第一節體液調節是通過化學信號實現的調節第一節體液調節是通過化學信號實現的調節第二章植物細胞工程第二節神經系統通過下丘腦控制內分泌系統第二節神經系統通過下丘腦控制內分泌系統第二節通過體細胞雜交可獲得新的植物體目

錄原生質體培養植物體細胞雜交

圖中顯示的是“馬鈴薯-番茄”，地上結番茄、地下長馬鈴薯塊莖的超級作物。討論：用傳統的有性雜交方法能得到雜種后代嗎？為什么？

不能；

因為兩種生物之間存在著生殖隔離；

那這種打破生殖隔離，實現遠緣雜交育種，獲得“馬鈴薯-番茄”雜種植株的是什么方法？植物體細胞雜交：將兩個來自不同種植物的體細胞融合成一個雜種細胞，并將雜種細胞培育成新的植物體的技術。植物體雜交技術是如何實現的？由該技術培育出的新品種有什么特點呢？

植物細胞除去細胞壁后的部分，包括細胞膜、細胞質、和細胞核。（呈球形）。1.原生質體一、成功培養原生質體是植物體細胞雜交技術的基礎原生質體優勢：沒有細胞壁的阻礙，更容易被轉入外源基因，是植物基因工程的理想受體。同時，沒有了堅硬致密的細胞壁的阻礙，植物細胞之間的融合得以實現。根尖、無菌試管苗葉片、愈傷組織或懸浮培養細胞（1）分離原生質體的材料準備：選取生長旺盛的細胞。2.原生質體制備（2）原生質體的分離方法常用酶解法常用酶：條件溫和、原生質體完整性好、活力高、得率高，而且幾乎所有的植物或它們的器官組織或細胞均可用酶解法獲得原生質體。0.5～0.6mol/L甘露醇（或一定濃度的蔗糖）溶液纖維素酶類、果膠酶類滲透壓調節劑：優點：用較高滲透壓溶液處理細胞目的是使細胞處于微弱的質壁分離狀態，這樣有利于完整的原生質體的釋放，防止原生質體被破壞。酶溶液用G6玻璃砂漏斗過濾滅菌3.原生質體活力檢測A.染色法：B.胞質環流法：是否存在胞質環流判斷原生質體活力；C.滲透壓變化法：活原生質體會隨著外界滲透壓的變化體積變化。如放入高滲溶液，細胞皺縮。D.氧電極法測呼吸速率：活的原生質體在光照下光合放氧，無光呼吸耗氧。染色劑不能穿過活質膜，但質膜受到嚴重損壞使細胞被染色。能不能用質壁分離的方法？(1)材料的種類和生理狀態(4)分離與純化的方法(2)酶的種類、酶解時間（吸水）和溫度（3）酶液的濃度影響原生質體分離的數量和質量的因素（二）回答與基因工程和植物克隆有關的問題：

（1）為了獲取某植物葉片無菌的原生質體，先將葉片經表面消毒并去除下表皮，再將其置于經________________

處理的較高滲透壓的混合酶液中。酶解后，經多次離心獲得原生質體。然后測定該原生質體的活性，可采用的方法有____________________________

（答出2點即可）。過濾滅菌紅墨水染色法、滲透吸水法真題［2020浙江1月］雜交的兩個細胞用纖維素酶、果膠酶混合液處理細胞壁（酶解法）原生質體Ａ、Ｂ經離心、振動、電刺激用聚二乙醇（PEG）誘導融合后的原生質體雜種細胞脫分化細胞分裂愈傷組織雜種植株再分化原生質體融合植物組織培養1.過程去壁再生細胞壁（植物體細胞融合完成的標志，細胞才能分裂）二、由雜種細胞培育出的新植物體可能會具有新的特性2.原理：細胞膜具有一定的流動性植物細胞全能性4.兩個標志（1）植物細胞融合完成的標志：再生出新的細胞壁（2）植物體細胞雜交完成的標志：培育成新植物體5.實例：白菜—甘藍、普通小麥—長穗偃麥草等。5.意義：克服遠緣雜交的不親和性，獲得新品種（沒有產生新物種）3.誘導方法物理法：電刺激、離心、振蕩化學法：聚乙二醇原生質體培養時的培養基滲透壓應低于原生質體分離時的滲透壓，原生質體培養時，其再生出細胞壁是其能進行有絲分裂的前提。注意：一個融合體系中的細胞并非均為雜種細胞，兩個不同親本的原生質體混合后經誘導融合，實際上得到的是各種原生質體的混合物，包括未融合的、部分融合的、同種細胞融合的、不同種細胞融合的原生質體。

