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文檔簡介
生物化學與基礎分子生物學實驗智慧樹知到期末考試答案+章節答案2024年中山大學在進行瓊脂糖凝膠電泳實驗時,一位同學在瓊脂糖未完全凝固時就拔梳子開始上樣,那么可能造成的結果是(
)
答案:電泳時條帶不齊###不同孔道的樣品交叉污染###加樣時“槍頭”容易戳破孔槽而導致樣品滲漏以下關于米氏常數(Km)的表述,正確的有(
)
答案:不同的酶Km值也不同###對于同一個酶,當它催化不同的底物時,Km值會發生變化在PCR反應中,以下哪些調整可以提高產物的特異性?(
)
答案:適當減少模板DNA的濃度###減少反應的循環次數###適當減少引物的濃度以下操作中有可能導致米氏常數和最大反應速率測定出現明顯偏差的有(
)。
答案:底物溶液在倍半稀釋過程中操作失誤###加入所有試劑后,采用輕敲酶標板的方式進行混勻###數據處理時,未舍棄出現明顯偏差的數據點,直接進行擬合在以下定量方法中利用肽鍵發生反應的有(
)
答案:BCA法###Lowry法在紫外檢測時,關于比色皿光面和毛面的說法,不正確的是(
)
答案:在拿取比色皿時,手接觸哪一個面都是可以的###放入檢測倉時,如果光面和毛面放反了,會導致檢測得到的光吸收值大于實際值ELISA實驗中,為提高實驗的準確性和可信性,應設置足夠的空白對照,包括(
)
答案:不加入一抗的空白對照###不加入二抗的空白對照###不加入顯色底物的空白對照###不加入蛋白樣品的空白對照從原理上分析:在進行qRT-PCR時,與PCR反應相比,需要額外加入的試劑是(
)
答案:SYBR
Green探針或其他熒光探針###逆轉錄酶一幅規范的數據圖必須具備的信息包括哪些?(
)。
答案:橫縱坐標軸的數據刻度###橫縱坐標軸標題及單位###圖表標題關于抗原或抗體固相化的過程,正確的說法包括(
)
答案:固相化指的是將抗原或者是抗體吸附在固相表面的過程###固相化后的抗體或抗原的免疫原性不受影響當進行生物化學實驗時,如果檢出的信號過低,不會影響對實驗結果的判斷。(
)
答案:錯提取核酸時,如果得到的是雜質含量較少的產品,那么這一產品測得的OD260/OD280
的比值可能為(
)
答案:1.9###2.0競爭性抑制劑會影響底物與酶的結合,在米氏方程中表現為
Km
與
Vmax
同時下降。(
)
答案:錯在進行SDS實驗時,一位同學在濃縮膠未完全聚合時就拔梳子開始上樣,那么可能造成的結果是(
)
答案:電泳時條帶不齊###不同孔道的樣品交叉污染###無法完全上樣,樣品溢出加樣槽二代測序技術(高通量測序技術)與Sanger測序法相比,主要的改進包括(
)。
答案:使用橋式PCR技術###使用固相載體(如芯片)###使用熒光探針實時記錄數據###使用了邊合成邊測序技術ELISA實驗檢測得到的信號較弱甚至是無信號,可以采用哪些方法進行調整?(
)
答案:更換緩沖液,特別是孵育緩沖液的配方###延長包被或孵育的時間,或提高孵育的溫度###更換吸附力更強的ELISA板使用紫外吸收法進行蛋白質定量,而獲得的蛋白質樣品總量較少,可以選擇的儀器包括(
)。
答案:酶標儀###NanoDropTM
超微量紫外分光光度計只要自己能記住,什么時候寫實驗記錄都是沒問題的。(
)
答案:錯在ELISA或Western
Blot實驗中,封閉液可以用5%脫脂奶粉溶液代替。(
)
