驟①為巴氏消毒法，步驟②為系列梯度稀釋，步驟③中的牛肉膏蛋白胨均可供應碳源、氮源B．試驗中對試管、培育皿的滅菌方法是干熱滅菌，適用這種方法的是能耐高溫且須要保持干燥的物品C．試驗中的培育基相宜的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌D．試驗中采納平板劃線法計數，最可能導致試驗結果偏低解析：選D平板劃線法不能對微生物進行計數，D錯誤。6．如圖表示土壤中微生物為植物供應氮的過程，圖中①②③分別代表相關物質，下列有關說法正確的是()A．①是N2、③是NH3，X代表的細菌異化作用類型是需氧型B．①是NH3、②是NOeq\o\al(－,3)，固氮菌在生態(tài)系統(tǒng)中屬于消費者C．②是NH3、③是NOeq\o\al(－,3)，X代表的細菌以有機物作為碳源D．在試驗室培育固氮菌可用二氧化碳為碳源的無氮培育基解析：選C①是N2，②是NH3，③是NOeq\o\al(－,3)，X代表土壤中的分解者，其異化作用方式可能是需氧型，以土壤中的有機物作為碳源，固氮菌在生態(tài)系統(tǒng)中屬于消費者，A、B錯誤，C正確；在試驗室培育固氮菌不能用二氧化碳為碳源的無氮培育基，D錯誤。7．產脂肪酶的細菌可用于含油廢水處理。科研人員用射線照耀從土壤中分別的菌株，反復篩選后獲得產酶實力提高的菌株，詳細流程如圖。下列相關敘述正確的是()A．步驟①取土壤樣品溶于無菌水中制成菌懸液B．步驟②的固體平板可以是以脂肪為唯一氮源的培育基C．步驟②射線照耀可引起細菌基因突變或染色體變異D．步驟③透亮圈越大的菌落，其脂肪酶活性肯定越高解析：選A步驟①取土壤樣品溶于無菌水中制成菌懸液，A正確；組成脂肪的化學元素有C、H、O，要篩選可以產生脂肪酶的細菌，須要用以脂肪作為唯一碳源的固體培育基，B錯誤；細菌是原核生物，沒有成形的細胞核和染色體，不會發(fā)生染色體變異，C錯誤；透亮圈大的菌落，酶活性不肯定高，因此須要對初篩選的菌株進一步進行酶活性檢測，D錯誤。8．野生型大腸桿菌菌株能在基本培育基上生長，氨基酸養(yǎng)分缺陷型菌株由于發(fā)生基因突變而無法合成某種氨基酸只能在完全培育基上生長，如圖為純化某氨基酸養(yǎng)分缺陷型突變株的部分流程圖，數字代表培育基，a、b、c表示操作步驟。有關說法錯誤的是()A．①②④為完全培育基，③為基本培育基B．a操作的目的是提高突變菌株的濃度C．b操作可用涂布器蘸取菌液勻稱的涂布在②表面D．經c過程影印及培育后，可從④培育基中挑取D菌落進行純化培育解析：選C結合題圖信息分析可知，①②④為完全培育基，③為基本培育基，A正確；紫外線可用于誘導突變，提高突變的頻率，故a操作的目的是提高突變菌株的濃度，B正確；b操作是先將菌液滴加到培育基表面，再用涂布器蘸取菌液勻稱的涂布在②表面，C錯誤；由圖可知，D菌落在基本培育基中無法生長，而在完全培育基上能夠生長，這說明D菌落是氨基酸養(yǎng)分缺陷型菌株，故經c過程影印及培育后，可從④培育基中挑取D菌落進行純化培育，D正確。9．自生固氮菌是土壤中能獨立固定空氣中N2的細菌，將玉米種子用自生固氮菌拌種后播種，可顯著提高產量并降低化肥的運用量。科研人員進行了土壤中自生固氮菌的分別和固氮實力測定的探討，部分試驗流程如圖1。回答下列問題：(1)步驟①土樣應取自當地表層土壤的緣由是____________________________________；步驟②需充分振蕩的主要目的是____________________________________。(2)下表為兩種培育基的配方，步驟④應選其中的________培育基，緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。培育基類型培育基組分Ashby培育基甘露醇(C6H14O6)、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸餾水、瓊脂LB培育基蛋白胨、酵母提取物、NaCl、蒸餾水、瓊脂(3)步驟④所用的接種工具是__________，若在④的平板上統(tǒng)計的菌落平均數量為126個，則每克土壤中含有的固氮菌為____________個。(4)將純化的固氮菌置于完全培育液中擴大培育48小時，經離心后收集下層細胞并轉移至特定培育基中進行固氮實力的測定，篩選出固氮實力最強的菌種CM12，為進一步鑒定其固氮實力，科研人員選用發(fā)芽一樣的玉米種子進行3組盆栽試驗，30天后測定土壤微生物有機氮含量，結果如圖2。注：CK為比照處理組；N為尿素處理組(每盆土壤中50mL有氮全養(yǎng)分液，成分為在1000mL無氮植物養(yǎng)分液中加入0.12g尿素)；CM12為自生固氮菌CM12處理組(每盆土壤澆50mL接種自身固氮菌的無氮植物養(yǎng)分液)。①比照組(CK)的處理為_____________________________________________________。②試驗結果表明：施用尿素處理和接種固氮菌CM12處理均能顯著增加土壤微生物有機氮含量。與尿素處理組相比，CM12處理組土壤微生物有機氮含量增加了約__________%(保留1位小數)。③自生固氮菌較共生固氮菌(如根瘤菌)的應用范圍更廣，緣由是________________________________________________________________________。解析：(1)步驟①土樣應取自當地表層土壤的緣由是在富含有機質的土壤表層，有更多的固氮菌生長；步驟②需充分振蕩的主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中。(2)由表格中培育基配方分析可知，步驟④應選其中的Ashby培育基，這是因為該培育基不含氮源具有選擇作用，自生固氮菌可以利用空氣中的氮氣作為氮源，而LB培育基中的蛋白胨可以供應氮源，不具有選擇作用。(3)由圖1視察可知，步驟④平板中的菌落分布勻稱，故所用的接種工具是涂布器，若在④的平板上統(tǒng)計的菌落的平均數量為126個，則每克土壤中含有的固氮菌為126÷0.1×104＝1.26×107(個)。(4)①設置比照組時須要解除無關變量對試驗的影響，故比照組(CK)的處理為每盆土壤澆50mL無氮植物養(yǎng)分液。②由柱形圖分析可知，空白比照組中土壤微生物有機氮含量為10mg·kg－1，尿素處理組的土壤微生物有機氮含量為12mg·kg－1，而CM12處理組土壤微生物有機氮含量為22mg·kg－1，故與尿素處理組相比，CM12處理組土壤微生物有機氮含量增加了(22－12)÷12×100%≈83.3%。③自生固氮菌較共生固氮菌(如根瘤菌)的應用范圍更廣，這是因為自