細胞凋亡途徑及其機制外源性途徑(死亡受體途徑)和內源性途徑(線粒體途徑),以及近細胞壞死(Necrosis)則是由于病理性因素或劇烈損傷引起的意caspase7)和啟動者(如caspase9)兩類。執行者可以直接降解胞起線粒體細胞色素c的釋放。細胞色素c作為凋亡誘導因子，能與1.外源性凋亡途徑(死亡受體途徑)相應的配體(如FasL或TNF)結合后，受體會發生三聚化，并招募合物一旦形成，就會激活Caspase8,進而觸發Caspase級聯反應。Caspase級聯反應是一系列的蛋白酶水解反應，其中Caspase8激活后，會進一步激活Caspase3等下游的Caspase分子，最終導致細胞2.內源性凋亡途徑(線粒體途徑)體外膜的通透性增加，導致細胞色素c(Cytc)從線粒體中釋放到Bax和Bak)和抗凋亡蛋白(如Bc12和BclxL)。在應激條件下，促細胞色素c釋放到細胞質后，與凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf1)和OmiHtrA2,它們能夠抑制IAPs(凋亡抑制蛋白)的活性，從而增磷酸化真核生物起始因子2(eIF2)來抑制蛋白質合成，從而減少錯進而激活Caspase8。Caspase8的激活可以引發下游的Caspa體膜電位下降，線粒體通透性轉換孔(mPTP)開放，導致細胞色素C 凋亡執行階段主要由Caspase家族成員完成。Caspase是一細胞凋亡還受到多種調控分子的影響。如Bc12家族成員可以調控線粒體膜的通透性，從而影響Cytc的釋放IAPs(InhibitorofApoptosisProteins)可以抑制Caspase的活性而p53等轉錄因子則外源性途徑(死亡受體途徑):該途徑主要由死亡受體(如Fas、TNFR等)啟動。當這些受體與相應的配體結合后，會形成死亡誘導接引發細胞凋亡，或者通過切割Bid蛋白生成tBid,進一步激活內內源性途徑(線粒體途徑):該途徑主要由線粒體介導。當細胞 (mPTP)會開放，導致線粒體膜間隙的細胞色素c(Cytc)釋放到胞制來增強Caspase的功能。例如，Bid蛋白在被Caspase8切割后，活性。例如，活化的Caspase3可以進一步切割并激活其他Caspase抗凋亡基因(如BCL2和BCLL)則主要通過抑制細胞凋亡來發揮最著名的是bcl2家族。該家族成員包括促凋亡基因(如BA、BAD)細胞凋亡的信號轉導途徑主要分為兩大類：外源性途徑(或稱為死亡受體途徑)和內源性途徑(或稱為線粒體途徑)。外源性途徑主導因子(如細胞色素c),從而觸發凋亡。在信號轉導過程中，關鍵的調控分子包括凋亡抑制蛋白(IAPs)和Bcl2家族蛋白。IAPs通過抑制凋亡蛋白酶(Caspases)的活性來阻止凋亡的發生，而Bc12家族蛋白則通過調系統性紅斑狼瘡(SLE)患者的淋巴細胞中觀察到bcl2的高表達，這BclBclxL等)來抵抗細胞凋亡，從而獲得增殖優勢。五、總結與展望在細胞凋亡途徑方面，目前已知的主要包括外源性凋亡途徑(死亡受體途徑)和內源性凋亡途徑(線粒體途徑)。外源性凋亡途徑主IAPs(凋亡抑制蛋白)等也通過調控凋亡信號的轉導和Caspase的活細胞凋亡的過程受多種基因的調控，其中包括促凋亡基因(如 (如caspase-8和caspase-9)和效應caspase(如cas細胞凋亡(apoptosis)指為維持內環境穩定1.凋亡概念的形成1965年澳大利亞科學家發現，結扎鼠門靜4.細胞凋亡的臨床應用基礎研究階段細胞凋亡的研究，其生命壞死(necrosis):壞死是細胞受到強烈理化或生物因素作用引起細胞無序變化的死亡過程。表現為細胞脹大，胞膜破裂，細胞內粒體膜電位消失，通透性改變，釋放細胞色素C到胞漿，核質濃縮，這種降解表現在瓊脂糖凝膠電泳中就呈現特異的梯狀LadFasL結合可以啟動凋亡信號的轉導引起細胞凋亡。它的活化包括一Fas又稱CD95,是由325個氨基酸FasL結合，可通過Fas分子啟動致死性信號轉導，最終引起細胞一酸蛋白酶8(caspase8)酶原發生同嗜性交聯，聚合多個caspase8類似胞凋亡。線粒體還釋放凋亡誘導因子，如AIF,參與激活caspase。因子能誘導細胞色素C釋放和凋亡小體的形胞(type1)中含有足夠的胱解酶8(caspase8)可被死亡受體活化借助凋亡的線粒體途經來放大，而Bid--Bcl-2家族蛋白是將凋亡信號從胱解酶8向線粒體傳遞的信使。目前為止，至少已有14種Caspase被發現，Caspase分子間的同源但是它們活化的過程相似。首先在casp基之間的特定位點被水解去除N-端前肽，然后再在大小亞基之間切為啟動caspase(initiator細胞凋亡，則被募集到Cytc/dATP/Apaf-1組成的凋亡體糖核酸酶(caspase-activateddeoxyribonucleaseCAD),而把它胞結構。