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文檔簡介
關于醫用化學試劑常用化學試劑的分類化學試劑的級別化學試劑的配制溶液的組成量度水的質量要求容量儀器的使用緩沖溶液緩沖溶液的組成緩沖溶液的pH值常用的緩沖體系有機溶劑的極性危險化學藥品的標志化學試劑的安全使用化學實驗綠色化概述常用的冰鹽冷卻劑緩沖溶液的選擇第2頁,共50頁,2024年2月25日,星期天一、常用化學試劑的分類1、無機試劑(1)溶劑:包括各種酸類、堿類
(2)分離試劑:如硫化物、碳酸鹽、氫氧化物
(3)檢驗試劑:如氧化劑、還原劑
(4)輔助試劑:緩沖試劑等
第3頁,共50頁,2024年2月25日,星期天2、有機試劑(1)分析試劑:有機沉淀劑、顯色劑、絡合劑等。(2)輔助試劑,用于溶解和萃取的有機溶劑;用于調節溶液pH值的緩沖劑;抗凝劑;層析劑等。第4頁,共50頁,2024年2月25日,星期天3、生化試劑生化試劑(B.R.)(Biochemicalreagent):指有關生命科學研究的生物材料或有機化合物,以及臨床診斷、醫學研究用的試劑。由于生命科學面廣、發展快,因此該類試劑品種繁多、性質復雜。
第5頁,共50頁,2024年2月25日,星期天(1)按生物體組織中所含有的或代謝過程中所產生的物質來分類,例如蛋白質、核酸、糖類、脂類等。(2)按在生物學研究中的用途來分類,如電泳試劑、免疫試劑、培養基、生化標準品等。(3)按作為研究生物體的工具來分類,如外源凝集素、血液分級部分、酶抑制劑等。(4)根據生物學中一些新技術方法而分類,如親和層析材料、發色基團酶底物、固定化酶等。
第6頁,共50頁,2024年2月25日,星期天二、實驗室常用試劑的級別級別一級試劑二級試劑三級試劑四級試劑我國標準優級純分析純化學純實驗試劑
英文標志標簽顏色G.R.A.R.C.P.L.R.
綠紅藍黃GuaranteedAnalyticalChemicalLaboratoryreagentreagentpurereagent
第7頁,共50頁,2024年2月25日,星期天試劑選用原則:兼顧試驗精密度與試驗成本G.R.:適用于精密的分析實驗和科學研究,可作基準物質C.P.:適用于要求較高的化學實驗和要求不高的分析實驗
A.R.:用于一般科學研究和要求較高的定量、定性分析實驗B.R.:
根據說明使用L.R.:用于要求不高的一般化學實驗第8頁,共50頁,2024年2月25日,星期天其他常見試劑標識縮寫BP(BritishPharmacopoeia):英國藥典BS(BiologicalStain):生物染色劑EP(ExtraPure):特純FCP(Forchromatographypurpose):層析用FMP(Formicroscopicpurpose):顯微鏡用GC(Gaschromatography):氣相色譜HPLC(HighPerformanceLiquidchromatography):高效液相色譜
Ind(Indicator):指示劑
PT(Primaryreagent):基準試劑SP(Spectrumpure):光譜純TLC(ThinLayerchromatography):薄層色譜UV(Ultravioletpure):分光純、光學純、紫析分光光度純第9頁,共50頁,2024年2月25日,星期天三、化學試劑的配制(一)溶液的組成量度(組成標度;濃度)一定量溶液或溶劑中所含溶質的量。定義:質量濃度質量分數物質的量濃度體積分數分子濃度第10頁,共50頁,2024年2月25日,星期天1、物質的量濃度(count-of-substanceconcentrationofB)定義:B的物質的量(nB)除以混合物的體積(V)公式:CB=
世界衛生組織建議:在醫學上表示體液的組成標度時,凡是相對分子質量已知的物質,都應使用物質的量的濃度。VnBSI單位:mol.m-3;常用單位:mol.L-1,mmol.L-1第11頁,共50頁,2024年2月25日,星期天
100ml正常人的血清中含326mgNa+離子,計算血清中Na+離子的濃度。解:Na+
離子的摩爾質量是23g.mol-1。c(Na+)=想一想-1+=++==0.14mol.L-1第12頁,共50頁,2024年2月25日,星期天2、質量濃度(massconcentrationofB)定義:B的質量(mB)除以混合物的體積。公式:
B
=
例:100ml生理氯化鈉溶液中含0.9gNaCl,計算生理氯化鈉的質量濃度。解:ρ(NaCl)===9g.L-1SI單位:kg.m-3;常用單位:g.L-1,mg.L-1第13頁,共50頁,2024年2月25日,星期天3、質量分數(massfractionofB)定義:B的質量(mB)與混合物的質量(m)之比。公式:ωB
=
例:將500g蔗糖溶于水配成850g糖漿,計算此糖漿中蔗糖的質量分數。解:ω蔗糖===0.588(單位為1)第14頁,共50頁,2024年2月25日,星期天4、體積分數(volumefractionofB)公式:φB
=
例:20oC時,將70ml乙醇與30ml水混合,得到96.8ml乙醇溶液,計算所得乙醇溶液中乙醇的體積分數。解:φ(C2H5OH)=定義:混合前B的體積(VB)與混合前各組分體積的總和(∑V)之比。**=0.70=70%=(單位為1)第15頁,共50頁,2024年2月25日,星期天5、分子濃度(molecularconcentrationofB)定義:B的分子數(NB)除以混合物的體積(V)。公式:CB=
例如,我國成年男性和成年女性血液中紅細胞的分子濃度分別為:
4.5×1012
~5.5×1012L-1;
3.8×1012
~4.6×1012L-1SI單位:m-3;常用單位:L-1第16頁,共50頁,2024年2月25日,星期天6、滲透濃度及其在醫學上的意義定義:滲透濃度是指溶液中能產生滲透效應的溶質的微粒(分子或離子)濃度總合。
例:生理鹽水的質量濃度為9g.L-1,則其滲透濃度:cos=c(Na+)+c(Cl-)=2c(NaCl)=2
(NaCl)/M(NaCl)=(2×9g.L-1)/58.5g.mol-1=0.308mol.L-1=308mmol.L-1以正常人血漿的滲透濃度(280~320mmol.L-1)為標準,將醫用溶液分為:等滲溶液:280~320mmol.L-1低滲溶液:
小于280mmol.L-1(溶血)高滲溶液:
大于320mmol.L-1
(質壁分離)第17頁,共50頁,2024年2月25日,星期天(二)水的質量要求3)內毒素(Endotoxin)
革蘭氏陰性細菌的脂多糖細胞壁碎片,又稱之為“熱原”,單位cuf/ml。1、評價水質的常用指標:1)電阻率(electricalresistivity)
衡量實驗室用水導電性能的指標,單位為MΩ.cm,隨著水內無機離子的減少電阻加大則數值逐漸變大,實驗室超純水的標準:電阻率為18.2MΩ.cm。2)總有機碳(TotalOrganicCarbon,TOC)
水中碳的的濃度,反映水中氧化的有機化合物的含量,單位為ppm或ppb。第18頁,共50頁,2024年2月25日,星期天2、實驗室常用的水的種類1)蒸餾水(DistilledWater):將水蒸餾、冷凝的水,蒸二次的叫重蒸水,三次的叫三蒸水。
2)去離子水(DeionizedWater):應用離子交換樹脂去除水中的陰離子和陽離子。3)反滲水(ReverseosmosisWater):水分子在壓力的作用下通過反滲透膜,水中的雜質被反滲透膜截留排出。4)超純水(Ultra-puregradewater):采取綜合技術制得,其標準是水電阻率為18.2MΩ-cm。
第19頁,共50頁,2024年2月25日,星期天分子量10000超濾膜濾過液及濃縮液納濾濃縮液及濾過液第20頁,共50頁,2024年2月25日,星期天特性指標一級二級三級pH(25oC)----5.0~7.5電導率(μS/cm,25oC)≤0.1≤1.0≤5.0電阻率(MΩ.cm,25oC)≥10≥1.0≥0.2吸光度(254nm,1cm)≤0.001≤0.01----可氧化物(mg/L)----<0.08<0.40蒸發殘渣(mg/L)
(105±25℃)
----≤1.0≤2.0可溶性硅
(以SiO2計,mg/L)<0.01<0.02----附1中國國家實驗室用水規格GB6682-92標準第21頁,共50頁,2024年2月25日,星期天附2中國國家實驗室用水GB6682-2000標準特性指標一級二級三級pH(25oC)--------5.0~7.5電導率(mS/m,25oC)≤0.01≤0
.