思考：利用植物體細胞雜交的方法培育作物新品種過程中，遺傳物質的傳遞是否遵循孟德爾的遺傳規律？【答案】孟德爾的遺傳規律發生在有性生殖的減數分裂過程中，而植物體細胞雜交過程中細胞增殖的方式是有絲分裂，沒有減數分裂，故此過程遺傳物質的傳遞不遵循孟德爾遺傳規律。雜種細胞類型及檢測方法誘導產生的雜種細胞（假設用于雜交的兩種植物細胞分別為A、B）1.未融合的細胞類型為

；2.兩兩融合的細胞類型為

；3.多細胞融合類型為

。A或BAA、BB或ABAAA、BBB、AABB或AABBB等檢測方法:對誘導產生的細胞進行植物組織培養，然后根據得到的植物性狀進行判斷。1.若得到的是一種植物的性狀，說明是

。2.若得到的是具有兩種親本性狀的植物，說明是

。3.若得到的是具有兩種親本性狀的植物，且一種植物的性狀得到加強，則是

。4.若得到的是一種植物的性狀且效果得到加強，則是

。未融合細胞雜種植株多細胞融合體同種細胞融合的結果1978年,梅爾徹斯等科學家首次利用植物體細胞雜交技術獲得了馬鈴薯和番茄的屬間體細胞雜種“馬鈴薯-番茄”植株。以下是植物體細胞雜交技術的流程圖,其中甲和乙分別表示兩種二倍體植物細胞,所含有的染色體組分別是AA和BB。請據圖分析回答問題。應用：植物體細胞雜交的基本流程1.圖中①過程是什么?所用的酶有哪些?去壁,獲得原生質體。纖維素酶和果膠酶。2.在使用化學法進行②過程時,常使用的化學試劑是什么?聚乙二醇。質壁分離和質壁分離復原實驗4.驗證再生出新壁的實驗：高爾基體和線粒體3.參與細胞壁形成的細胞器：3.通過⑥過程獲得的植株,是否一定會表現出甲、乙的性狀?為什么?不一定。雜種細胞培養過程中可能出現染色體的丟失、結構異常等情況,基因之間、基因與基因產物之間、基因與環境之間存在著復雜的相互作用,兩種生物的基因結合到一個細胞中之后,不一定能按照原來的順序表達。4.在植物體細胞雜交過程中,酶解法去除細胞壁、原生質體融合和植物組織培養三個階段的主要原理分別是什么?酶的專一性、細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。5.圖中④⑤階段都需要光照嗎？6.若番茄細胞內有m條染色體，馬鈴薯細胞內有n條染色體，則“番茄-馬鈴薯”細胞在有絲分裂后期含有多少條染色體？

④脫分化階段不需要給予光照，⑤再分化階段需要給予光照，以利于葉綠素的形成。2(m＋n)條。植物體細胞雜交后代的遺傳變化親

本P1:2n(Aabb)與P2:2m(ccDd)生殖類型無性生殖,育種過程中不遵循孟德爾定律變異類型染色體數目變異染色體數兩親本染色體數之和,即2n+2m染色體組數兩親本染色體組數之和,即2+2基因組成兩親本基因型之和,即AabbccDd圖示為“白