部分患者在免疫檢查點抑制劑（ICI）治療后出產生嚴重副作用，例如神經免疫相關不良事件（irAE-n）。為了克服診斷和治療挑戰，深入地了解irAE-n的發生機制至關重要。2023年10月12日，NeuroOncol（IF=15.9）雜志上發表了一篇題為“Immunesignaturesofcheckpointinhibitor-inducedautoimmunity-afocusonneurotoxicity”的文章，通過質譜流式細胞技術（CyTOF）發現irAE-n患者存在特異性的免疫細胞失調，并通過Luminex芯片技術發現接受ICI治療的irAE-n患者出現炎癥因子和趨化因子的增加。通過建立診斷模型發現效應記憶型CD8+

T細胞和CXCL10可作為診斷irAE-n的潛在標志物。

研究設計為了尋找irAE-n的癌癥患者中的特異性免疫細胞亞群，研究人員通過質譜流式（CyTOF）分析來自34例irAE-n患者和49名沒有irAE-n的對照患者的外周血樣本，總共檢測分析了48個蛋白靶標。并使用多重細胞因子測定（Luminex）進行血清細胞因子檢測。圖1研究設計研究結果1、CyTOF發現與irAE-n相關的T細胞譜、先天免疫亞群和B細胞譜考慮到ICI治療靶點主要表達在T細胞上，研究首先將CyTOF數據分析集中在T細胞亞群上。評估了每位參與者大約20000個外周血T細胞，并分析了50個不同簇中37個T細胞標記物的表達，發現irAE-n患者的效應記憶型CD8+

T細胞水平增加（圖1A）。由于早期臨床研究報告表明B細胞耗竭療法對irAE-n有益，研究人員分析了非T細胞免疫細胞群體的變化。評估了每個參與者大約50000個非T細胞，并分析了30個簇中21個白細胞標記物，發現irAE-n患者與對照組相比CD11c+cDC減少，NK細胞減少，非經典CD16+CD14-單核細胞減少，同時CD14+

CD11b+單核細胞增加（圖1B）。這些發現表明irAE-n患者的先天免疫細胞失調。此外，結合前期自身抗體數據，發現自身抗體陽性irAE-n患者存在特異性B細胞改變。圖2CyTOF發現與irAE-n相關的細胞亞群2、Luminex發現與irAE-n相關的細胞因子特征采用Luminex液相芯片檢測了血清樣本中45種細胞因子/趨化因子/生長因子。結果顯示介導免疫細胞運輸的趨化因子顯著增加，如CXCL10、CCL3、CCL4、CCL5。此外，TNFα、IL-1R顯著增加。此外生長因子VEGF-α、PIGF-1、PDGF-BB、HGF在irAE-n中顯示出更高濃度。總之，這些結果表明，接受ICI治療的irAE-n患者出現炎癥并增強免疫細胞遷移（圖3）。圖3Luminex發現與irAE-n相關的細胞因子特征3、irAE-n的潛在外周血標志物其他病因（例如感染等）可能會出現irAE-n類似的體征和癥狀。因此，鑒定ICI誘導的irAE-n自身免疫標志物非常重要。研究人員使用多因素邏輯回歸研究了不同外周血免疫標志物與irAE-n之間的關系，發現具有較高的CD8+EM1T細胞比例（閾值=T細胞的7.2%）和較高的CXCL10濃度（閾值=49.5pg/ml）的患者出現irAE-n的可能性較高（圖4A、4B）。CD8+EM1T細胞比例和CXCL10濃度診斷irAE-n準確度達到82.1%（圖4C）。CD8+EM1T細胞頻率和CXCL10水平的低相關性表明這些參數與irAE-n獨立相關（圖4D）。總之，研究結果表明CD8+EM1T細胞和CXCL10可能是ICI誘導的自身免疫的標志物。圖4CD8+EM1T細胞和CXCL10可作為irAE-n外周血標志物總結與討論本研究采用CyTOF發現神經免疫相關不良事件（irAE-n）患者的特異性免疫細胞亞群，發現免疫細胞失調（T細胞亞群、先天免疫亞群和B細胞亞群），并通過Luminex芯片技術發現接受ICI治療的irAE-n患者出現炎癥并增強免疫細胞遷移。結合前期結合前期自身抗體數據，發現自身抗體陽性irAE-n患者存在特異性B細胞改變。最后通過建立診斷模型發現CD8+效應記憶T細胞和CXCL10可作為診斷irAE-n的有潛力的標記物。總之，研究通過聯合CyTOF、Luminex和自身抗體分析，全面揭示了檢查點抑制劑誘導的自身免疫免疫特征。華盈生物：單細胞+空間+蛋白組系統性服務平臺1）“蛋白芯片”和“蛋白質譜”雙平臺技術服務體系將完美助力于血液蛋白、細胞因子、外泌體蛋白標志物的發現，雙管齊下，最大限度的不漏篩低豐度的血液蛋白，發現最具臨床意義的標志物。2）包含大約2萬多種人類蛋白的“人類蛋白組芯片”，可用來全面篩選血液自身抗體，發現腫瘤、自身免疫疾病等新的自身抗體診斷標志物。3）“ISOP單細胞功能蛋白組”可實現對單個細胞亞群分泌蛋白組的檢測，發現關鍵的多功能性細胞，作為腫瘤免疫治療、CAR-T細胞治療的預測標志物。4）質譜流式細胞術（CyTOF）可以支持全血樣本、組織樣本、單細胞懸液等多種樣本類型的分析，抗體庫包含常用的人源抗體500多種，鼠源抗體300多種，可以實現對細胞亞型、細胞功能的精準分析。5）空間單細胞蛋白組學（IMC+PCF）可獲得特定組織結構中細胞亞群數量、細胞鄰域的關系圖譜、細胞通訊網絡、以及免疫檢查點等關鍵功能蛋白在單個細胞上的表達定位等深度空間信息，可用于疾病機制靶點和診斷、療效、預后等標志物的發現。

業務咨詢400-869-2936微信同號）相關文獻Müller-JensenL,SchulzAR,MeiHE,etal.

Immunesignaturesofcheckpointinhibitor-inducedautoimmunity-afocusonneurotoxicity.

NeuroOncol.2023Oct12:noad198.doi:10.1093/neuonc/noad198.Epubaheadofprint.|工作郵箱：market@|官網鏈接：#

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