1≤0.
5電阻率(MΩ.cm,25oC)≥10≥1.0≥0.2吸光度(254nm,1cm)≤0.001≤0.01----可氧化物(mg/L)----<0.08<0.40蒸發殘渣(mg/L)
(105±25℃)
----≤1.0≤2.0可溶性硅
(以SiO2計,mg/L)<0.01<0.02----第22頁,共50頁,2024年2月25日,星期天特性指標Ⅰ級Ⅱ級Ⅲ級pH6.0~7.06.0~7.06.0~7.0電導率(μS/cm,25oC)<0.1<2.0<5.0電阻率(MΩ.cm,25oC)>10>0.5>0.2硅酸鹽(mg/L)<0.01<0.01<0.01重金屬(mg/L)<0.01<0.01<0.01附3美國病理學會(CAP)生化試劑及生化檢驗用水標準第23頁,共50頁,2024年2月25日,星期天附4美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)等級純水標準級別Ⅰ級Ⅱ級Ⅲ級微生物含量(最大每毫升菌落)10103未定硅(mgSiO2/L,最大量微粒)0.050.11.0電阻率(MΩ.cm,25oC)102.01.0微粒0.2μm微孔膜過濾未定未定有機物質活性炭過濾未定未定第24頁,共50頁,2024年2月25日,星期天NCCLS、CAP規定的等級純水的用途級別用途NCCLSⅠ級原子吸收、熒光、酶、高靈敏度層析、電泳、參比液、緩沖液、電解質Ⅱ級一般實驗檢驗,玻璃器皿沖洗Ⅲ級玻璃器皿洗滌,要求不高的定性試驗CAPⅠ級原子吸收、酶、電解質、無機元素、緩沖液、參比液Ⅱ級一般實驗室檢驗、血液學、微生物檢驗等Ⅲ級普通定性測定、尿液檢驗、組織切片、寄生蟲、器皿洗滌第25頁,共50頁,2024年2月25日,星期天1.專門的純水機或超純水機;
2.去離子水重蒸;
3.二次或三次重蒸水;
4.