答案:對在PCR反應中,適當提高模板DNA的濃度可以提高擴增產物的特異性。(
)
答案:錯如果
PCR
實驗中,實驗組經電泳分離后出現明顯拖尾條帶,可以通過提高退火溫度來進行調整。(
)
答案:對由于酶標板在儀器檢測時默認所有孔內的液體高度是一樣的,所以即便在加樣時某些孔內出現了液滴掛壁現象也不影響檢測結果。(
)
答案:錯在使用NanoDrop檢測紫外吸光度時,如果待測試樣內含有表面活性劑會導致檢測失敗。(
)
答案:對在質粒的堿裂解法提取中,由于質粒的天然超螺旋狀態,因此,復性時比染色體DNA要慢。(
)
答案:錯在細菌轉化的實驗中,如果涂布了市售感受態細胞的平板上沒有長出菌落而涂布了自制感受態細胞的平板上長出了較多菌落,說明市售感受態細胞一定是失效了。(
)
答案:錯PCR反應中,復性溫度應高于引物的Tm值。(
)
答案:對感受態細胞制備中,鈣離子的作用主要是使細胞膜呈現液晶態。(
)
答案:對酶活力的國際單位(IU)是指在優化的條件下,1
min內轉化
1
μM
底物所需的酶量。(
)
答案:錯如果實驗室的ELISA板剛好用完了,可以用96孔板代替ELISA板進行實驗。(
)
答案:錯在紫外檢測時,所謂的空白扣減就是指將實驗樣品檢測得到的吸收值減去空白對照樣品(參比管)的吸收值。(
)
答案:對如果一個待分離蛋白質是具有四級結構的蛋白質,使用SDS進行分離,并使用考馬斯亮藍法進行染色。那么,樣品是否用巰基乙醇處理對于電泳結果會有什么影響?(
)
答案:是否使用巰基乙醇處理對產生的條帶數量可能沒有影響以下關于ELISA實驗各個步驟的描述,不正確的是(
)
答案:所有的洗滌步驟都是使用PBS緩沖液進行洗滌質粒提取后,可以使用氯仿/酚抽提、異丙醇沉淀等方法進一步除去殘存的蛋白質和核酸,得到純化的質粒DNA。(
)
答案:對在進行不同組別的實驗數據之間的比較分析時,可以采用柱形圖的作圖方式展示。
(
)
答案:對以下哪個標志代表了該化學品屬于腐蝕性危險品?
(
)
答案:當某一個實驗技術的英文名稱以“immuno-”作為前綴時,代表這一項技術主要利用了(
)
答案:抗原-抗體反應在提取質粒DNA時的核心操作是柱層析,在提取RNA時的核心操作是萃取。(
)
答案:對使用酶標儀進行紫外檢測時,當酶標板的內壁出現明顯掛壁液滴時,對實驗結果不會有明顯的影響。(
)
答案:錯實驗室安全的首要原則是保證人員安全和環境安全。(
)
答案:對
答案:偏大酶促動力學測定實驗中,最重要的操作要領是(
)
答案:注意控制時間,保證孔間反應時間一致
答案:比色皿厚度(如圖所示)在進行土豆酪氨酸酶活力測定時,某位同學計算得到的酶活力是
0.03
IU,但在計算結束后發現光徑采用了默認的
1
cm
而不是實際測量時的
0.6
cm。那么,這位同學實驗得到的實際酶活力應為(
)
答案:0.05
IU有機溶劑沉淀蛋白質是蛋白質分離的重要方法。下列描述中與有機溶劑沉淀法無關的是(
)
答案:低濃度下表現為鹽溶現象,高濃度下表現為鹽析現象在以下哪一因素對離心效果沒有明顯影響?(
)。
答案:環境溫度在PCR反應中,以下哪些調整可以提高反應的產量?(
)
答案:提高反應體系中Mg2+的濃度凝膠過濾層析法分離不同蛋白質的原理是(
)
答案:凝膠內部的微孔結構像篩子一樣區分不同蛋白質的大小
答案:凝膠的濃度變小了,所以特定條帶在該凝膠中的遷移速度會變大。天然狀態的質粒主要存在狀態是(
)
答案:超螺旋以下哪個ELISA方法無法實現信號的放大,所以靈敏度偏低?
