抗豬SIgA單克隆抗體的制備及純化操作規程_第1頁
抗豬SIgA單克隆抗體的制備及純化操作規程_第2頁
抗豬SIgA單克隆抗體的制備及純化操作規程_第3頁
抗豬SIgA單克隆抗體的制備及純化操作規程_第4頁
抗豬SIgA單克隆抗體的制備及純化操作規程_第5頁
已閱讀5頁，還剩11頁未讀， 繼續免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

2抗豬SIgA單克隆抗體的制備及純化操作規程本文件規定了利用Balb/c雌性小鼠（SPF級）進行抗豬SIgA單克隆抗體的制備、純化GB/T35892實驗動物.胞遇到抗原的刺激后，激活、分化為漿細胞，漿細胞可合成和分泌抗..小鼠骨髓瘤細胞的一種，最初都來源于由礦物油誘導細胞由于不能使用核酸合成補救合成途徑而無法生存[1]。3.SIgA：分泌型免疫球蛋白A（SecretoryiSPF：無特定病原（SpecialpaDMEM：細胞培養基（Dulbecco'sModifiedEagleMediELISA：酶聯免疫吸附測定法（Enzyme-linkedimmuIPMA：免疫過氧化物酶單層細胞試驗法（ImmunoperoxidasSf9細胞：草地貪夜蛾細胞（SpodopterafrugiprBV-SC：重組桿狀病毒SC（recombinantB..5.3抗原.pET32a-SC重組蛋白（制備方法見附錄A）.4），.6.2.1取上述免疫合格的小鼠，消毒處理后，無菌采集脾臟組織，對脾臟用不含血清的DMEM液體培養基（以下簡稱“不完全培養基”）進行簡單的潤洗后，用..6.4.1將上述處理好的B細胞和小鼠骨髓瘤Sp2/0細胞按照4:1~5:1的數量比例進行混勻后，），μL/孔，37℃5%CO2培養箱培養，于7~充飼養細胞，繼續培養。根據雜交瘤細胞的生長情況（一般細胞交瘤細胞的鑒定及亞克隆。將篩選鑒定為陽性的克隆細胞再按照半量換液法逐漸替換成含.采用免疫熒光試驗（以下簡稱“IFA”）對上述測定，細胞出現綠色熒光判定為陽性，未出現綠色熒光判定為陰性（檢測方法見附錄D）。.5.層細胞試驗法（以下簡稱“IPMA”）進行測定。當細胞著色呈棕紅色判定陽性，細胞不著....的動態載量填充填料后進行親和純化。用含20mmol/L檸67.A.2.1合成基因序列A.2.2重組蛋白的大量表達、純化8..B.2.2PBST洗滌3次，300B.2.3PBST洗滌3次，300B.2.4以PBS溶液作為樣品稀釋液，對待檢樣本按比例進B.2.6PBST洗滌3次，300μL/孔，拍干，加入TMB顯色液，100μL/孔，室溫（25℃,可D450nm。B.3結果判定.P/N=[（樣品孔D450-空白孔D450）/(陰性對照孔D4509..C.2.1處死小鼠后，無菌注射DMEM液體培養基51..D.2.1重組桿狀病毒rBV-SC接毒后48h（MOI=1），PBS洗板3次，200μL/孔，D.2.5PBS洗板3次，200μL/.1..E.2.1重組桿狀病毒rBV-SC接毒后48h（MOI=1），PBS洗板

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論