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文檔簡介
第一部分線栓模型制作1、實驗器材(從左到右):
第一行:干棉球、酒精棉球、10%水合氯醛+注射器、碘伏+棉簽
第二行:三種不同粗細的魚線(魚線最好在2.0、2.5mm處各用記號筆作好標記,便于觀察進入距離)、彎盤內為手術器材
第三行:記號筆、自制拉鉤(皮筋+曲別針+大頭針)
2、麻醉:
可用飲料瓶自制捕鼠器(適用于不敢手抓大鼠的),用于打麻藥,根據大鼠的重量選擇不同粗細的飲料瓶(太粗了大鼠可在瓶中回頭)。
效果圖3、麻倒后綁在手術臺上。
4、剪去頸前的鼠毛,碘伏消毒。5、沿經部正中切開皮膚。
說明:切開皮膚前最好將結扎動脈的線事先剪好(后面會用到)。下的選0.26mm的線,250-300g的選0.26mm蘸臘的或0.28的都可以。
(2)如果遇到魚線怎么也查不進去的情況,可讓大鼠休息一會,換細點的魚線再試,這種情況不一定都是進到翼腭動脈了,我曾解剖過4例這種情況的大鼠,有三例都是在如顱的地方卡住了,可惜我們手里沒有0.24mm的魚線。
(3)通過實踐,我們認為結扎或夾閉翼腭動脈沒有必要,按我們的方法,熟練的話,從切開到縫合完畢也就是15分鐘,算上準備工作(如麻醉、消毒等)半小時也可以搞定了,這樣一上午兩人作10只大鼠不成問題。
(4)我們體會最好用蘸臘的魚線作模型,好處是進線深度控制的好,不容易出現蛛網膜下腔出血。我們曾試過0.26mm的魚線(不帶臘)在250g以下的大鼠進入深度足有2.5cm
12、成功后結扎中間那根線,可見第一個標記距動脈分叉約2mm。
13、縫合。
14、縫好后用酒精棉球消毒皮膚縫合處。
15、縫好后的效果如圖,外面的魚線最后用記號筆涂黑,便于再灌拔線時觀察。
16、將大鼠放回籠內。
17、2小時再灌。
18、醒后看效果,左爪不能伸展(完全醒后可見繞圈或追尾、傾倒),我們的體會,癥狀2-3分的死亡率高,1-2分的死亡率低,有的大鼠第二天或幾天后可無明顯癥狀,但取腦后還是有梗死灶的。
附:一般文獻上的MCAO制作方法+評分標準
局灶性腦缺血再灌注模型的制備根據longa提出的可逆性大腦中動脈閉塞(MCAo)線栓法并根據大鼠腦解剖結構圖加以改進制作局灶性腦缺血再灌注模型,以10%水合氯醛0.3ml/kg腹腔麻醉,頸正中切口,暴露頸總動脈(CCA)、頸外動脈(ECA)及翼腭動脈,將0.26mm單絲尼龍魚線頭端0.5cm用石蠟包被,并于20mm長處標記,全部大鼠均通過右側CCA切口處插入,翼腭動脈短暫夾閉以防誤插,栓線長度自CCA分叉處約18~20mm,根據動物體重而定,栓塞右側大腦中動脈,然后縫合皮膚,栓線尾端部分固定于皮膚上。缺血達到2h后小心抽出栓線,即形成再灌注。假手術對照只是不插入尼龍魚線,其余步驟同手術組。在缺血期間及再灌注后2h保持體溫在(37±0.5)℃。模型成功的標志為以大鼠手術麻醉清醒后出現左側肢體癱瘓,站立不穩,提尾時向一側轉圈為模型成功的判斷標準。
神經功能缺失體征評分參考Longa及Bederson的5分制法在動物麻醉清醒后24h進行評分。0分:無神經損傷癥狀
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