(
)
答案:直接法進行PCR時,如果分別以基因組DNA和質粒DNA作為模板來說,在同樣的體系中基因組DNA的需要量往往比質粒DNA的要少。
答案:錯限制性內切酶切割DNA鏈,產生的是具有粘性末端的產物。
答案:錯進行常規PCR時,定制的PCR引物使用脫鹽純化進行純化就可以了。
答案:對如果需要進行多重定量PCR檢測,也就是在同一個體系里同時檢測多個目的基因片段,可以使用SYBRGreen探針。
答案:錯對新冠肺炎疑似患者進行的核酸檢測的實質是進行實時定量的逆轉錄PCR實驗。
答案:對逆轉錄PCR(RT-PCR)使用的起始原料(模板)是
答案:mRNA限制性內切酶作用的實質是使DNA水解斷裂,破壞磷酸二酯鍵。
答案:對如何能夠盡量避免在PCR反應出現非特異性擴增?
答案:調整緩沖體系中的溶液組成成分###減小加入的模板DNA或聚合酶的量###重新設計引物以下關于瓊脂糖凝膠電泳的敘述,不正確的是
答案:只要分子量大小一致,不同的DNA在瓊脂糖凝膠電泳中的遷移率是一樣的PCR反應最主要是利用了DNA哪方面的性質?
答案:變性與復性以下關于本次實驗的操作,正確的是
答案:所使用的耗材應為無菌的一次性耗材###可以根據實驗所需的管數,現將基礎的試劑配好混勻后分裝至各試驗管###無論是DNA聚合酶還是限制性內切酶,都應在所有試劑全部加完之后最后加入下列關于實時熒光PCR技術中探針的描述,正確的是
答案:由于加入探針的量是有限的,因此在PCR反應進行到后期時,檢測到的熒光值會出現檢測平臺###Taqman探針利用的是熒光能量共振轉移的原理###Taqman探針是需要根據具體擴增片段進行特定設計的所謂的“退火”,其實就是雙鏈DNA變性解鏈后,發生復性的過程。
答案:對PCR反應沒有出現預期的擴增產物,有可能的原因包括
答案:引物設計不合適###緩沖體系不合適或體系中存在蛋白酶抑制劑###PCR循環設置條件未優化###模板含量過低以下哪一種試劑不屬于PCR反應所需的原料?
答案:NTP提取質粒DNA時,通過控制體系溫度的變化實現DNA的變性與復性。
答案:錯本次實驗中,提取質粒DNA的本質是利用分子的溶解度差異實現的。
答案:對在氯化鈣法中,質粒DNA進入細胞內的前提條件是DNA與鈣離子形成復合物并黏附于細胞膜上。
答案:對只要在體系中維持足夠高的濃度,外源基因可以直接到宿主細胞的細胞核內。
答案:錯當DNA發生變性后,以下說法不正確的是
答案:溶解性增強關于本次實驗中固體LB培養平板的配制過程,不正確的操作時
答案:加入抗生素(如卡那霉素)后再整瓶進行高壓滅菌關于超微量紫外分光光度計的敘述,正確的是
答案:檢測時不需要比色皿###當檢測樣品體積較少使用可避免因大比例稀釋所帶來的誤差###如果待測樣品溶液內包含表面活性劑,則不能使用質粒DNA在堿性條件下,會發生什么改變?如果將體系條件恢復到中性,又會發生什么改變?