其中包括凝膠原蛋白(gelsin)、聚合粘附激酶(focaladhesionkinase,FAK)、P21活化激酶a(PAKa)等。這些蛋白的之不能通過肌動蛋白(actin)纖維來調節細胞骨架。2)FLIPs(FLICE-imhibiroryproterins)能抑制Fas/TNFR1介導的細胞凋亡。它有多種變異體，但其N-端功能前區(Prodomain)完10結合，拮抗它們之間的相互作用，從而抑制Caspase8,10募集到3)凋亡抑制蛋白(IAPs,inhibitorsofApoptosisprotien)為20氨基酸組成的功能區，這對IAPs抑制凋亡是必需要的，它們主要抑制Caspase3,-7,而不結合它的酶原，對Casp在一些白血病中Bcl-2呈過度表達。淋巴細胞的增殖與T淋巴細胞AICD具有共同的信號通路。T淋巴細性感染及腫瘤，但HIV感染后怎樣特異性破壞CD4+細胞呢?一般認應性T淋巴細胞及產生抗體的B淋巴細胞是引起自身免疫病的主要免樣前體蛋白(APP)早老蛋白-1(PS1)早老蛋白-2(PS2)的突變導致家族性阿爾茨海默病(FAD)。研究證明PS參與了神經細胞凋亡的調控PSPS2的過表達能增強細胞對凋亡信號的敏感性。Bcl-2族兩個成員Bcl-x1和Bcl-2參與對細胞凋亡的調節。1951年，巴黎第八大學榮譽教授Glucksmann提出正常脊椎動物地預先確定的。在構成成蟲體時有1090個細胞誕生，131個細胞死亡。1993年，哈佛大學醫學院細胞生物學系終身教授袁鈞瑛發現線蟲的死亡基因ced-3的產物在結構和功能上與哺乳類白細胞介素1β動物基因組中被發現。統稱為胱冬肽酶(caspases)。1994年，瑞士蘇黎世大學分子生命科學研究所Hengartner發現線蟲的存活基因親環蛋白D(ψm、pH、巰基與多肽),整合了電生理、氧化還原與細胞代謝狀態亡中有自摧毀的作用。反過來，如果能防止△4m的耗散，就能避免PT孔道關閉能防止細胞凋亡。當PT孔道與環孢菌素A(cyclosporin致細胞核的變化。但若將誘導生成PT孔道的線粒體與純化的細胞核死亡的bcl-2家族還是促進細胞死亡的Bax家族均以線粒體作為靶細活化前細胞就壞死了。而如果PT孔道的誘導生成是一種比較緩和與暴露在膜外側的PS,再通過簡單的顯色或發光系統進行檢測。由于這是一種凋亡早期的活細胞檢測(懸浮細胞和貼壁細胞都適用),可多種標記的AnnexinV產品，簡便快速，10分鐘就可完成檢測。其中帶熒光標記的AnnexinV-EGFP(EnhancedGreenProtein)及AnnexinV-FITC,靈敏度高，可作為FACS(流式細胞分選)方法篩選凋亡細胞的基礎。由于融合蛋白AnnexinV-EGFP,EGFP與PS的結合比例為1:1,還可進行定量檢測。除此之外，還提供生GlutathioneDetectionKit通過熒光染料monochlorobimane(MCB)此被去除。在Jurcat和一些其它類型的細胞中，細胞膜中有可被凋使其從線粒體釋放至細胞液，結合Apaf-1(apoptoticprotease細胞色素C氧化酶亞單位IV(cytochromecoxidasesubunitIV:ApoAlertTMCellFractionationKit不用超離心，可從凋亡和Western雜交用細胞色素C抗體和CO4抗體標示細胞色素C和CO4的細胞凋亡晚期中，核酸內切酶(某些Caspase的底物)在核小體過地高辛)或直接接到DNA片段的3’-OH端，再通過酶聯顯色或熒ApoAlert?LM-PCRLadderAssayKit通過LM-PCR(ligation-mediatedPCR),連上特異性接頭，專一性地擴增核小體的梯度片段，從而靈受到其它損傷(如機械損傷，紫外線等)也會產生這一現象，因此它癌細胞或凋亡細胞都具有端粒酶的活性。InvitrTRAP-ezeTelemeraseDetectionKit在1996年率先推出。它提供待測樣本中含有端粒酶活性，就能在底物上接上不同個數的6堿基相差六個堿基的DNALadder現象(參見圖4)。Intergen公司還提供用酶聯免疫法(ELISA)檢測的試劑盒.蛋白結合受體后能誘導癌細胞中的細胞毒性T細胞(cycells)等靶細胞。Bcl-2和bcl-(長)作為抗凋亡(bcl-2和bcl-)就根據這一新技術原理，通過檢測fas,bax-alpha和bcl-(長的)1mg/ml的濃度，使用時用PBS稀釋成終濃度為2~5mg/ml。配成1mg/ml的濃度，使用終濃度一般為5~1mg/ml。I期的細胞核呈波紋狀(rippled)或呈折縫樣(creased),部分染胞FSC高而SSC低。根據光散射特性檢測凋亡細胞最主要的優點是3Y啶橙染色法(AcridineOrange