第第頁凝膠成像系統原理常見問題分析解答凝膠成像系統常見問題解決方法一、凝膠成像系統的原理？

樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣，以標準品或者其他的替代標準品相比較就會對未知樣品作一個定性分析。這個就是圖像分析系統定性的基礎。依據未知樣品在圖譜中的位置

一、凝膠成像系統的原理？

樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣，以標準品或者其他的替代標準品相比較就會對未知樣品作一個定性分析。這個就是圖像分析系統定性的基礎。依據未知樣品在圖譜中的位置可以對其作定性分析，就可以確定它的成份和性質。

樣品對投射或者反射光有部分的吸取，從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會有差異。光密度于樣品的濃度或者質量成線性關系。依據未知樣品的光密度，通過于已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質量。這就是圖像分析系統定量的基礎。接受較新技術的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻，最大限度的除去了光密度不均造成的對結果的影響。

二、凝膠成像的適用范圍？

1.蛋白質、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分別純化結果作定性分析。

2.可以確定生物分子的分子量。

3.可以應用于生物分子的定量分析中。

三、凝膠成像一般操作步驟？

1.打開凝膠成像系統開關。

2.打開電腦，系統自動打開并進入成像軟件。

3.打開凝膠成像系統前面板，選擇使用紫外透射光源或者白光透射光源，將相應光源安置到位。

4.將樣品放置在透射光源的樣品臺上。

5.在成像操作界面里面選擇使用Upperwhite光源，點擊綠色（即時成像）按鈕。

四、是不是像素越高，產品就越好？

像素是要針對成像設備來看的，比如數碼相機與CCD的像素就不具備可比性，其次CCD本身的質量比單純的像素高處與低處更緊要。對于同級別CCD緊要的指標是其大小，也就是CCD尺寸，尺寸越大其本身價值就成幾何倍地增長。

五、配件紫外反射燈源的緊要用途為何？

紫外反射燈源使用并不廣泛，緊要是供應非透亮材質的DNA跑膠載體如紙層析等的成像需要而使用。由于比較常用的還是透亮的瓊脂糖凝膠與聚丙烯酰胺凝膠，透射光源完全可以充分，因此將紫外反射光源作為選配件不列入標配中。

六、為何要接受自動變焦鏡頭，有何意義？

自動變焦鏡頭無需手動調整，可操作性強，同時也削減了EB潛在的污染機會。再者使得將CCD內置成為了可能，從而達到防灰防塵防震的目的，更好地保護了核心部件延長產品的使用壽命。

七、如何看待CCD的一些緊要技術參數？

CCD的緊要技術參數有CCD尺寸，有效像素，信噪比，采集位數等。其中CCD尺寸與信噪比都是影響成像的關鍵因素，尺寸越大能接受的信號就越多。而熱噪音越低，信噪比就越高，成像質量也就越好。采集位數指顏色灰度的表達范圍。如采集位數為8則表示有2的8次方數量的灰度來還原顏色。

八、紫外對人體有損害，是否具有防護措施？

紫外對人體，特別是眼睛有確定損害，TOCAN凝膠成像系統具備紫外防護設施，在紫外燈開啟的狀態下，如不慎打開暗箱，紫外燈會自動熄滅防止對人體的損害。

九、能否在凝膠成像上直接切膠？

TOCAN凝膠成像可以，如需直接切膠，首先按系統中心的察看窗，打開裝有進口防紫外玻璃的察看窗口，然后打開左右兩側專為割膠所設計的小門，即可進行切膠操作。

10、如何調整焦距聚焦光圈以獲得高質量的圖片？

三個緊要的可調參數分別是焦距聚焦和光圈。其中焦距調整清楚度，聚焦調整圖像大小，光圈調整明暗。一般先把光圈調整到適合的亮度后，再調整聚焦將圖像放到最大，最后調解焦距，在圖像較大的情況下焦距比較簡單調整到清楚狀態，然后再把圖像縮放在適合大小后成像即可。

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1.打開成像儀器電源，將樣品放入工作臺。

2.雙擊桌面上圖標，打開quantityone軟件，或從開始—程序—thediscoveryseries/quantityone進入。

3.從file下拉菜單中選擇chemidoxxrs，打開圖像采集窗口。

4.selectapplication選擇相關應用：

auvtransillumination透射uv：針對dnaeb膠或其他熒光；

bwhitetransillumination透射白光：針對透光樣品如蛋白凝膠，x—光片；

cwhiteepillumination側面白光：針對不透光樣品或蛋白凝膠；

dchemiluminescnece化學發光，不打開任何光源。

5.單擊live/focus按鈕，激活實時調整功能，此功能有三個上下鍵按鈕：iris（光圈），zoom（縮放），focus（聚焦），可在軟件上直接調整或在儀器面板上手工調整，調整步驟：a調整iris至適合大小；b點zoom將膠適當放大；c調整focus至圖像清楚。

6.如是dnaeb膠或其他熒光，單擊autoexpose，系統將自動選擇曝光時間成像，如不充分，單擊manualexpose，并輸入曝光時間（秒），圖像充分后保存。

如是蛋白凝膠，接第5步驟直接將清楚的圖像保存即可；如是化學發光樣品，將濾光片位置換到chemi位（儀器上方右側），將光圈開到最大，輸入manualexpose時間，可對化學發光的弱信號進行長時間累積如30min，或單擊liveacquire進行多幀圖像實時采集，在對話框內定義曝光時間長短，采集幾幀圖像，在采集的多幀圖像中選取充分的保存。

注意事項：

1.請勿將潮濕樣品長期放在暗箱內，以防腐蝕濾光片，更不要將液體濺到暗箱底板上，以免燒壞主板。

2.使用后將平臺擦干凈，以防有水損壞ccd；切膠時在平臺上墊上保鮮膜，以防劃損平臺。

3.儀器使用完后請適時關閉電源，特別是chemidoxxrs的ccd電源。

4.只有在進行化學發光試驗時才需要提前打開冷ccd預熱30min再使用，其他操作無需預熱。

請勿使用掌控成像儀的電腦上網，也不要自行重裝電腦操作系統或給操作系統升級。如今，凝膠成像分析系統已經不僅僅是種凝膠記下的手段，普遍應用于蛋白、DNA的凝膠記下中了，更是種印跡分析，數據獲得的方式。要選擇個合適的凝膠成像系統，各人要求依據目前的預算和將來討論要求來決議，市場上有浩繁的類型和型號可供選用，但是大要務必記住常常留意新的產品動向――快速進展的光學技術和成像分析軟件或許能實現你以前想都不敢想的便利操作。假如你現在就要求臺凝膠成像系統，雖然目前你們試驗室很小并且預算很緊，或者你不要求很多花俏的凝膠成像系統的功能，但是預知將來可能會要求更多多而雜的性能的時候，好購買臺能允許你升到充分你將來要求的凝膠成像系統。

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