答案:變性;復性下列關于氯化鈣法制備感受態細胞和轉化質粒,不正確的說法是
答案:整個過程全程都在0℃條件下進行要確保實驗過程中的無菌操作,我們可以采用哪些方法對實驗中使用到的試劑、耗材和工作環境進行消毒滅菌?
答案:化學劑消毒法###過濾除菌法###濕熱滅菌法###干熱滅菌法細菌細胞浸泡在CaCl2低滲溶液中足夠長的時間后,細胞變為膨脹的球形狀態。
答案:對提取質粒DNA時,是依靠其與基因組DNA的哪方面性質差異實現分離提取的?
答案:結構###分子大小以下關于本次實驗步驟的敘述,正確的是
答案:獲取足夠多的處于對數生長期的受體菌###轉化質粒時,質粒DNA的含量應控制在5~50ng范圍內,過多或過少均會導致實驗的失敗ELISA實驗的最后一步——發光底物的檢測中,加入終止液后,什么時候進行檢測都可以。
答案:錯在ELISA實驗中,一抗包被完畢的酶標板可以直接進行下一步,即加入樣品溶液孵育的步驟。
答案:錯在實驗設計沒有問題的情況下,洗板是否徹底成為了ELISA實驗成敗的關鍵。
答案:對關于多道移液器的使用注意事項,正確的選項包括
答案:慢吸慢放以確保吸液體積準確無誤###一旦吸頭碰到孔內其他液體,立即更換新的潔凈吸頭###確保各個道次之間的吸液體積一致關于夾心法和競爭法異同點的描述,不正確的選項是
答案:最終的檢測,都是看檢測信號的強弱,檢測信號越強,代表待測蛋白質的含量越豐富以下關于洗板這個步驟的描述,錯誤的是
答案:如果檢測結果背景偏低,有可能是洗板不充分導致的夾心法中,一抗和二抗識別的抗原表位應該是同一個。
答案:錯96孔板雖然可以吸附抗原或抗體,但是不能夠參與免疫反應。
答案:對以下關于ELISA實驗設計與優化的敘述,正確的是
答案:首先要確保所選擇的一抗是適用于ELISA實驗的###如果標準曲線線性較差,可以考慮重新溶解標準品,且在開蓋前進行離心###更換底物溶液或重新配制底物溶液有助于提高檢測信號ELISA法最終檢測的信號實際上是
答案:標記在二抗上的酶將底物轉化為有色產物的光吸收ELISA實驗中,包括哪些單元操作?
答案:利用多道移液器加樣與混勻###洗板###使用酶標儀進行紫外檢測以下關于ELISA實驗中非特異性結合的描述,不正確的是
答案:非特異性結合與目的蛋白和抗體之間的親和結合相比,結合力微不足道,不會影響實驗結果抗原或抗體可以通過哪些作用力吸附到固相載體上?
答案:親水鍵###疏水力###靜電力(離子鍵)###共價作用力如果一個小分子藥物與特定靶標蛋白質結合后會導致該蛋白質變構,那么,可以使用電泳技術進行分析鑒定。
答案:對抗原-抗體反應是機體免疫系統針對外源性物質進行免疫的反應本質,因此,借助抗原-抗體反應開展的檢測技術只能針對病原體進行檢測。
答案:錯蛋白質樣品經電泳分離后,凝膠可直接進行Westernblot顯色。
答案:錯在聚丙烯酰胺凝膠聚合過程中,加入的過硫酸銨屬于
答案:催化劑一般來說,我們描述蛋白質的空間結構變化不涉及到下列哪一級結構的改變?
答案:一級結構對于一個蛋白質來說,無論其是否變性,理論上都可以進行SDS分離。
答案:對一般來說,WesternBlot法有哪些主要步驟?