市場上瓶裝的純凈水或蒸餾水;
不管采用何種途徑,配制流動相應用新鮮水,水質越高放置時間越短。理想的HPLC用水應為18.2Ω的超純水,并通過0.22um的濾膜,除去熱源、有機物、無機離子及空氣等。HPLC用水選擇:第26頁,共50頁,2024年2月25日,星期天(三)容量儀器的使用錐形瓶燒杯刻度試管容量瓶量筒、量杯移液管(吸量管)(單刻度、多刻度)滴定管(酸式、堿式)移液搶(移液器)(Pipette)第27頁,共50頁,2024年2月25日,星期天堿式量筒酸式第28頁,共50頁,2024年2月25日,星期天容量瓶碘瓶、錐形瓶吸量管燒杯第29頁,共50頁,2024年2月25日,星期天移液搶(移液器)(Pipette)第30頁,共50頁,2024年2月25日,星期天鉻酸洗液的配置:稱取重鉻酸鉀適量(35g),加入一定體積的水(175ml),加熱溶解,將濃硫酸(300ml)緩緩滴入。Note:A濃硫酸遇水放熱,防止飛濺傷人
B可重復使用,直至顏色變綠。第31頁,共50頁,2024年2月25日,星期天鹽類分子式100g碎冰中加入鹽的克數可達到的最低溫度(oC)NH4Cl25-15NaNO350-18NaCl33-21CaCl2.6H2O100-29CaCl2.6H2O143-55(四)常用的冰鹽冷卻劑第32頁,共50頁,2024年2月25日,星期天
生物緩沖物質(Biological
buffer
substance):用于生物學和生物化學方面在分離、分析、合成等研究中調節、控制以及減少在其它化學反應中發生的氫離子濃度的變化。生物緩沖物質的質量要求嚴格,如pH值約在6~8之間;在水系中要有較好的溶解性;對生物膜要較無滲透性;受濃度、溫度以及介質中離子的影響要極小;干燥或溶液狀態有極好的穩定性,能抗酶或非酶的降解;對可見光和紫外光有極小的吸收值等。
四、緩沖溶液(一)緩沖溶液的定義:
能抵抗外加少量強酸或強堿,而本身pH值基本不發生變化的溶液。第33頁,共50頁,2024年2月25日,星期天以CH3COOH—CH3COONa為例:CH3COOH+H2OH3O+
+CH3COO-(二)緩沖原理及緩沖溶液的組成共軛酸:抵抗外來堿(CH3COOH)共軛堿:抵抗外來酸(CH3COONa)第34頁,共50頁,2024年2月25日,星期天(三)緩沖溶液的pH值2、pH值的測定:pH值試紙廣泛試紙1-14、9-14;精密試紙1.4-3.0、5.4-7.0、8.0-10.0等pH
計標準緩沖溶液校正使用重蒸水或去離子水
1、pH
值的計算:pH=pKa+lg-第35頁,共50頁,2024年2月25日,星期天(四)緩沖溶液的選擇1.選擇合適的緩沖對,盡可能接近弱酸的pKa。2.總濃度要適當。3.緩沖成分不能與樣品反應;考慮毒性影響。4.計算、配制、驗證。第36頁,共50頁,2024年2月25日,星期天例:配制100mLTris-鹽酸緩沖溶液(0.05mol/L,25oC)。方法:50mL0.1mol/L三羥甲基氨基甲烷溶液與xmL0.1mol/L鹽酸混勻后,加水稀釋到100mL。(M=121.14)pHx/mLpHx/mLpHx/mL7.1045.77.8034.58.5014.77.2044.77.9032.08.6012.47.3043.48.0029.28.7010.37.4042.08.1026.28.808.57.5040.38.2022.98.907.07.6038.58.3019.99.005.77.7036.68.4017.2第37頁,共50頁,2024年2月25日,星期天(五)常用緩沖體系體系名稱緩沖對pH值范圍磷酸鹽緩沖溶液磷酸氫二鈉~磷酸二氫鈉磷酸二氫鈉~磷酸二氫鉀磷酸氫二鈉~氫氧化鈉5.8~
8.04.9~
8.210.9~
