背景介紹腦膠質(zhì)瘤是一種常見的顱內(nèi)腫瘤，具有起病隱匿、病死率高的特點(diǎn)。腦膠質(zhì)瘤年發(fā)病率高，屬于臨床罕見病。目前，膠質(zhì)瘤的手段主要有手術(shù)切除，化學(xué)藥物治療和放射治療。然而，很少有治療方法能明顯改善腦膠質(zhì)瘤病人的預(yù)后。因此，迫切需要開發(fā)新型治療腦膠質(zhì)瘤的藥物。本文亮點(diǎn)1從經(jīng)典的FAK抑制劑TAE-226出發(fā)，通過分析TAE-226的晶體結(jié)構(gòu)，采用基于結(jié)構(gòu)的藥物的設(shè)計(jì)方法，設(shè)計(jì)合成了22個(gè)化合物，并利用MTT法評(píng)估了它們對(duì)人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞U87-MG

的抑制活性；2本文所設(shè)計(jì)的含噻吩片段的三嗪類化合物未見文獻(xiàn)報(bào)道，為抗腦膠質(zhì)瘤藥物研究提供了一類結(jié)構(gòu)新穎的化合物。內(nèi)容介紹1

實(shí)驗(yàn)部分1.1

主要儀器與試劑1.2

實(shí)驗(yàn)方法人腦惡性星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（U87-MG）購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心，細(xì)胞均保存在RPMI1640或DMEM完全培養(yǎng)基中。化合物對(duì)U87-MG的體外抑制活性通過MTT法測(cè)定。1.3

3-（（叔丁氧羰基）氨基）噻吩-2-羧酸甲酯（1）的合成在100mL圓底燒瓶中，0℃條件下，將1.57g（10mmol）3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯、0.6g（0.5mmol）4-二甲氨基吡啶（DMAP）在攪拌下溶于8mL二氯甲烷。將2.4g（11mmol）二碳酸二叔丁酯溶解在8mL二氯甲烷中后逐滴滴入混合液中。待反應(yīng)原料加完后，升溫至40℃反應(yīng)3h后，加入1.9g（15mmol）N,N-二異丙基乙胺（DIEA）繼續(xù)反應(yīng)1h。待反應(yīng)結(jié)束，對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行減壓濃縮，得到淺黃色液體。2

結(jié)果與討論2.1

合成物結(jié)構(gòu)研究本文共合成新化合物22個(gè)，目標(biāo)化合物(7a~7r)和化合物（8a~8d）的合成路線如圖1所示。最初，3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯與二碳酸二叔丁酯反應(yīng)，得到產(chǎn)率為60%的化合物1。在NaOH溶液存在下，化合物1水解為羧酸得化合物2，產(chǎn)率為90%。隨后，化合物2與甲胺鹽酸鹽反應(yīng)得到95%產(chǎn)率的化合物3。在鹽酸-乙酸乙酯溶液的幫助下，化合物3的Boc基團(tuán)被脫保護(hù)，得到關(guān)鍵中間體4。2.2

體外抗腫瘤活性研究首先，我們通過MTT法評(píng)估了化合物7a~7r和8a~8d對(duì)人腦惡性星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞U87-MG的抗腫瘤增殖活性。如表1所示，對(duì)于U87-MG細(xì)胞系，大部分化合物對(duì)U87-MG細(xì)胞系的抑制率較差，少部分化合物如7l、7m和7n的抑制率分別為40.38%、40.66%和42.88%略低于TAE-226（45.77%），但化合物7h對(duì)U87-MG細(xì)胞的抑制作用最好，甚至比陽性對(duì)照TAE-226更有效，為53.90%。基于U87-MG腫瘤細(xì)胞試驗(yàn)的初步結(jié)果，我們獲得了含噻吩片段的三嗪衍生物的初步構(gòu)效關(guān)系。最后，我們測(cè)試了活性最優(yōu)化合物7h對(duì)腫瘤細(xì)胞的IC50值，以TAE-226為陽性對(duì)照，如圖2所示。3

結(jié)論總之，我們合成了一系列新型的含噻吩片段的1,3,5-三嗪衍生物，并且評(píng)價(jià)了它們的體外抗腫瘤活性。其中，化合物7h在U87-MG腫瘤細(xì)胞測(cè)試中表現(xiàn)出比TAE-226更有效,IC50值為

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