答案:顯色###轉膜###抗體孵育###電泳分離對于一個具有四級結構的蛋白質來說,進行SDS分離后,可能得到的條帶情況是
答案:同時出現多個條帶,分子量對應的蛋白質既包括單體,也包括高級結構在聚丙烯酰胺凝膠電泳中加入SDS的目的是
答案:破壞蛋白質結構中的共價鍵###屏蔽分子自身所帶電荷對遷移率的影響如果電泳分離蛋白質樣品的分離效果不佳,分辨率不好,下列哪種調整方式不會取得明顯的改善?
答案:增大樣品的上樣量在配制聚丙烯酰胺凝膠時必須使用通風櫥是因為下列哪些試劑屬于有毒物質或易燃物質?
答案:丙烯酰胺###TEMED###過硫酸銨在非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳中,分子的遷移率與什么有關?
答案:空間結構###所帶電荷###分子量大小在進行WesternBlot實驗時,分離蛋白質采用的電泳技術應為
答案:SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳在酶促反應動力學中,可以使用倍半稀釋法進行底物溶液的配制,關于這一方法,正確的說法包括
答案:該方法實際上就是按照1:1的比例逐級進行溶液的稀釋###在進行倍半稀釋法時,每一個濃度溶液的完全混勻至關重要###該方法可以避免低濃度底物溶液在直接配制時所產生的操作誤差以下關于酶標儀的描述,正確的是
答案:酶標儀需要配合多孔板使用###在使用酶標儀檢測的過程中,可以同時對多個孔道內的紫外吸收值或光吸收值進行檢測###酶標儀的本質是紫外分光光度計或光電比色計在使用多道移液器進行加樣時,放液一定要保證槍頭尖端抵靠在容器內壁或浸入溶液下方。
答案:對只要是在相同條件下測定同一個酶的同一個反應,那么通過v-[S]圖和雙倒數圖測定得到的結果是相同的。
答案:錯當體系中存在酶的競爭性抑制劑時,關于Km和Vmax值的描述正確的是
答案:Vmax不變,Km增大下列關于酶促反應速率和酶活力之間的關系,正確的是
答案:酶的活力計算公式與酶促反應速率的計算公式從本質上說都利用了朗伯比爾定律對于一個給定的反應,影響酶活力的因素包括
答案:是否存在抑制劑###反應體系溫度###反應體系酸堿度###底物濃度對于酶促反應來說,可以認為反應速率越大,酶的活力越高。
答案:對如果一個抑制劑不與酶的活性中心結合,只是結合酶的其他部位而導致酶發生變構,這屬于不可逆抑制。
答案:錯在雙倒數圖中,擬合得到的直線與y軸的交點是
答案:1/Vmax從反應動力學的角度分析,酶促反應是
答案:既有一級反應,也有零級反應米氏常數的單位其實表征的是濃度。
答案:對酶促反應動力學實驗要獲得較為可信的結果,可以采取的措施包括
答案:精確加樣###精確控制反應時間###精確控制反應溫度###合理設置復孔及對照組由粗酶純化獲得精酶的過程中,酶的比活力隨著酶的純度提高而提高。
答案:對有機溶劑沉淀法比鹽析法分辨率高,可以用于蛋白質的精度純化。
答案:錯當柱床體積相同時,細而長的凝膠柱往往比短而粗的凝膠柱對不同分子量大小的蛋白質的分離效果更高。
答案:對蛋白質分離純化的前處理可以采用的方式包括
答案:研磨破碎###超聲破碎###酶解在繪制凝膠層析柱純化土豆酪氨酸酶的洗脫曲線時,酶標儀在480nm處光吸收測量的是
答案:產物多巴色素(多巴紅)的生成以下關于有機溶劑沉淀法分離土豆酪氨酸酶的實驗描述不正確的是
答案:有機溶劑沉淀法相對于鹽析,分辨率更高,蛋白質活性更易保留,使用得也更廣泛###實驗中保持冰上操作的目的是為了避免蛋白酶對土豆酪氨酸酶的降解該實驗在制備土豆勻漿時,需要加入抗壞血酸,這樣做的主要目的是
答案:防止實驗原料氧化凝膠層析法一種常用的蛋白質純化技術。以下關于凝膠層析法的描述不準確的是
答案:葡聚糖凝膠交聯度越高,凝膠顆粒內網孔結構越緊密,對蛋白質的純化效果越好如果目的蛋白質與雜質的分子量差異明顯,那么可以采用哪些細分級分離方法?