12.0Tris-鹽酸緩沖溶液三羥甲基氨基甲烷~鹽酸7.1~
9.0硼砂鹽酸緩沖溶液硼砂~鹽酸8.0~
9.1巴比妥鈉鹽酸緩沖溶液巴比妥鈉~鹽酸6.8~
9.6甘氨酸鹽酸緩沖溶液甘氨酸~鹽酸2.2~
3.6鄰苯二甲酸氫鉀鹽酸緩沖溶液鄰苯二甲酸氫鉀~鹽酸2.2~
3.8檸檬酸檸檬酸鈉緩沖溶液檸檬酸~檸檬酸鈉3.0~
6.6第38頁,共50頁,2024年2月25日,星期天體液的pH值胃液:1.0~3.0唾液:6.0~7.5乳汁:6.6~7.6脊椎液:7.3~7.5血液:7.35~7.45尿液:4.8~7.5第39頁,共50頁,2024年2月25日,星期天五、有機溶劑的極性實驗室常用有機溶劑的極性強弱順序:石油醚<苯<氯仿<乙醚<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇親水性成分:蛋白質、單糖及低聚糖、黏液質、氨基酸、水溶性有機酸、苷類、水溶性色素和生物堿親脂性成分:油脂、脂溶性色素、揮發油、非水溶性有機酸、游離生物堿相似相溶!第40頁,共50頁,2024年2月25日,星期天六、化學試劑的安全使用1、化學試劑存放與保管見光易分解試劑(AgNO3、CHCl3、CCl4):置于棕色瓶中。堿性較強溶液(NaOH、KOH、濃氨水):置于有橡皮塞的玻璃瓶中。過氧化氫(H2O2):見光易分解且易被玻璃中的微量金屬元素催化分解,應置于不透明的塑料瓶中,必要時用黑色紙罩住。第41頁,共50頁,2024年2月25日,星期天2、危險藥品的分類、性質及管理類別代表物質性質注意事項易爆品苦味酸、三硝基甲苯、硝酸銨遇高熱、摩擦、撞擊可能劇烈反應,放熱量大存于陰涼、低矮處,輕拿輕放易燃有機溶劑丙酮、乙醚、甲醇、乙醇、苯沸點低、易揮發、遇明火燃燒存放陰涼處,遠離熱源,注意通風易燃氣體氫氣、乙炔、甲烷撞擊、受熱易燃;與空氣適當比例混合爆炸易燃固體白磷、硫磺、紅磷、鎂粉、鋁粉等自燃(白磷)或燃點低單獨存放于通風干燥處第42頁,共50頁,2024年2月25日,星期天遇水燃燒物鋰、鈉、鉀、電石、鋅粉與水劇烈反應,放出可燃性氣體鋰用石蠟密封;鈉、鉀保存于煤油中;電石、鋅粉置干燥處腐蝕性藥品強酸、強堿、酚、溴腐蝕物品、燒傷皮膚輕拿輕放、遠離氧化劑及易燃易爆物劇毒品氰化鉀、三氧化二砷、汞少量侵入人體引起中毒甚至死亡專人、專柜保管第43頁,共50頁,2024年2月25日,星期天3、實驗室有毒化學品及其危害化合物吸收部位癥狀及后果苯及其同系物呼吸道、皮膚急性中毒:頭暈、頭痛、嘔吐、肌肉痙攣慢性中毒損害造血、神經系統;鼻腔、牙齦出血;肝、腎損害甲醇呼吸道、皮膚吸入中毒損害神經系統,引起視神經疾病;誤服中毒惡心、嘔吐,全身青紫,重者很快死亡四氯化碳(氯仿)呼吸道損害肝臟、腎臟、神經系統;急性中毒頭暈、嘔吐、視力紊亂、黃疸、肝腫大;慢性中毒神經衰弱,胃腸功能紊亂氮氧化物(NO、NO2)呼吸道損害深部呼吸器官即神經系統,不同程度的支氣管炎、肺炎、肺氣腫,嚴重者肺壞疽;高濃度窒息死亡二氧化硫呼吸道強烈刺激粘膜,引起結膜炎、流淚、流涕、咽干、疼痛疊氮鈉(疊氮酸)呼吸道、皮膚抑制細胞色素氧化酶和其它酶,使氧合血紅蛋白形成受阻,顯著降壓;中毒后眩暈、呼吸困難、血壓過低、心動過緩重金屬離子消化道、呼吸道頭痛、頭昏、乏力、發熱;胸痛、呼吸困難、齒齦紅腫酸痛、、食欲不振、腹痛、腹瀉第44頁,共50頁,2024年2月25日,星期天4、個人保護措施(1)防止眼睛受刺激性氣體的熏染,防止任何化學藥品特別是強酸、強堿、玻璃屑等異物進入眼內。(2)禁止用手取用任何化學藥品,使用有毒藥品時,除用藥匙、量器外,必須配用橡皮手套,實驗后馬上清洗儀器用具,立即用肥皂洗手;
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