答案:分子篩層析###SDS電泳###超速離心在利用凝膠層析色譜法純化蛋白質時,分子量大的蛋白質比分子量小的蛋白質先從層析柱上洗脫下來。
答案:對有機溶劑沉淀法中影響蛋白質沉淀效果的因素包括
答案:體系溫度###是否存在金屬離子###目的蛋白的濃度###溶液pH值粗分級分離最主要是利用了物質之間的什么性質差異進行的?
答案:溶解度關于有機溶劑沉淀法分辨率的描述不準確的是哪個
答案:土豆酪氨酸酶精酶的質量是由Bradford法測量得到的精酶濃度和接收得到的洗脫液總體積相乘計算的紫外檢測的光路方向跟生物化學實驗沒有太大關系,知不知道無所謂。
答案:錯當待測樣品檢測得到的紫外吸收值高于標準曲線中最高濃度的吸收值時,可以直接將吸收值帶入線性擬合方程中進行計算。
答案:錯紫外檢測前進行調零(zero)的目的是扣除比色皿及溶液自身的紫外吸收。
答案:對Lowry法和BCA法都是在雙縮脲法的基礎上,加入了提高靈敏度的步驟。
答案:對在進行考馬斯亮藍染色比色法測定蛋白質含量時,配制樣品時應做到
答案:每一管中加入考馬斯亮藍染料后立即混勻樣品溶液從結構特征上來說,蛋白質定量檢測一般可以利用哪些化學結構?
答案:特征性元素###某些氨基酸的R基團###肽鍵下列哪一個氨基酸的含量對紫外吸收法的結果無明顯影響?
答案:甘氨酸當你需要對蛋白質樣品進行精確定量,且樣品所處的溶液環境可能存在一些檢測干擾因素時,你應該選擇哪種定量方法?
答案:BCA法考馬斯亮藍主要是利用哪些作用力與蛋白質相互結合的?
答案:疏水力###靜電相互作用凱氏定氮法的本質是滴定法。
答案:對下列哪些蛋白質定量方法利用了雙縮脲反應進行檢測?
答案:BCA法###Lowry法(福林酚法)紫外吸收法檢測蛋白質含量具有快速、靈敏度高的特點,所以廣泛應用于蛋白質分離純化時的快速鑒定。
答案:錯當待測樣品溶液中含有下列哪類物質時,會對凱氏定氮法測定蛋白質含量產生明顯的干擾?
答案:含有氨基的雜質###含氮量特別高的雜質當待測樣品在溶液中未發生明顯變化,但溶液產生了較多沉淀導致了渾濁,此時直接使用該溶液進行紫外檢測,結果不會受到明顯影響。
答案:錯氨基酸自動分析儀的技術基礎是離子交換層析法。
答案:對在熒光光譜中,一定要先給予待測樣品激發光,樣品才能產生發射光。
答案:對在使用移液器時,應注意區分上方按鈕的兩個不同檔位,吸液時需按下一檔,放液時需按至二擋。
答案:對在使用離子交換層析法進行細分級分離時,如果使用的是磺酸型陽離子交換柱,那么,隨著洗脫液的加入,先洗脫出來的是
答案:陽離子含量較少的分子以下哪些分離方法是基于物質的分子大小進行分離的?
答案:超濾法###透析法沉淀法分離溶液中的不溶物,這主要是利用哪個性質實現的?
答案:溶解度以下哪一個使用習慣可能造成移液器的損耗或損壞?
答案:為了保證吸頭與移液器的連接緊密
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